2010－2012年流感嗜血杆菌耐药性监测

龙姗姗，喻 华

流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)是一类革兰阴性小杆菌，是临床上社区获得性感染的常见病原菌，以上呼吸道感染和肺炎发病为主，并可侵入血液导致多种感染性疾病。进一步了解流感嗜血杆菌对常用抗生素的耐药性，为流感嗜血杆菌感染的临床治疗提供实验室依据，本文总结了四川省人民医院临床微生物室2010年1月－2012年12月间分离出的201 株流感嗜血杆菌的耐药特点和分布规律，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 菌株来源于2010年1月－2012年12月本院临床标本中分离的非重复流感嗜血杆菌。

1.2 方法(1)细菌鉴定:挑取纯培养或优势生长的可疑菌落接种5%羊血琼脂平板及MH 琼脂平板进行卫星试验，再采用VITEK2-compact 系统NHI 试卡或API 系统进行最终鉴定。(2)培养基:巧克力基础培养基、羊血琼脂平板为郑州安图有限公司产品，β-内酰胺酶纸片(头孢硝噻吩)、API 鉴定试条、VITEK2-compact 鉴定试卡均购于法国生物梅里埃公司。(3)药敏测定:采用梅里埃公司ATB HAEMO 5 药敏条进行药敏测定。抗生素包括氨苄西林、头孢克洛、头孢呋辛、头孢噻肟、氧氟沙星、四环素、利福平、复方新诺明、阿莫西林/克拉维酸、氯霉素。(4)β-内酰胺酶试验:采用头孢硝噻吩纸片定性试验。用1 滴无菌水将头孢硝噻吩纸片润湿，将受试菌直接涂于润湿的纸片上，观察其颜色变化，产生红色者为产酶阳性。质量控制:按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)2012 要求进行质量控制。质控菌株流感嗜血杆菌ATCC 49247。

1.3 统计方法 药敏结果判断标准按照CLSI 2012 标准。所得结果用WHONET 5.6 软件进行分析。

2 结果

2.1 流感嗜血杆菌来源及分布情况 标本中分离出流感嗜血杆菌201 株，其中来自痰液标本193 株，占96.0%，支气管灌洗液6 株，占2.9%，血液2 株，占1.1%，其主要以呼吸道感染为主;科室分布以呼吸科(104 株，占51.7%)、外科(31株，占15.4%)、ICU(27 株，占13.4%)为主，成人患病率较儿童高，见表1。

表1 201 株流感嗜血杆菌科室分布

2.2 流感嗜血杆菌对各种抗菌药物的耐药性 3年间对201株流感嗜血杆菌进行了10 种抗生素敏感性检测，流感嗜血杆菌对利福平敏感率最低，仅45.5%，其次为氨苄西林73.4%，对氯霉素、复方新诺明敏感率分别为87.5%、87.1%，而对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、头孢克洛、四环素敏感率较高，均在90%以上，见表2。氨苄西林与复方新诺明耐药率3年来逐年上升，分别达19.5%～30.1%，2.6%～12.6%，而对阿莫西林/克拉维酸的耐药率仅为2.5%～3.4%，说明β－内酰胺酶抑制剂仍是目前治疗流感嗜血杆菌感染的有效抗生素，见表3。成人分离株对氨苄西林及利福平敏感性(76.5%，51.9%)明显高于儿童分离株(64.4%，41.2%)，但对四环素，儿童分离株的敏感性(91.3%)高于成人分离株(82.1%)，见表4。

表2 201 株流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率与敏感率

2.3 β-内酰胺酶检出率 临床分离的201 株流感嗜血杆菌经β-内酰胺酶试验，产β-内酰胺酶的有53 株，产酶检出率为26.4%。其中14 株分离自儿童，产酶率为31.8%(14/44)，39株分离自成人，产酶率为24.8%(39/157)，儿童组β-内酰胺酶检出率明显高于成人组。

表3 201 株流感嗜血杆菌药敏结果(%)

表4 201 株流感嗜血杆成人分离株与儿童分离株药敏结果(%)

3 讨论

流感嗜血杆菌是引起医院感染的重要条件致病菌之一，寄居于人上呼吸道黏膜，常引起呼吸道感染、肺炎、鼻炎、咽炎、亚急性心内膜炎等严重疾病。从2010年1月－2012年12月本院临床标本中分离出的201 株流感嗜血杆菌来看，其中来自痰液标本193 株，占96.0%，支气管灌洗液6 株，占2.9%，血液2 株，占1.1%，其主要以呼吸道感染为主;科室分布以呼吸科(104 株，占51.7%)、外科(31 株，占15.4%)、ICU(27 株，占13.4%)为主，可能与这3 个科室收治患者住院时间长、侵袭性操作多、患者抵抗力低下，长期使用多种抗菌药物有关。临床医生应根据病区患者进行隔离防范，以控制本菌引起感染［1］。

本资料中发现，流感嗜血杆菌对抗生素耐药率增长较快，而且范围也有扩大。在我国，氨苄青霉素因其价格低，副作用小，常作为一线抗生素应用于临床，用量大，用药时间长，因此对该药的耐药率增长较快，为19.5%～30.1%，在中国不同城市或地区耐药率也在4%～33%不等［2］。而阿莫西林加酶抑制剂耐药率较氨苄西林明显降低，仅为2.5%～3.4%，说明流感嗜血杆菌对氨苄青霉素耐药多由β-内酰胺酶的产生，主要是以质粒介导的TEM-1 型［3］酶引起的，且耐药性的增长是伴随β-内酰胺酶阳性率的增高同时发生的。国外曾报道流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶率在5%～55%［4］，我国为2.6%～45%［3，5］，本资料中201 株流感嗜血杆菌产酶率为25.9%，与国内外报道基本一致［1］，但较我院2006～2007年［6］检测结果相比，β-内酰胺酶率有上升趋势。值得注意的是，儿童组β-内酰胺酶检出率和氨苄西林耐药率明显高于成人组，分别高达31.8%和33.5%。因此，青霉素类药物治疗流感嗜血杆菌感染，尤其是儿童感染时，应有药敏结果的支持［7］。头孢克洛、头孢噻肟及氧氟沙星较2006～2007年［6］相比，对流感嗜血杆菌仍保持很高的活性，敏感率均接近100%，故2、3 代头孢菌属药物及喹诺酮类药物仍为临床治疗的首选药。而磺胺类药物耐药率也出现逐年递增趋势，耐药率为2.6%～12.6%，可能由于流感嗜血杆菌过度产生双氢叶酸还原酶所致［8］。

抗生素的广泛使用是细菌耐药性形成的重要原因，因此合理使用抗生素是延缓细菌耐药性产生的重要措施。

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