多指标综合评价不同产地前胡药材质量*

任 荣，李正翔

（天津医科大学总医院，天津 300052）

多指标综合评价不同产地前胡药材质量*

任 荣，李正翔

（天津医科大学总医院，天津 300052）

[目的]采用多指标法研究并建立前胡质量评价系统,进而对不同产地前胡质量进行差异性分析。[方法]对前胡水分、总灰分、酸不溶性灰分和醇溶性浸出物分别进行测定,并且采用高效液相色谱法同时测定前胡中白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量,将各个指标与含量相结合，建立前胡质量评价体系,并对不同产地前胡进行差异性分析和评价。[结果]不同产地前胡质量虽有差异,但均能符合《中国药典》2010版规定。[结论]多指标结合含量测定的质量评价体系可用于不同产地前胡的等级评价,可以为扩大前胡的种植、栽培提供了理论依据。

前胡；多指标；含量测定；产地差异；质量评价

前胡为伞形科植物白花前胡（Peucedanum praeruptorum Dunn）的干燥根，在浙江、江西、安徽、福建、江苏、四川等省份均有分布[1]，具有疏散风热、降气化痰作用，临床上用于治疗风热咳嗽痰多，痰热喘满，咯痰黄稠等[2-3]。临床上常与其他药物组成复方使用[4]，如方剂前胡汤、前胡饮和前胡犀角汤等。前胡主要生理活性成分为各种类型的香豆素化合物，其中白花前胡甲素、白花前胡乙素为主要有效成分[5]。由于前胡的种植范围广，各产地的气候、自然环境有很大差异[6]，受各种因素影响，不同产地前胡药材质量可能存在差异，因此有必要对不同产地前胡药材进行综合质量评价，为规范临床用药提供依据，进一步规范前胡药材的合理化种植。前胡中含有多种生物活性成分,如何评价多种生物活性成分中药材的质量,分析影响中药材质量的生态环境因子差异,是现代中药产业研发中的关键问题[7-8]。笔者对不同产地前胡质量进行全面的综合评价，建立其质量评价体系。本研究将水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物、白花前胡甲素、白花前胡乙素含量测定等多项指标结合起来，对不同产地前胡进行综合质量评价。白花前胡甲素、白花前胡乙素的结构式见图1。

1 仪器与试药

LC-10ATvp型高效液相色谱仪（岛津，日本），SPD-10Avp紫外检测器（岛津，日本）。白花前胡甲素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111711－200602），白花前胡乙素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111904-201203），前胡样品的采集见表1。中药材由亳州中药总公司提供，并经天津医科大学总医院药剂科胡建平副主任药师鉴定为伞形科植物白花前胡（Peucedanum praeruptorum Dunn）的干燥根。甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

图1 白花前胡甲素（A）和白花前胡乙素（B）的结构式Fig.1 Structural formula of praeruptorin A（A）and praeruptorin B（B）

2 方法与结果

2.1 水分、灰分及浸出物测定 药材水分、总灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物的测定在一定程度上可以反映药材的质量，本研究依据《中国药典》2010版对不同产地前胡药材进行相应测定。结果见表1。

2.2 不同产地前胡白花前胡甲素、白花前胡乙素含量的比较测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱：岛津ULTRON VX-ODS（250 mm×4．6 mm，5 μm）色谱柱，流动相：甲醇－水（7∶3），检测波长：321 nm，流速：1.0 mL/min。柱温：室温，20 μL定量环进样。对照品及样品色谱图见图2。

表1 不同产地前胡水分、总灰分和酸不溶性灰分测定结果(n=3)Tab.1 Determination of water,total ash and acid-insoluble ash in Radix Peucedani from different districts(n=3)%

图2 HPLC图谱Fig.2 HPLC chromatograms

2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取白花前胡甲素对照品、白花前胡乙素对照品适量，分别加甲醇制成0.102 mg/mL和0.039 6 mg/mL的对照品储备液。

2.2.3 供试品溶液的制备 精密称定各品种前胡药材粉末（过3号筛）约0.5 g，置具塞锥形瓶中，精密加入氯仿25mL，称定质量，超声处理（功率250W，频率33 kHz）20 min，放冷，用氯仿补足减失质量，精密吸取上清液5 mL，蒸干，残渣加甲醇溶解，定容至25 mL，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，即得。

2.2.4 线性范围考察 取“2.2.2”项下对照品储备液，加甲醇制成含白花前胡甲素10.2、20.4、50.1、71.4、102 μg/mL及白花前胡乙素3.96、7.92、19.8、27.7、39.6 μg/mL的系列混合对照品溶液，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定色谱峰面积，以对照品浓度（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，计算回归方程：白花前胡甲素：＝52985X+9848.1（r＝0．9999），白花前胡乙素：＝51 777X＋24 258（r＝0．999 9），结果表明：白花前胡甲素、白花前胡乙素分别在10.2～102 μg/mL，3.96～39.6 μg/mL范围内，呈良好的线性关系。结果见表2、表3。

表2 白花前胡甲素标准曲线Tab.2 Standard curve of praeruptorin A

表3 白花前胡乙素标准曲线Tab.3 Standard curve of praeruptorin B

2.2.5 精密度实验 取“2.2.2”项下对照品溶液，连续进样6次，测定两种对照品峰面积，得出白花前胡甲素、白花前胡乙素RSD分别为0.96%和0.92%。结果见表4、表5。

表4 白花前胡甲素精密度实验Tab.4 Precision test of praeruptorin A

表5 白花前胡乙素精密度实验Tab.5 Precision test of praeruptorin B

2.2.6 重复性实验 按“2.2.3”项下方法平行制备6份供试品溶液（产地安徽），分别测定色谱峰面积，白花前胡甲素RSD为1.53%（n＝6）。白花前胡乙素RSD为1．73%（n＝6），结果表明本法重复性良好。结果见表6。

表6 重复性实验Tab.6 Reproducibility testmg/g

2.2.7 稳定性实验 取“2.2.3”项下供试品溶液（产地安徽），分别于0、2、4、6、10、24 h进样，测定色谱峰面积，白花前胡甲素RSD为1.24%（n＝6），白花前胡乙素RSD为1．12%（n＝6），结果表明供试品溶液在24 h内稳定。结果见表7。

表7 稳定性实验Tab.7 Stability test mg/g

2.2.8 加样回收率实验 取6份已知含量的样品（产地安徽）各约0.25 g，精密称定，每份分别精密加入适量的白花前胡甲素、白花前胡乙素对照品，按供试品溶液制备及测定方法操作，进行色谱分析，结果见表8。

表8 加样回收率实验结果(n=6)Tab.8 Results of recovery tests(n=6)

2.2.9 样品测定 取不同产地的前胡样品，按“2.2.2”项下操作，每个产地样品平行制备3份，按上述色谱条件测定，用外标法计算白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量。结果见表9。

3 讨论

本研究对前胡的水分、总灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物进行检测，同时结合前胡中两种主要成分白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量测定结果，建立全面的前胡药材质量评价体系，并通过此体系综合分析不同产地前胡药材的质量差异。

表9 不同产地前胡中白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量Tab.9 Determination of praeruptorin A and B in Radix Peucedani from different habitats

白花前胡甲素和白花前胡乙素均为香豆素类物质，极性较小，因而采用氯仿作为提取溶剂，所制得的样品溶液中杂质干扰峰较少。在笔者采用的色谱条件下，能很好的满足含量测定要求。超声提取5、10、20、30 min，结果表明20 min可基本提取完全。王维等[9]用紫外分光光度法测定不同产地前胡中总香豆素的含量，结果显示，该方法精密度、稳定性、重现性、回收率均良好。系统考察了浙江不同产地栽培品和野生品前胡的总香豆素含量，结果发现个产地之间总香豆素含量无显著差异。

俞年军等[10]比较了不同产地前胡挥发油化学成分，结果显示，主产区白花前胡饮品的挥发油成分没有明显差异。代丽萍等[11]对不同产地前胡单一成分白花前胡甲素的测定，结果显示，不同产地前胡中白花前胡甲素含量差异显著。通过查阅相关文献，韩超[12]、黄瑞红等[13]仅对提取物或制剂中的白花前胡甲素进行了含量测定。聂小忠等[14]对江西、浙江、安徽、重庆等地前胡质量进行比较，与本研究样品采集地有差别，并且未对样品水分、灰分等项目进行测定比较。本研究为首次使用HPLC法同时测定两种香豆素含量的方法应用于评价不同产地前胡质量。并对各样品的水分、灰分等项目进行全面评价，与上述文献比较，方法简便、快捷，全面，更具有代表性。

前胡中白花前胡甲素的含量约是白花前胡乙素含量的3倍，不同产地前胡中两种香豆素成分的含量相差较大，其中白花前胡甲素的含量相差尤为明显。以江苏产前胡中香豆素含量最高，河南、浙江、安徽、江西等省产前胡差异不明显，从测定结果可以看出，不同产地前胡由于生长环境、气候条件的不同，这些因素均能影响中药材次生代谢物的生成。通过对气候类型的分析可知，温暖湿润的亚热带过渡型气候比较适于前胡的生长。

水分、灰分及浸出物测定结果显示，不同产地前胡水分含量在7.491%～10.89%，均符合《中国药典》质量标准，其中湖北产前胡水分含量最高，湖南产最低。不同产地样品总灰分、酸不溶性灰分存在一定差异。所测样品总灰分含量在7.776%～3.689%，酸不溶性灰分为1.365%～0.265%。总灰分、酸不溶性灰均为湖南产前胡含量最高，其原因可作进一步研究。总灰分含量最低的为安徽产前胡，酸不溶性灰分最低为浙江产前胡。《中国药典》2010版规定前胡药材醇溶性浸出物的量不得少于20%，所测样品均符合规定，最高的为安徽产前胡，最低为湖北产前胡。

通过对此体系进行分析，不同产地前胡醇溶性浸出物都在20%以上，水分不超过12%，总灰分不超过8%，酸不溶性灰分不超过2%，所有样品都能符合《中国药典》2010版标准，质量较好。

药材具有道地性，不同产地药材具有不同的质量差异[15]。本方法的建立可以用于评价不同产地前胡的质量差异，考察对不同产地前胡样品的生长年限、加工方法、品种、贮藏年限、炮制方法等因素对药品质量的影响。为前胡的大规模引种栽培和中药材生产质量管理规范（GAP）基地建设提供了依据，为扩大前胡产区范围，从《本草纲目》记载的浙江扩大到整个暖温带到亚热带气候地区地区提供理论支持。本前胡药材质量评价体系可以对不同产地前胡进行综合质量评价，用以衡量前胡药材质量，以为临床用药及药品生产企业提供合格药材。

[1]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：化学工业出版社，2010：248.

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Comprehensive evaluation with multi-index for quality test of radix peucedani from different habitats

REN Rong,LI Zheng-xiang
（General Hospital of Tianjin Medical University,Tianjin 300052,China）

[Objective]To establish a multi-index system for comprehensive evaluating the quality of Radix Peucedani and analyzing the quality differences in Radix Peucedani from different habitats.[Methods]The moisture content,total ash,acid-insoluble ash,ethanolsoluble extracts and the contents of praeruptorin A and B of Radix Peucedani from different habitats were detected by HPLC.Then combining the indexes mentioned above a quality evaluation system for Radix Peucedani was established,which could be used to assess the quality for Radix Peucedani from different habitats.[Results]The detection results of moisture content,ash,acid-insoluble ash and contents of praeruptorin A and B indicated that these contents in all samples were met the standard of Chinese Pharmacopeia 2010 edition.[Conclusion]The quality of Radix Peucedani from different habitats can be assessed and controlled by the quality evaluation system established by multipoint test in this research.

Radix Peucedani;multiple index;content determination;different habitats;quality evaluation

R282.5

A

1672-1519（2014）10-0627-04

2014-04-16）

（本文编辑：高 杉，于春泉）

10.11656/j.issn.1672-1519.2014.10.14

天津市卫生局科技基金资助项目（2012ky30）。作者简介：任 荣（1979-）男，硕士，主管药师，主要研究方向为药物制剂。

李正翔，E-mail:lee41@sina.com。