慢性丙型肝炎患者血清HCV-Cag检测及其临床意义

2014-03-11王雪艳王福党索智敏康玉华

实用肝脏病杂志 2014年4期

王雪艳，王福党，索智敏，康玉华

·短篇论著·

王雪艳，王福党，索智敏，康玉华

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-Cag）检测在慢性丙型肝炎（CHC）诊疗中的临床应用价值。方法采用ELISA法检测血清HCV-Cag；采用FQ-PCR法检测HCV RNA。结果在262例慢性丙型肝炎患者血清中，检出HCV-Cag阳性116例（44.3%），HCV RNA阳性112例（42.7%，P＞0.05）；两者均为阳性血清105例，均为阴性139例；不同HCV RNA载量血清HCV-Cag滴度差异有统计学意义，高病毒载量血清HCV-Cag滴度明显高于低水平血清者（P＜0.01）。结论HCV-Cag与HCV RNA同时阳性或同时阴性的情况比较一致，在慢性丙型肝炎诊疗中，HCV-Cag检测可以作为病毒复制的指标。

慢性丙型肝炎；丙型肝炎病毒核心抗原；丙型肝炎病毒RNA

丙型肝炎病毒（HCV）感染约80%发展为慢性肝炎，其中约25%进展为肝硬化及原发性肝癌，严重危害人类的健康，是主要的公共卫生问题之一[1，2]。因此，早期诊断和积极治疗是丙型肝炎患者获得良好预后的正确选择。HCV RNA反映HCV复制及传染性的强弱，是早期诊断HCV感染和指导抗病毒治疗、疗效评价的重要实验室指标，但由于该检测技术复杂、实验室要求条件高等因素，难以在基层医疗单位推广应用[3，4]。有研究[5，6]认为，丙型肝炎病毒核心抗原（hepatitis C

virus core antigen,HCV-Cag）比HCV RNA平均晚1～2天出现，其消长趋势与HCV RNA有明显的一致性，可作为HCV复制的标志。为探讨检测HCV-Cag在慢性丙型肝炎诊疗中的临床应用价值，我们检测了262例慢性丙型肝炎患者血清HCV-Cag滴度和HCV RNA载量，分析了两种指标检测结果间的关系，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 病例来源自2011年5月～2013年2月我科住院的慢性丙型肝炎患者262例，男157例，女105例；年龄22～69岁，平均年龄（49.3±20.8）岁。诊断符合2004年版《丙型肝炎防治指南》[7]的标准。排除甲、乙、丁、戊型肝炎，排除其他肝胆疾病及全身性疾病。

1.2 检测方法患者早晨空腹，抽取静脉血3～5 ml，及时送实验室，在2 h内3000 r/m分离血清、检测。对不能及时检测的血清，用密闭容器于-20℃以下冰箱冻存，集中检测。采用ELISA法检测血清HCV-Cag[湖南景达基因有限公司，使用英国Anthos2010型全自动酶标仪测定OD值，标本OD值（P）/阴性对照OD值（N）≥2.1判为阳性，＜2.1为阴性]；采用FQ-PCR法检测HCV RNA（深圳凯杰生物工程有限公司，质控血清由卫生部临检中心提供，检测和结果分析由美国Bio-rad icycler实时荧光PCR扩增仪及结果处理系统完成，检测灵敏度为500 copies/ml，结果＜1.0×103copies/ml为阴性）。

1.3 统计学分析采用SPSS13.0版系统软件处理。两样本均数的比较采用t检验；率的比较采用x2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清HCV-Cag与HCV RNA检测结果在262例慢性丙型肝炎患者血清中，检出HCV-Cag阳性116例（44.3%），HCV RNA阳性112例（42.7%，P＞0.05）；262例慢性丙型肝炎患者血清HCV-Cag和HCV RNA检测结果见表1。

表1 血清HCV-Cag与HCV RNA检测结果

2.2 不同血清HCV RNA载量患者HCV-Cag滴度比较在262例慢性丙型肝炎患者，血清HCV-Cag滴度随着HCV RNA载量升高而升高。高HCV RNA载量血清HCV-Cag滴度显著高于低载量血清（P＜0.01，表2）。

表2 不同HCV RNA水平血清HCV-Cag滴度（）比较

与低水平HCV RNA血清比，①P＜0.01

HCV RNA（copies/ml）例数HCV-Cag滴度水平（P/N）＞1×1072511.9±1.7①1×107～1×105569.0±2.2＜1×105～1×103316.6±2.9＜1×1031503.8±2.8

3 讨论

当前，临床上对丙型肝炎的诊断仍以临床表现结合抗HCV抗体和HCV RNA阳性等实验室指标的检测为诊断依据[8]。HCV RNA定量检测是诊断丙型肝炎和评价抗病毒治疗疗效的主要指标[9]。HCV-Cag检测现主要用于HCV早期感染的辅助筛查，以缩短窗口期，临床应用的文献较少。李华[9]、黄锦江[10]等认为HCV-Cag与HCV RNA变化密切相关，可以作为HCV复制的标志。因此，探讨HCV-Cag检测及其在慢性丙型肝炎诊疗中的临床意义，有必要分析慢性丙型肝炎患者血清HCV-Cag与HCV RNA检测结果之间的关系。

本研究结果显示，262例慢性丙型肝炎患者血清HCV-Cag与HCV RNA阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。血清HCV-Cag与和HCV RNA均为阳性血清105例，均为阴性139例，与文献[4，11]报道的结果基本一致。血清HCV RNA载量越高，HCV-cag滴度也相对越高；不同HCV RNA载量血清HCV-Cag滴度差异有统计学意义（P＜0.01），提示慢性丙型肝炎患者血清HCV-Cag与HCV RNA同时阳性或阴性的一致性较好。

HCV RNA能够直接反映病毒的复制情况[12，13]，但其检测技术复杂，实验室条件要求高，在基层医疗单位推广受限。而HCV-Cag检测采用的是ELISA技术，因其试剂稳定、特异性强、灵敏度高、成本低等优点在普通实验室中被广泛应用[14，15]。由于HCV-Cag消长趋势与HCV RNA有明显的一致性，可以大致反映HCV复制情况。因此，在无条件开展HCV RNA检测的基层医疗单位，可以把HCV-Cag检测作为诊断HCV感染及慢性丙型肝炎抗病毒治疗效果的评价指标。目前，HCV-Cag检测的缺点在于没有定量检测技术，不能对HCV复制变化程度进行准确地量化分析，且本研究发现HCV-Cag与HCV RNA结果间有交叉阳性或阴性现象。故在慢性丙型肝炎抗病毒应答及治疗效果评价等临床应用中，HCV-Cag还不能完全替代HCV RNA检测，其在慢性丙型肝炎诊疗中的应用价值，还有待进一步探讨。

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（收稿：2013-11-20）

（校对：陈宗炳）

Detection of serum hepatitis C virus core antigen in patients with?chronic?hepatitis C