医院感染肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析

李玉芬 刘杨 刘金禄

肺炎克雷伯菌是临床重要的条件致病菌之一，主要存在于人体上呼吸道和肠道，当人体免疫力低下时可以引起感染［1］。近年来，随着广谱抗菌药物在临床的广泛应用，该菌的耐药性日趋严重。特别是产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性更广更强。给临床治疗及医院感染的控制带来困难，而且已对人类的健康造成极大威胁［2］。因此，对于肺炎克雷伯菌的临床感染分布，特别是耐药性分析显得尤为重要，现对我院2013年分离得到的267株肺炎克雷伯菌进行分析，报道如下。

1 材料和方法

1.1 标本来源267株肺炎克雷伯菌分离自我院住院患者临床各科室送检的感染性标本，包括痰液、尿液、咽拭子、脓性分泌物、血液等。

1.2 试剂与器材 细菌鉴定及药敏试验采用Phoenix-100全自动细菌鉴定仪(BD公司生产)及配套的鉴定卡BD PhoenixTM NMIC/ID-4;天津市金章科技发展有限公司生产的一次性血琼脂培养基;杭州天和微生物试剂有限公司生产的细菌干粉培养基系列麦康凯琼脂。

1.3 培养及鉴定(1)细菌分离:首先涂片做革兰染色，除血标本外其余标本分别接种于血平板培养基和麦康凯培养基，37℃培养18～24 h待观察。其中尿标本需定量培养计数菌落数(cfu)＞105/ml，血标本需床旁接种于血培养瓶中，置全自动血液分析仪中培养，待报阳以后去除血培养瓶转种于血平板培养基和麦康凯培养基，37℃培养18～24 h待观察。(2)鉴定及药敏:培养和鉴定按《全国临床检验操作规程》，分离出的菌落即按标准方法进行革兰染色，挑选麦康凯平板上隆起、大而黏液样、粉红色菌落，染色结果为革兰阴性杆菌。用无菌棉签挑选该单个菌落研磨至Phoenix-100全自动细菌鉴定仪配套的生化试剂瓶内，配制0.5麦氏比浊度，从中取25 μl加入滴加指示剂的药敏试剂瓶中，将配好的两瓶菌液分别加入阴性板(BD PhoenixTM NMIC/ID-4)的生化孔与药敏孔，上机。(3)结果判定:按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2013年推荐的标准判读。

1.4 质量控制 用肺炎克雷伯菌ATCC 700603为质控参考菌株。

1.5 统计学分析 数据处理采用WHONET 5.6统计软件分析。

2 结果

2.1 科室分布2013年1月-2013年12月我院分离得出的267株肺炎克雷伯菌科室分布以神经内科、呼吸内科、心血管内科、ICU、内分泌科等为主，分别为14.6%、12.0%、11.6%、11.2%、6.7%。见表1。

表1 267株肺炎克雷伯菌的科室分布构成比 株(%)

2.2 标本类型2013.01-2013.12我院分离得出的267株肺炎克雷伯菌的标本类型以痰液标本最多，占77.1%;其次为尿液、分泌物标本，占10.9%、5.2%。见表2。

表2 267株肺炎克雷伯菌的标本类型构成比 株(%)

2.3 药敏试验结果267株肺炎克雷伯菌对除亚胺培南、美洛培南、阿米卡星耐药率较低以外的16种抗生素有不同程度耐药，产超广谱β-内酰胺酶菌株的检出率为19.5%;非产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药率明显低于产超广谱 β-内酰胺酶菌株的耐药率。见表3。

表3 267株肺炎克雷伯菌对19种抗菌药物的耐药率%

3 讨论

近年来，肺炎克雷伯菌已经成为医院感染以及免疫缺陷者感染患者的重要机会致病菌，可通过患者之间的交叉感染或者人工呼吸机等相关医疗器械传播，其在免疫力低下或者接受有创性诊疗的患者中可以引起败血症、肺炎、尿道或腹腔感染［3］。由表1分析可知，肺炎克雷伯菌科室分布主要在神经内科、呼吸内科、心血管内科、ICU、内分泌科，可能由于这些科室的患者病情严重，免疫力水平低下、患病时间长、联合多种药物治疗等有关［4］。由表2分析可知，肺炎克雷伯菌的标本类型以痰液标本为主，其次为尿液标本，说明肺炎克雷伯菌常引起的是呼吸道感染以及泌尿系感染，于相关文献［5］报道一致。

由表3分析可知，肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物产生耐药，对我院分离出的278株肺炎克雷伯菌的19种抗菌药物的耐药性检测数据进行分析可知，除亚胺培南、美洛培南、阿米卡星耐药率偏低外，非产超广谱β-内酰胺酶菌株对氨苄西林、氯霉素、四环素、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、哌拉西林的耐药率分别是73%、15.5%、14.1%、10.2%、10.8%、10.7%，其余对12种抗生素的耐药率均低于10%，而产超广谱β-内酰胺酶菌株对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别是3.8%、5.9%、9.8%、17.3%、25.5%，对其余14种抗生素均高于50%，甚至达100%。因此非产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药率明显低于产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药率，而本院肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株的检出率为19.5%，低于刘业霞［6］报道的临沂市沂水中心医院的检出率，这与不同地区、不同医院的用药习惯有关，同时也说明我院在ESBLs阳性菌株引起的感染控制工作较好。

虽然本院肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶菌株的检出率较其他医院低，但却出现了3株耐碳青霉烯类菌株，其检出率与2011年度全国细菌耐药监测网［7］报告基本一致，在前几年未曾发生。由于产酶菌株的出现将大大增加临床治疗中的困难，因此，在临床治疗中，临床医生应对细菌耐药性引起高度重视，且必须根据药敏结果合理、有效的选用抗菌药物，特别是对该菌检出率较高的科室以及易患人群。

1 刘晓平，蔡朝阳，邵小华，等.肺炎克雷伯菌耐药性趋势及特征性分析.蚌埠医学院学报，2013，38:339-342.

2 陈瑶，韩昌洪，鲜于丽.肺炎克雷伯菌临床感染分布及耐药性分析.实用药物与临床，2010，13:229-230.

3 王晓君，应斌松.医院感染肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析.海峡药学，2013，25:183-184.

4 杨怀德，张进军.临床感染肺炎克雷伯菌耐药性分析.国际检验医学杂志，2010，1:1267-1269.

5 曲颖，蒋晓飞.医院感染肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析.中华医院感染学杂志，2011，21:5068-5071.

6 刘业霞.超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性分析.工企医刊，2011，24:4-5.

7 张伟丽，孔海深，杨青，等.Mohnarin 2011年度报告:华北地区细菌耐药监测.中华医院感染学杂志，2012，22:4965-4970.