趋化因子受体CXCR4与食管鳞癌生物学行为的临床研究

任艳艳

（潍坊护理职业学院，山东 青州 262500）

趋化因子受体CXCR4与食管鳞癌生物学行为的临床研究

任艳艳

（潍坊护理职业学院，山东 青州 262500）

目的 探讨趋化因子受体CXCR4与食管鳞癌生物学行为的关系。方法 对37例食管鳞癌患者实施趋化因子受体CXCR4 mRNA与蛋白相对表达量测定，并探讨其与食管鳞癌的生物学行为关系。结果 趋化因子受体CXCR4 mRNA与蛋白相对表达量，与侵及外膜、淋巴结转移状态及TNM分期有关。结论 检测CXCR4对预测食管鳞癌的侵袭、转移有重要的临床价值。

食管鳞癌；趋化因子受体CXCR4；检测

趋化因子受体是指一种介导趋化因子行使功能的GTP蛋白偶联的跨膜受体。研究发现，CXC类趋化因子受体CXCR4的配体CXCL12多表达于乳腺癌的特异转移部位，如肺、肝脏等，与患者肿瘤生长状态有关，可影响肿瘤的侵袭、生长及转移状态[1]。但关于这类型趋化因子受体在食管鳞癌方面的报告并不多见，本研究基于这一背景，简要分析了两者间的生物学行为，旨在为临床观察提供帮助。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2010—2013年收治的食管鳞癌患者37例，所有患者均行手术切术肿瘤，其中男21例、女16例；年龄38～74岁，平均(54.5±8.3)岁。所有患者在行食管鳞癌切除手术之前均经过化疗或放疗治疗。收集37例患者的癌组织及癌旁组织，所有收集物均经病理学检查确定为食管鳞癌。TNM病理分期为Ⅱa、Ⅱb及Ⅲ期。在实施手术后0.5 h内采集样本，在最短时间内将样本放置于液氮中保存，液氮保存1 h后迅速转移至-80℃冷柜中保存。

表1 CXCR4蛋白表达与食管鳞癌病理参数关系

1.2 方法

1.2.1 CXCR4 mRNA相对表达量的测定 取冰冻样本0.1 g并用Trizol试剂匀浆。提取出样本组织总RNA，将MMLV通过逆转录酶使之成为cDNA，使用试剂盒PCR将CXCR4扩增，同时还可将β-actin扩增使之成为内参照。PCR产物放置于2%琼脂凝胶上电泳，实施EB染色操作，通过凝胶成像分析系统对所得到的图像进行研究，相对量的表达采用实验得到的吸光度与β-actin密度之间的比值来表示[2]。

1.2.2 CXCR4蛋白相对表达量的测定 取少许样本组织，将其加入到0.5 mL匀浆液中实施匀浆操作，采用BCA法对样本蛋白进行定量测定。将获得的蛋白采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，并通过电转仪将分离出的蛋白转印在硝酸纤维素膜上。将5%脱脂奶粉静置5 h(需处于封闭状态，避免与空气过多接触)，加入到CXCR4一抗，在4℃环境中孵育一整晚，利用TBST多次洗膜后将二抗加入其中，在正常温度(室温)下孵育2 h。之后染色20 min，利用凝胶成像分析系统了解条带的吸光度，同时将内参照选为β-actin。相对量的表达采用电泳条带密度与相对内参密度之间的比值来表示[3]。

2 结果

CXCR4蛋白表达与食管鳞癌病理参数关系研究见表1。本研究选取肿瘤大小、分化程度、侵及外膜、淋巴结转移状态及TNM分期对其相关参数展开研究，了解这些因素下相对表达量的差异性。

3 讨论

趋化因子受体CXCR4可在多种实体肿瘤中表达，许多研究已证实CXCL12/CXCR4轴在肿瘤的迁移、浸润、转移及预后中具有重要作用，对肿瘤侵袭转移的作用主要包括以下几方面。①CXCL12/CXCR4轴可以调控肿瘤细胞的增殖与凋亡：CXCL12/CXCR4轴多以自分泌刺激肿瘤及间质细胞，促进肿瘤细胞的生长增殖。②CXCL12/CXCR4轴可以促进肿瘤血管的生成：血管内皮生长因子(VEGF)能将多种骨髓细胞从骨髓募集到外周血，CXCL12能捕获血液循环中骨髓血管生成前体细胞的某些亚型，如RBCCs，并将其准确定位到正在生长的血管周围，促进内皮细胞芽生；CXCR4与VEGF还可以通过相互上调对方在内皮细胞及肿瘤细胞上的表达来促进肿瘤血管的生成[4-5]。

由于食管鳞癌早期症状不明显，就诊时多偏中、晚期，虽然目前以手术为主的综合治疗取得了较好的疗效，但复发和转移仍是制约延长生存期和降低病死率的主要原因。本研究初步证实，趋化因子受体CXCR4表达与食管鳞癌的浸润、转移相关，但其确切作用机制尚需进一步深入研究。鉴于目前对胸中段食管癌尚无公认的标准手术方式，Ivor-Lewis手术和主动脉弓上水平吻合术均可作为对胸中段食管鳞癌治疗的候选手术方式。由于采取该两种手术方式治疗的患者，即使实现了完全切除，长期生存期肿瘤复发率较高，有必要对有选择的食管鳞癌患者采用有针对性的手术后辅助治疗措施。

[1] 宋亮．趋化因子受体CXCR4、CCR7与食管鳞癌生物学行为的临床研究[D]．济南：山东大学，2012．

[2] 尹东，刘静，贾咏存，等．口腔鳞癌中趋化因子受体CXCR4和CCR7表达及其与临床病理特征的关系[J]．口腔医学，2013(1)：8-12．

[3] 陈钢．趋化因子受体CCR7、CXCR4与肺癌器官转移关系的临床研究[D]．济南：山东大学，2010．

[4] 宋亮，王洲．趋化因子受体CXCR4和CCR7及其配体与食管癌转移相关性的研究进展[J]．中华肿瘤防治杂志，2010(20)：1694-1699．

[5] 吉茹．CXCR4、CCR7及其配体在乳腺癌及淋巴结转移灶组织芯片中的表达及意义[D]．天津：天津医科大学，2010．

1672-7185（2014）15-0072-02

10.3969/j.issn.1672-7185.2014.15.042

2014-06-12）

R735.1

A