不同混合基体改进剂在测定血铅中的比较

2014-03-29吕海燕曹小云杨绿舜

中国医药指南 2014年8期

关键词：灰化血样精密度

吕海燕曹小云杨绿舜

（1 深圳市盐田区疾病预防控制中心，广东深圳 51801；2 深圳市龙华新区人民医院，广东深圳 518131）

不同混合基体改进剂在测定血铅中的比较

吕海燕1曹小云1杨绿舜2

（1 深圳市盐田区疾病预防控制中心，广东深圳 51801；2 深圳市龙华新区人民医院，广东深圳 518131）

目的选择不同的混合基体改进剂，测定血中铅的含量，比较其检测质量。方法使用两种不同的混合基体改进剂，运用石墨炉原子分光光度法测定血中铅的含量，比较其检测质量。结果两组混合基体改进剂的精密度都＜5%，实验回收率都＞90%。结论不同的混合基体改进剂也可以很好地保证血铅的检测质量，只要认真选择，不同的混合基体改进剂可以达到同样的效果。

基体改进剂；血中铅；相对标准偏差；回收率

血样是一种基体成分非常复杂的生物材料，在血铅测定过程中极易受到基体成分的干扰。为了减少这种干扰，人们通常采取消化样品、萃取分离或加入基体改进剂等各种措施[1]。石墨炉原子吸收光谱法，快捷简便、灵敏度高，是血铅测定的常用方法[2]，也是测定血铅的标准方法。目前基体改进剂种类繁多：钯、Triton X-100、NH4H2PO4、HNO3等都是常用的的基体改进剂，但随着技术的发展，现在大多使用的是混合的基体改进剂，即为几种基体改进剂混合一起使用。本文就使用两种较为常用的混合基体改进剂，运用石墨炉原子分光光度法测定血中铅的含量，比较其检测质量。其结果如下。

1 实验材料与方法

1.1 实验仪器：Thermo ICE-3500原子吸收光谱仪。

1.2 试剂：Triton X-100（美国Sigma公司）；NH4H2PO4（美国Sigma公司）；HNO3（苏州晶瑞公司）；牛血中铅标准溶液系列：0，50，100，200，400μg/L（中国疾病预防控制中心，职业卫生与中毒控制所）。

1.3 混合基体改进剂1：0.5%Triton X-100+0.2%NH4H2PO4+0.2%HNO3。混合基体改进剂2：0.02%钯+1%Triton X-100+0.1%HNO3。

1.4 分析步骤：所用实验器皿均用20%硝酸溶液浸泡24 h后用纯水冲洗干净晾干后备用。

1.4.1 样品采集：采集静脉血置于事先加入肝素钠溶液（用量为每毫升血加20～40 μL）的具塞朔料管中，混匀，于4 ℃冰箱中保存1周。

1.4.2 仪器检测条件：波长283.3 nm，狭缝0.7 nm，灯电流10 mA，石墨炉升温程序：干燥温度（Ⅰ）90 ℃，升温时间5 s，持续时间15 s；干燥温度（Ⅱ）120 ℃，升温时间20 s，持续时间15 s；灰化温度700～800 ℃，升温时间10 s，持续时间25 s；原子化温度1400 ℃，升温时间1 s，持续时间3 s；清洗温度2500 ℃，升温时间1 s，持续时间2 s。

1.4.3 标准曲线的配制：分别取牛血中铅标准溶液各100 μL，基体改进剂900 μL，按1∶9的比例混匀。此溶液铅浓度为0、5、10、20、40 μg/L。分别配制两种不同的基体改进剂的标准系列，按上述仪器条件进行测定。

1.4.4 样品的检测：用微量进样器吸取混合基体改进剂900 μL于塑料进样杯中，加入被测定血样100 μL，混匀成稀释血样，按上述条件测定，并由标准曲线计算结果。

1.5 统计学方法：应用SPSS17.0软件行统计学处理。

2 结果

选取高中低三种不同浓度血样，血样编号分别为1、2、3。按1.4.2仪器的检测条件，分别不加基体改进剂，加入混合基体改进剂1和混合基体改进剂2，检测血样的精密度和回收率。在没有基体改进剂存在时，测定的精密度非常差，在20%左右，回收率很低，仅70%左右；加入混合基体改进剂1和2后，分析的精密度都＜5%，实验回收率都＞90%。结果见表1。

3 讨论

本文对4种基体改进剂组合成的两种混合基体改进剂的实验研究的结果显示，以0.5%Triton X-100+ 0.2%NH4H2PO4+ 0.2%HNO3或者0.02%钯+1%Triton X-100+0.1%HNO3为混合液为基体改进剂，对血铅进行检测时可以得到很好的结果：分析的精密度都＜5%，实验回收率都＞90%。各个基体改进剂的作用都不太相同：钯可用于保持被测铅的稳定性，加入钯可适当把灰化温度提高，达到降低背景吸收值的效果。Triton X-100是表面活性剂，可以降低血液的表面张力，大大改善进样效果[3]，但在干燥、灰化样品时可能会造成起泡现象。HNO3有助于消除石墨炉原子吸收中的干扰，分解有机物，但HNO3浓度越高对石墨管的损害越大。NH4H2PO4可使吸收峰更光滑，积分时间变短，峰面积增加。

HNO3、Triton X-100，NH4H2PO4和钯都可作为石墨炉原子吸收光谱法测定血铅的基体改进剂，但各改进剂单和配合使用效果大不相同，每个基体改进剂都有其优点和缺点，单独使用可能会更加暴露了基体改进剂的缺点。本文在加入两种混合基体改进剂之后，灰化温度升到750 ℃时也未见铅损失，增加了铅信号的稳定性[4]，消除了基体干扰。这就说明配合使用基体改进剂能更大程度发挥各个基体改进剂的优点，而避免了其缺点。

不同的混合基体改进剂也可以很好地保证血铅的检测质量，只要认真选择，不同的混合基体改进剂可以达到同样的效果。