不同产地生五味子饮片中五味子醇甲含量比较

周竹琇

(江苏省中医院 江苏 南京 210029)



不同产地生五味子饮片中五味子醇甲含量比较

周竹琇

(江苏省中医院 江苏 南京 210029)

目的：测定和比较不同产地生五味子饮片中五味子醇甲的含量。方法：利用高效液相色谱法测定不同产地生五味子饮片中五味子醇甲的含量，色谱柱为Lichrospher5-C18(5μm，4.6mm×250mm)，流动相为甲醇-水(60∶40)，流速为1.0mL/min，检测波长为250nm，柱温为30℃。结果：不同产地生五味子饮片中五味子醇甲的含量不同，但各个产地的五味子醇甲含量均大于0.4%。结论：采用高效液相色谱法可以准确测定五味子醇甲含量，操作方法简单、重现性较好。

五味子；五味子醇甲；产地;含量测定

五味子，俗称秤砣子、山花椒、面藤、药五味子、五梅子等，最早列于《神农本草经》上品，作为一种中药，其主要功效为滋补强壮之力，具有极高的药用价值[1]。五味子性温、酸、甘，归肺、心、肾经，为干燥成熟果实，属木兰科，植株可供观赏。五味子有南北之分，分布于河北、吉林、辽宁、黑龙江等地为北五味子，分布于四川、云南、陕西等地则为南五味子。五味子主要有效成分包括有机酸、挥发油和木脂素等三种，大量研究文献表明，木脂素是五味子最主要的一种有效成分，并且在《药典》中明确规定，该药材质量控制的指标是五味子醇甲[2]。因此本文通过测定不同产地生五味子饮片中五味子醇甲的含量，比较不同产地生五味子的质量。

1 仪器与试药

仪器：高效液相色谱仪选用安捷伦公司提供的AgiLent 1100LC液相色谱仪，采用昆山超声仪器有限公司提供的KQ-500E型医用超声清洗器，以及石英亚沸重蒸水器。

试药：自制双蒸水，甲醇(分析纯、色谱纯)，五味子醇甲对照品由中国食品药品检定研究院提供(批号为11857-200309)，五味子饮片选择和兴堂中药饮片加工厂提供的中试产品。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱为Lichrospher5-C18(5μm，4.6mm×250mm)，流动相为甲醇-水(60∶40)，流速为1.0mL/min，检测波长为250nm，柱温为30℃，每次进样量为10μL。

2.2 对照品溶液制备

精密称取适量经105℃干燥后恒温的五味子醇甲对照品0.12g于25mL量瓶中，加入甲醇溶液充分溶解，稀释至刻度后摇匀，即得含量为0.446mg/mL的五味子醇甲对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备

取适量五味子样品粉末，过三号筛(筛孔内径为355±13μm)，精密称取0.2g于25mL容量瓶中，加入约23mL甲醇溶解。以20kHz频率，250W功率做超声处理20min后取出，再加入甲醇至刻度，充分摇匀后进行滤过，所得滤液作供试品溶液使用。

2.4 线性关系考察

分别精密量取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL五味子醇甲对照品溶液(0.446mg/mL)，置于五个20mL的容量瓶中，加入适量甲醇分别配制成11.15、22.30、44.6、66.9、89.2 μg/mL的对照品溶液。利用上述色谱条件，分别精密吸取10μL对照品溶液注入高效液相色谱仪中，根据色谱图绘制标准曲线，横坐标为对照品浓度，纵坐标为峰面积积分值[3]。得回归方程为Y=2119582X-1017279(r=0.9999)，回归结果显示，在0.115～0.892μg范围内，五味子醇甲呈现较好的线性关系。

2.5 精密度检验

精密吸取10μL五味子醇甲对照品溶液(0.446mg/mL)，连续进样6次，通过峰面积计算精密度，相对标准偏差RSD=0.75%，结果表明，仪器的精密度较好。

2.6 稳定性检验

精密吸取10μL五味子供试品，分别在0、2、4、8、12、16、20h注入高效液相色谱仪中，通过峰面积计算出稳定性，相对标准偏差RSD=1.51%，计算结果表明，供试品在20h内相对稳定。

2.7 重复性检验

精密平行称取6份0.2g生五味子，按照供试品溶液制备操作步骤，制得6份供试品溶液，精密吸取10μL注入液相色谱仪内，通过计算求出相对标准偏差RSD=0.88%，表明该实验重复性较好。

2.8 加样回收率检验

精密量取含量已知的生五味子样品，加入适量五味子醇甲对照品溶液，按供试品项操作，并按照含量测定的方法测定，计算结果显示，相对标准偏差RSD=1.24%，平均加样回收率为99.73%。详见表1。

2.9 不同产地生五味子饮片中五味子醇甲含量测定

分别称取八个不同产地生五味子样品，分别来自河北安国市、陕西商州、沈阳苏家屯区、辽宁丹东、吉林白山、黑龙江鸡西、辽宁抚顺、黑龙江绥化。精密称取后按供试品液项下操作，在上述色谱条件下进行分离，进样量为10μL，峰面积测定后计算五味子醇甲含量。测定结果分别为0.557%，0.621%，0.504%，0.405%，0.549%，0.542%，0.408%，0.471%。

表1 加样回收率检验结果

3 讨论

本实验中流动相的选择参考2005版药典五味子项下及文献，有研究者曾用流动相为甲醇-水(55∶45)、甲醇-水(62∶38)、甲醇-水(13∶7)，但均未得到比较满意的分离效果[4]。因此本文根据以往经验，选择甲醇-水(60∶40)作为流动相，可取得较佳效果。

五味子药用价值较大，具有敛肺止咳、涩精止泻、生津敛汗之功效，对于一切气血耗散的虚脱、休克，均可配上补药服用[5]。其主要活性成分木脂素是抗肝脏损伤、治疗神经衰竭的关键成分。现行药典以五味子里含有的五味子醇甲作为该药材质量控制的一个指标。本文采用高效液相色谱法，测定八个不同地区生产的五味子饮片中五味子醇甲的含量，测定结果显示，不同地区的饮片五味子醇甲含量不同，但均高于0.40%。含量不同可能与五味子的种植、管理、采收以及加工等方面有关，因此，应该提高五味子种植、管理、采收以及加工等工作的重视程度，从而提高五味子的质量。

[1] 张春辉,段少丽,范晓庆.不同产地五味子中五味子醇甲的含量测定及分析比较[J].中国药事,2008,22(8):701-702.

[2] 邢文善,林大专,张凌嬴.长春地区不同药店的五味子药材质量比较[J].中外医疗,2010,29(25):122-123.

[3] 施祖勇,谭军.高效液相色谱法测定复方益肝灵片中五味子醇甲、五味子醇乙和五味子甲素的含量[J].中南药学,2011,9(4):264-267.

[4] 郭美华,胡宝荣,李丹露,等.高效液相色谱法测定安神益心液中五味子醇甲含量[J].医药导报,2010,29(11):1487-1488.

[5] 谭忠谋,杨帆,韦升坚.HPLC法测定消渴灵片中五味子醇甲的含量[J].中国中医药现代远程教育,2012,10(3):143-144.

(责任编辑：魏 晓)

2014-08-07

周竹琇(1986—)，女，江苏省中医院中药师，研究方向为中药调配。

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1673-2197(2014)23-0017-02