前列腺癌组织中TRAIL受体的表达及意义

谢礼仁，潘卫兵，曾 灿，朱 斌，周建华

(1.深圳市坪山新区人民医院泌尿外科，广东 深圳 518118；

2.深圳市龙岗区人民医院泌尿外科，广东 深圳 518172)

前列腺癌组织中TRAIL受体的表达及意义

谢礼仁1，潘卫兵1，曾 灿1，朱 斌1，周建华2

(1.深圳市坪山新区人民医院泌尿外科，广东 深圳 518118；

2.深圳市龙岗区人民医院泌尿外科，广东 深圳 518172)

目的 探讨前列腺癌组织中TRAIL受体的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测45例前列腺癌组织及15例良性前列腺增生组织中DR4、DR5及DcR1受体的表达水平。结果高分化、中分化、低分化前列腺癌组织与前列腺增生组织比较DR4、DR5受体的表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05)，但高分化、中分化、低分化前列腺癌组织中DcR1的表达水平均明显低于前列腺增生组织，其差异均有统计学意义(P＜0.05)，且DcR1的表达水平在高分化、中分化、低分化前列腺癌组织中依次降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论TRAIL受体DcR1在前列腺癌的发生发展中可能发挥重要作用。

前列腺癌；细胞凋亡；免疫组织化学；肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体；受体

前列腺癌是最常见的男性恶性肿瘤之一，在我国的发病率虽然较西方低，但是随着生活水平和诊断技术的不断提高，其发病率也在不断上升[1]。传统的治疗方法包括手术、激素治疗、放化疗等，对于早期患者效果尚可，但是对于中晚期患者疗效不佳，且存在治疗后复发、转移[2]。基于这一现状，前列腺癌治疗亟待改进，需要更精确的靶向和对恶性细胞更为有效的杀灭。近年来，肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)被发现具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，且前列腺是TRAIL及其受体(TRAILR)高表达组织之一，因此TRAIL成为前列腺癌的基因治疗的新方向[3]。本研究采用免疫组织化学方法检测了45例不同分化程度前列腺癌组织中TRAIL死亡受体DR4、DR5及诱骗受体DcR1的表达水平，并与15例良性前列腺增生组织进行对照，以探讨前列腺癌组织TRAIL受体表达及与病理分级的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 经病理证实的45例前列腺癌组织标本均来自我院，根据按WTO病理分级标准包括低分化腺癌15例、中分化腺癌15例、高分化腺癌15例，同样选取经病理证实的为良性前列腺增生组织标本15例作为对照。

1.2 免疫组织化学方法检测方法 采用SP免疫组织化学DAB染色法，步骤：将切片进行常规脱蜡、水化，用双氧水(3%)将内源性过氧化物酶去除，微波抗原修复采用枸橼酸盐缓冲液进行，予兔血清(5%)封闭15 min后分别滴加DR4、DR5及DcR1单克隆抗体，4℃过夜；滴加生物素标记的二抗IgG，置于室温下15 min后滴加链酶亲和素-过氧化物酶15 min，依次进行DAB染色、苏木素复染、梯度酒精脱水和二甲苯透明，最后采用中性树胶进行封片。阴性对照以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗，按着色范围及强度判断结果。DAB显色试剂盒和超敏SP(羊)免疫组化试剂盒购自武汉博士德公司。羊抗人受体DR4、DR5及DcR1单克隆抗体购自Santa Cruz公司。DR4、DR5及DcR1阳性表达的平均吸光度值(A)采用HPIAS-1000型图像分析系统测定，该切片的代表值为随机测定的5个高倍视野的平均值。

1.3 统计学方法 应用SPSS17.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（±s)表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

高分化、中分化、低分化前列腺癌组织与前列腺增生组织比较DR4、DR5受体的表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05)，但高分化、中分化、低分化前列腺癌组织中DcR1的表达水平均明显低于前列腺增生组织，差异有统计学意义(P＜0.05)，且DcR1的表达水平在高分化、中分化、低分化前列腺癌组织中依次降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 前列腺增生及不同病理分级前列腺癌组织TRAILR表达水平±s)

表1 前列腺增生及不同病理分级前列腺癌组织TRAILR表达水平±s)

注：与前列腺增生比较，aP＜0.05；与高分化前列腺癌比较，bP＜0.05；与中分化前列腺癌比较，cP＜0.05。

3 讨论

近年来研究证明肿瘤是由细胞增殖和凋亡失衡所引起，其发生、发展及消退与细胞凋亡有密切关系，因此细胞增殖增加和凋亡减少都参与了前列腺癌的形成过程[4]。Drachenbery等[4]研究发现前列腺癌的细胞增殖及细胞凋亡指数都明显增高。肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体TRAIL于1995和1996年分别分离并鉴定，是在TNF和FASL之后TNF超家族中的第3个凋亡分子，其特点在于能有效、快速地诱导肿瘤细胞凋亡，但不作用于大多数正常组织[5]。TRAIL受体包括DR4、DR5、DcR1、DcR2和OPG等，其中DR4、DR5为死亡受体，不同程度的表达于各种肿瘤细胞及正常细胞，而DcR1、DcR2为诱骗受体，在肿瘤组织中不表达或极少表达，而表达于正常组织中。OPG主要调节骨密度，DcR1、DcR2在正常组织中通过与死亡受体DR4、DR5竞争性的结合TRAIL，从而使正常组织不被TRAIL杀伤[6]。因此，TRAIL能够选择性诱导肿瘤细胞凋亡而未发现明显的副作用[7]。基于TRAIL的这一特性，其被作为多种肿瘤基因治疗的靶基因[8]。而TRAIL受体表达的种类和数量是TRAIL治疗肿瘤是否敏感的关键环节。因此，我们应用免疫组织化学方法对前列腺癌组织表达TRAIL受体表达的种类和数量进行了观察。

本研究结果显示，前列腺癌组织与前列腺增生组织比较DR4、DR5受体的表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05)，但高分化、中分化、低分化前列腺癌组织中DcR1的表达水平均明显低于前列腺增生组织(P＜0.05)，且DcR1的表达水平在高分化、中分化、低分化前列腺癌组织中依次降低(P＜0.05)。提示由于TRAIL受体DcR1的大量表达于良性前列腺增生组织而使其避免被TRAIL杀伤，DcR1在前列腺癌的发生发展中可能具有重要作用，同时本研究也证明前列腺癌对TRAIL在受体水平上敏感，为TRAIL治疗前列腺癌提供基础。

综上所述，TRAIL受体DcR1在前列腺癌的发生发展中可能发挥重要作用，对前列腺癌组织各种TRAIL受体的表达进行研究可以进一步了解TRAIL受体与前列腺癌的关系。

[1]曾 翔,梁 勇,付光庆.IGF-1、PCNA和Caspase3在前列腺癌组织的表达及临床意义[J].海南医学,2013,24(19):2809-2812.

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[3]Wu GS.TRAIL as a target in anti-cancer therapy[J].Cancer Lett, 2009,285(1):1-5.

[4]Drachenberg CB,Ioffe OB,Papadimitriou JC.Progressive increase of apoptosis in prostatic intraepithelial neoplasia and carcinoma: comparison between in situ end-labeling of fragmented DNA and detection by routine hematoxylin-eosin staining[J].Arch Pathol Lab Med,1997,121(1):54-58.

[5]曹关义,刘 霞,李维前,等.TRAIL联合5-Fu对结肠癌细胞的增殖抑制作用及机制探讨[J].山东医药,2013,53(30):16-20.

[6]郝建军.TRAIL及其受体在肿瘤治疗中作用机制研究的现状与展望[J].河北医科大学学报,2012,33(7):862-866.

[7]朱 鑫,何卫阳.TRAIL在前列腺癌的研究进展[J].国际泌尿系统杂志,2012,32(4):518-521.

[8]Wang S.The promise of cancer therapeutics targeting the TNF-related apoptosis-inducing ligand and TRAIL receptor pathway[J].Oncogene,2008,27(48):6207-6215.

Expression of TRAIL receptors in human prostate cancer and its significance

XIE Li-ren1,PAN Wei-bing1,ZENG Can1,ZHU Bin1,ZHOU Jian-hua2
1.Department of Urology,the People's Hospital of Pingshan District of Shenzhen,Shenzhen 518118,Guangdong,CHINA;2.Department of Urology,the People's Hospital of Longgang District of Shenzhen,Shenzhen 518172,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of TRAIL receptors in human prostate cancer and its clinical significance.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression levels of DR4,DR5 and DcR1 receptors in 45 cases of prostate cancer and 15 cases of benign prostatic hyperplasia.ResultsThere were no significant differences in the expression levels of DR4 and DR5 receptor in well-differentiated,moderately differentiated,poorly differentiated prostate cancer and benign prostatic hyperplasia(P＞0.05).However,the expression levels of DcR1 in well-moderately differentiated,poorly differentiated prostate cancer tissue were significantly lower than that in benign prostatic hyperplasia(P＜0.05).And the expression levels of DcR1 in well-differentiated,moderately differentiated,poorly differentiated prostate cancer tissues were gradually reduced(P＜0.05).ConclusionTRAIL receptors DcR1 may play an important role in the development of prostate cancer.

Prostate cancer;Apoptosis;Immunohistochemistry;Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand;Receptor

R737.25

A

1003—6350(2014)15—2191—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.15.0853

2014-03-19)

深圳市龙岗区2013年度科技计划项目(编号：YS2013024)

谢礼仁。E-mail：lirenx1972@126.com