连钱草水提物抗炎镇痛实验研究*

何 平， 邹佳峻， 费士杰

(右江民族医学院， 广西 百色 533000)

连钱草为唇形科多年生草本植物活血丹[Glechoma10ngituba(Nakai)Kupr.]的干燥地上部分，利湿通淋，清热解毒，散瘀消肿之功效，用于黄疸型肝炎、腮腺炎、胆囊炎、胆石症、疳积、肾结石、膀胱结实、多发性脓疡、疮痈肿痛、婴儿湿疹、跌打损伤、疟疾、产后惊风、腹痛、鹅掌风、牙痛等症[1]。连钱草主要含有挥发油类、萜类、黄酮类、甾体类、有机酸类和生物碱类等活性成分，有着广泛的药理活性[2]。本实验应用角叉菜胶致大鼠足趾肿胀法和棉球致大鼠肉芽肿法观察连钱草水提物的抗炎作用；小鼠热板法和小鼠醋酸扭体法观察连钱草水提物的镇痛作用。为进一步研究开发连钱草药材提供药理学依据。

1 材料

1.1 药物和试剂 连钱草水提物，本单位自制；阿司匹林片(批号：20070215，桂林漓江制药厂)；罗通定片(广州康和药业有限公司，批号：080901)；角叉菜胶(辽宁省药物研究所)。

1.2 动物 昆明种小鼠，Wistar大鼠，均由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK桂2003-2003。

1.3 主要仪器 GJ-8402热板测痛仪，浙江宁海白石电子医疗仪器厂；JA1003型上皿电子天平，上海精科天平厂；SKP.01电热恒温培养箱，湖北黄石市医疗器械厂。

2 试验方法

2.1 抗炎作用[3]

2.2.1 对角叉菜胶所致大鼠足肿的影响 取正常健康大鼠60只，雌雄各半，体重250～300 g。随机分为6组，每组10只，即对照组，模型组，阿司匹林组(30 mg/kg)，连钱草水提物(8、4、2 g/kg)3个剂量组。灌胃给药体积均为0.2 mL/100 g，对照组给予等体积蒸馏水。连续灌胃给药9 d，末次给药后1 h，用1%角叉菜胶生理盐水液每只0.1 mL左后足跖皮下注射，用千分卡尺测量致炎前和致炎后1、2、3、5、7 h足跖厚度，计算致炎后不同时间肿胀值。

2.2.2 对大鼠棉球肉芽组织增生的影响 取正常健康大鼠50只，雌雄各半，体重250～300 g。随机分为5组，每组10只，即对照组，阿司匹林组(30 mg/kg)，连钱草水提物(8、4、2 g/kg)3个剂量组。腹腔注射戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉，剪去大鼠蹊部鼠毛，用碘酒消毒，75%酒精棉脱碘后，切一1.0 cm长切口，用眼科镊子将20 mg的高压灭菌棉球从切口处植入皮下，随即缝合皮肤。从手术当日开始，连续灌胃给药7 d，灌胃给药体积均为0.2 mL/100 g体重，模型对照组给予等体积蒸馏水。末次给药后24 h，打开切口，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，在70℃烘箱中恒温干燥48 h后，应用分析天平称重，将称得的重量减去棉球重量(20 mg)，即得肉芽肿重量。

2.2 镇痛作用[3]

2.2.1 小鼠热板法 将50只预先经筛选的雌性小鼠(除去反应过敏<5 s 及迟钝>30 s 的小鼠)随机分5 组，即对照组(等体积蒸馏水)，阳性药罗通定组(30 mg/kg)，连钱草水提物大中小剂量组(8、4、2 g/kg)。先测出各组小鼠给药前的痛阈值后，分别灌胃给蒸馏水，罗通定及连钱草水提物，测30、60 、90、120 min 痛阈值。

2.2.2 小鼠扭体法 取昆明种小白鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。分组、给药同2.2.1。连续灌胃给药7 d，末次给药后1 h，各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，5min后计数15 min内各鼠出现的扭体反应次数。

3 实验结果

3.2 抗炎作用

3.2.1 对角叉菜胶所致大鼠足肿的影响 和对照组比较，模型对照组致炎后足趾肿胀率显著增高，提示模型复制成功。和模型组比较，连钱草水提物8 g/kg剂量组在致炎后1、2 、3、5 h，4 g/kg剂量在组致炎后2 h，可显著降低大鼠对角叉菜胶所致足趾肿胀率(P<0.01，P<0.05)，结果见表1。

表1 连钱草水提物对角叉菜胶所致大鼠足肿的影响

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

3.2.2 对大鼠棉球肉芽组织增生的影响 和对照组比较，连钱草水提物8、4 g/kg剂量组可明显抑制大鼠棉球肉芽组织干重(P<0.05)，结果见表4。

表4 连钱草水提物对大鼠棉球肉芽组织增生的影响

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

3.3 镇痛作用

3.3.1 对醋酸所致小鼠扭体实验的影响 和对照组比较，连钱草水提物8 g/kg剂量对小鼠扭体次数明显少于对照组，差异有显著性意义(P<0.01)。结果见表3。

表3 连钱草水提物对醋酸所致小鼠扭体实验的影响

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

3.3.2 对小鼠热板痛阈的影响 和对照组比较，连钱草水提物8 g/kg剂量对小鼠在药后60 min、90min，4 g/kg剂量组在药后60 min，可显著延长小鼠热板痛阈，(P<0.01，P<0.05)。结果见表4。

表4 连钱草水提物对小鼠热板痛阈的影响

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

4 讨论

炎症是一种防御反应，表现为红、肿、热、痛和功能障碍。在炎症过程中，一方面损伤因子直接或间接造成组织和细胞的破坏，另一方面通过炎症充血和渗出反应，以稀释、杀伤和包围损伤因子，同时通过实质和间质细胞的再生使受损的组织得以修复和愈合，炎症是损伤和抗损伤的统一过程。在有些情况下，炎症是潜在有害，炎症反应是一些疾病的发病基础，如严重的超敏反应炎症过于剧烈时可以威胁病人的生命。目前，临床上使用的抗炎药物分甾体抗炎药和非甾体抗炎药，临床效果显著，但是存在着严重的不良反应而限制其在临床上的使用。某些中药或中药的复方试剂具有良好的抗炎作用，且具有高效低毒的特点[4-6]。

实验结果表明，连钱草水提物能显著抑制角叉菜胶致大鼠足趾肿胀率和大鼠棉球肉芽组织重量，能显著减少醋酸引起的小鼠扭体反应次数和延长小鼠热板痛阈值具有显著的抗炎和镇痛作用。其详实作用的分子机制，还有待进一步研究。

参考文献：

[1]国家中医药管理局，中华本草[M]上海：上海科技出版社，1999.6058.

[2]张前军，杨小生，朱海燕，等.活血丹属植物的化学成分及药理研究进展[J].中草药，2006，37(6)：950-952.

[3]李仪奎.中药药理实验方法[M].上海：上海科学技术出版社，2006，764-771.

[4]韦桂宁，刘智生，周 军，等.炎见宁片抗菌、抗炎及镇痛作用的实验研究[J].2009，31(12)：1873-1875.

[5]杨玉琪，倪凯，王曙光，等.复方抗炎胶囊的抗菌抗炎药效作用试验研究[J].云南中医中药杂志，2009，30(9)：51-52.

[6]付雪娇，邹坤，王桂萍，等.吉祥草乙酸乙酯提取物抗炎作用及机制研究[J].时珍国医国药.2013，24(4)：822-825.