H PLC测定注射用阿魏酸钠含量

游蓉丽 李明花 乔玉峰 韩佩莲

（1山西振东制药股份有限公司，山西 长治 047100；2山西振东泰盛制药有限公司，大同 037300）

H PLC测定注射用阿魏酸钠含量

游蓉丽1李明花1乔玉峰1韩佩莲2

（1山西振东制药股份有限公司，山西 长治 047100；2山西振东泰盛制药有限公司，大同 037300）

目的：对高效液相色谱法（HPLC）测定注射用阿魏酸钠含量的方法进行研究。方法：色谱条件：C18柱，流动相为甲醇-水-醋酸（30∶69∶1.5），检测波长为322 nm。结果：该方法的重复性RSD=0.13%，n=6。结论：该方法操作简便、快捷、重复性好，可作为注射用阿魏酸钠的含量测定方法。

高效液相色谱法；注射用阿魏酸钠；含量

注射用阿魏酸钠为无菌粉针剂产品，属于抗血小板聚集药。参照《中国药典》2010年版二部[1]附录药品质量标准分析方法验证指导原则及通过对注射用阿魏酸钠含量测定进行方法学研究，认为该方法简便、快捷、重现性好，结果准确可靠。

1 仪器与试药

1.1 仪器

高效液相色谱仪：岛津 LC-20AT高压二元泵，SPD-M20A二极管阵列检测器以及LCsolution色谱工作站；电子分析天平（梅特勒AX105）、紫外-可见分光度计（岛津UV2550）。

1.2 试剂

阿魏酸对照品，批号：110773-201012，规格：50 mg，来源：中国食品药品检定研究院（供含量测定用），含量：99.6%（使用前，置五氧化二磷减压干燥12小时以上）。供试品：注射用阿魏酸钠，规格：0.1 g，批号：1001291、1001301、1106301，来源：山西振东泰盛制药有限公司。甲醇（色谱纯）、醋酸（色谱纯）。

2 色谱条件

色谱条件与系统适用性试验参照国家食品药品监督管理总局标准YBH07352006。

2.1波长选择

取阿魏酸对照品适量，制成1 mL中含0.1 mg的溶液，在 190～ 360 nm进行全波长扫描，在322 nm有最大吸收。

2.2 色谱柱选择

色谱柱：C18柱（4.6 mm×250 mm；5 μm）；流动相：甲醇-水-醋酸（30∶69∶1.5）；检测波长：322 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：25℃；进样量：20 μL。

3 方法学实验

3.1 专属性

注射用阿魏酸钠为无菌粉针剂，未添加任何辅料，无辅料干扰。

3.2 线性关系测定

取阿魏酸对照品20 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取2，3，5，7，8 mL，分别置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取上述溶液各 20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。

表1 阿魏酸含量线性关系测定

图1 阿魏酸含量线性关系

对以上数据进行线性回归，得回归方程为：y=474 40x-271 406，相关系数r=0.999 3。由结果可见，在8～ 32 μg/mL浓度范围内，供试品浓度与其峰面积线性关系良好。

3.3 溶液的稳定性试验

避光操作，取阿魏酸对照品 20 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别于第0，2，4，6，8，10小时精密量取 20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图。

由表2可见，其RSD值为0.35%，表明本品在配制后8小时内较稳定。

表2 阿魏酸溶液含量稳定性试验结果

3.4 重复性试验

取批号为1001291的注射用阿魏酸钠20 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 5 mL置 50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。重复进样6次，记录色谱图。

由表 3可见，其 RSD值为 0.13%，表明本方法的重复性良好。

表3 阿魏酸重复性试验结果

3.5 回收率试验

因注射用阿魏酸钠为无菌原料药直接分装的无菌粉针剂，处方中无任何辅料，采用模拟处方回收率进行试验。精密称取阿魏酸钠原料 16，20，24 mg各3份，分别置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取上述溶液各20 μL分别注入液相色谱仪，记录色谱图，计算回收率。实验结果见表4。

表4 阿魏酸回收率试验结果

3.6 含量测定

分别取三批样品（约相当于阿魏酸20 mg），精密称定，置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取此溶液5 mL，置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图。另取阿魏酸对照品，同法测定，按外标法以峰面积计算，结果乘以1.298 8，即得供试品中阿魏酸钠（C10H9NaO4）的含量。结果与法定检测结果比较见表5。

表5 注射用阿魏酸钠含量测定结果

4 讨论

根据上述各项测定结果，说明注射用阿魏酸钠的HPLC测定结果较准确可靠，且此分析方法操作简便、灵敏度高、快捷、重现性好，可作为注射用阿魏酸钠的含量测定方法。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（2010年版）二部[S].北京：中国医药科技出版社，2010.

Content Determination of Sodium Ferulate for Injection by HPLC

You Rongli1，Li Minghua1，Qiao Yufeng1，Han Peilian2
（1 Shanxi Zhendong Pharmaceutical Co.， Ltd， Shanxi Changzhi 047100，China；2 Shanxi Zhendong Taisheng Pharmaceutical Co.，Ltd，Datong 037300）

Objective:To research the method for the content determination of sodium ferulate for injection by HPLC.Methods:C18column was used with a mobile phase of methanol-water-acetic acid （30∶69∶1.5）.The detection wavelength was at 322 nm.Results:The recovery of the method was RSD=0.13% （n=6）.Conclusion:The method is simple，rapid and reproducible，which can be used for the content determination of sodium ferulate for injection.

HPLC；Sodium Ferulate for Injection；Content

10.3969/j.issn.1672-5433.2014.10.005

2014-06-05）

游蓉丽，女，博士。研究方向：药效学。E-mail：sxzdyrl@163.com

韩佩莲，女，主管药师。研究方向：药物分析技术。通讯作者E-mail：sxtshpl@163.com