APP下载

5种食物对小鼠接触性炎症反应及血清IL-4和IL-17的影响

2014-03-29阳陈向明张海清俞爱华王国江

中国麻风皮肤病杂志 2014年10期
关键词:发物香菇羊肉

李 婷 胡 阳陈向明 张海清 俞爱华 王国江

5种食物对小鼠接触性炎症反应及血清IL-4和IL-17的影响

李 婷 胡 阳∗陈向明 张海清 俞爱华 王国江

目的: 明确香菇、辣椒、带鱼、羊肉和海虾5种食物对慢性变应性接触性皮炎(CACD)小鼠模型炎症反应及血清IL-4和IL-17表达的影响。方法: 36只小鼠用2,4-二硝基氟苯诱导建立CACD模型,5种食物煎煮后灌胃,对照组予纯水灌胃。测量每组耳厚度和耳重量并用ELISA检测血清IL-4和IL-17水平。结果: 与对照组相比,辣椒和羊肉明显增加耳厚度、耳重量和血清IL-17水平(P<0.05);带鱼和海虾对小鼠耳厚度和耳重量无明显影响(P>0.05),但显著下调血清IL-4水平(P<0.05);香菇对各项指标均无影响(P>0.05)。结论: 辣椒和羊肉可能通过上调血清IL-17水平加重CACD小鼠模型炎症反应。

慢性变应性接触性皮炎; 耳厚度; 耳重量; 细胞因子

中医将容易激发宿疾复发或加重现有疾病的食物称为“发物”,且十分重视对“发物”的忌口,但“发物”忌口常受西医质疑。香菇、辣椒、带鱼、羊肉和海虾是常用食物,同时也是中医传统认为的“发物”。1本实验观察其对慢性ACD小鼠模型的影响,为临床过敏性患者忌口提供实验依据。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 实验动物为6~8周龄清洁级,体重18~22 g的雌性BALB/C小鼠,由上海斯莱克动物中心提供,实验动物合格证号:scxk(沪)2008-0016。在一定的温度和湿度环境中,光照12 h,黑暗12 h,标准饲料喂养1周后进行实验。2,4二硝基氟苯购自上海化学试剂公司,丙酮购自上海试剂厂。小鼠IL-4和IL-17 ELISA试剂盒购自美国R&D公司(批号20121102)。电子分析天平(FA1004)购自上海精密科学仪器有限公司,直径8 mm的圆形皮肤打孔器购于上海市医疗器械公司,数显游标卡尺购自上海量具刃具厂,酶标仪(型号ELX-800)购自BIO-TEK公司。香菇、辣椒、带鱼、羊肉和海虾各500克,分别加纯水煎煮并浓缩至2 g/mL,置4℃保存,5天内用完,灌胃前加热至25℃。

1.2 方法

1.2.1 建立CACD小鼠模型 参照文献,2第1次涂药前24 h(第0天),小鼠腹部剃毛,面积约3 cm2,实验第1天在去毛部位涂0.5%DNFB(溶剂为丙酮∶橄榄油=4∶1的混合液)20μL致敏,实验第6天、第13天、第20天和第27天在小鼠右耳内外侧涂0.2%DNFB 10μL各1次,共4次激发。

1.2.2 实验分组及喂食发物 36只小鼠致敏后随机分成6组,分别为香菇组、辣椒组、带鱼组、羊肉组、海虾组及对照组,每组6只,从第26天开始,分别对发物各组灌胃对应食物煎煮液;对照组予纯水灌胃,每日2次,每次量以0.2 m L/10 g计算。另有6只健康小鼠不做任何处理,作为空白组。第29天处死各组小鼠取材备用。

1.3 观察指标及方法

1.3.1 用电子数显卡尺测量小鼠左、右耳中部的厚度,每只耳朵测量3次,取平均值,计算左右耳厚度差。

1.3.2 耳重量 处死小鼠后,用直径8 mm的打孔器,分别钻取小鼠左、右耳中部的组织,用电子天平称重,计算左右耳重量差。

1.3.3 细胞因子 眼眶采血法取小鼠血液1 mL,凝血后离心分离血清,使用酶免疫法测定血清细胞因子,检测步骤按试剂盒说明书进行,将反应板放入酶标仪于450 nm波长处测各孔吸光值,通过标准曲线计算各孔IL-4和IL-17的浓度值(单位为pg/mL)。

1.4 统计学方法 采用SPSS 16.0统计软件进行one-way ANOVA分析,所有数据采用¯x±s表示,以P<0.05表示有统计学意义。

2 结果

2.1 第4次激发后48 h,肉眼观察小鼠右耳皮肤炎症反应明显,表现为红肿、糜烂、渗出、结痂。

2.2 各组小鼠耳厚度及耳重量 辣椒组和羊肉组的耳厚度差和耳重量差明显高于对照组(P<0.05)。其余各组与对照组之间无统计学差异(P>0.05),见表1。

表1 各组耳厚度差和耳重量差的比较

2.2 各组小鼠血清IL-4和IL-17水平 对照组、香菇组、辣椒组、带鱼组、羊肉组、海虾组和空白组的IL-4的水平分别为171.50±3.30、176.09±5.86、177.23± 4.80、163.50±3.32、166.11±1.98、161.49±4.78和137.74±9.28;IL-17的水平分别为78.11±2.93、80.78 ±4.43、87.59±4.49、76.52±1.99、90.66±0.47、75.70± 4.06和63.00±2.35。与空白组比较,各组的血清IL-4和IL-17水平均显著升高(P<0.05)。与对照组比较,辣椒组和羊肉组IL-17水平显著升高(P<0.05),IL-4水平无明显差异(P>0.05);带鱼组和海虾组IL-4水平明显下降(P<0.05),IL-17水平无明显差异(P>0.05);香菇组的IL-4和IL-17水平均无明显差异(P>0.05)。

3 讨论

从本研究结果来看,辣椒、羊肉耳廓炎症肿胀明显,其耳厚度差、耳重量差显著高于对照组。带鱼、海虾、香菇对小鼠耳廓炎症反应无明显影响。5种“发物”各自所含的某些成分可能对慢性皮炎的发生发展有一定的影响。国外学者从食物成分分析认为花生四烯酸、前列腺素等变应性活性介质会加重过敏性疾病,相反n-3不饱和脂肪酸有利于过敏性疾病康复。3羊肉、带鱼和海虾均为高脂肪食物,n-3多不饱和脂肪酸含量低而花生四烯酸含量较高,4相反水生生物的带鱼和海虾含有丰富的n-3多不饱和脂肪酸;3辣椒和香菇为低脂肪食物,但辣椒中辣椒素可导致血管扩张等神经源性炎症效应,5香菇中的香菇多糖具有免疫调节作用。6

多次外用半抗原刺激小鼠皮肤或耳组织,皮肤炎症反应从以Th1占优势的免疫反应转为以Th2为主的慢性炎症反应,类似人类AD。2,7外周血和皮损中Th2细胞亚群占优势是慢性皮炎发病重要机制之一,新近发现的Th17细胞在慢性皮炎的发生发展中也同样发挥着重要作用。8IL-4为Th2型细胞因子,持续高表达会加重慢性皮炎皮损炎症反应,8IL-17是Th17细胞产生的主要细胞因子,能诱导角质形成细胞产生多种炎性因子,调节趋化因子及黏附分子表达,促进中性粒细胞活化和向炎症部位募集,加重局部炎症反应。8本实验参照文献制作了小鼠CACD模型,我们发现该模型血清IL-4和IL-17水平较造模前明显升高,说明造模成功。本研究还显示辣椒组和羊肉组小鼠血清IL-17水平较对照组明显升高,IL-4水平与对照组之间差异不明显,推测辣椒、羊肉可能通过上调IL-17表达来加重小鼠慢性炎症反应。

1何以蓓,汤军.中医“发物”的概念、分类及其临床意义.浙江中西医结合杂志,2009,19(11):674-676.

2Morioka Y,Yamasaki K,Leung D,etal.Cathelicidin antimicrobial peptides inhibit hyaluronan-induced cytokine release and modulate chronic allergic dermatitis.J Immunol,2008,181(6): 3915-3922.

3 Devereux G,Seaton A.Diet as a risk factor for atopy and asthma.Allergy Clin Immunol,2005,115(6):1109-1117.

4罗建学.羊肉脂肪酸的研究概况.肉类研究,2010,(1):12-15.

5梁晨,韩盛玺.辣椒素临床应用的研究进展.华西药学杂志,2008,23(2):185-187.

6张海岚,周建平,边洪荣.香菇有效成分研究综述.华北煤炭医学院学报,2004,6(1):35-36.

7 Jin H,He R,OyoshiM,etal.Animalmodelsof atopic dermatitis.J Invest Dermatol,2009,129(1):31-40.

8 Yamanaka K,Mizutani H.The role of cytokines/chemokines in the pathogenesisof atopic dermatitis.Curr Probl Dermatol,2011,41:80-92.

(收稿:2014-03-31)

Effects of five foods on the inflammatory reaction and IL-4,IL-17 in m icemodel of CACD

LITing,HU Yang,CHEN Xiang-ming,et al.Department of Dermatology,Nanxiang Hospital of Jiading,Shanghai,201802

Objective:To determine the effects ofmushroom,chillies,ribbonfish,mutton and sea shrimp on contact dermatitis inmicemodel.Methods:The contact dermatitismodel was constructed by DNFB.The mice were divided into 5 groups and fed with the soup of5 foods by gavage and themice in control group were fed with water.Ear thickness and weightweremeasured.The levels of IL-4 and IL-17 in serum were detected by ELISA.Results:Compared with control group,the ear thickness and weight,and the levels of IL-17 were increased in the chillies group andmutton group(P<0.05).Therewas no changes in ear thickness and weight in ribbonfish and sea shrimp group,but the level of IL-4 decreased(P<0.05).There were no significant differences in the ear thickness and ear weight changes,and the serum levels of IL-4 and IL-17 between mushroom group and control group(P>0.05).Conclusion:Chillies andmuttonmay aggravate the inflammatory reaction in contact dermatitis by upregulating IL-17 expression.

chronic allergic contact dermatitis;ear thickness;ear weight;cytokine

上海市嘉定区科委课题(编号:2010019)

上海市医学重点专科B类建设项目(编号:ZK2012B18)

上海市嘉定区南翔医院,201802

∗通信作者

猜你喜欢

发物香菇羊肉
“扒羊肉”
Modeling and Verification of a Sentiment Analysis System Using Aspect-Oriented Petri Nets
中医专家为您解读“发物”
香菇接种三招
巧用“发物”防病治病
中医眼中的“发物”到底指什么
开春食羊肉,滋补健体
冬补一宝 羊肉
“发物”是何物
羊肉宴引发的惨败