补气活血胶囊的质量标准研究

李 玲，王继鹏，柳 新

（1.烟台市食品药品检验所，山东烟台264000；2.烟台渤海制药集团有限公司，山东烟台264003）

补气活血胶囊的质量标准研究

李 玲1，王继鹏2，柳 新2

（1.烟台市食品药品检验所，山东烟台264000；2.烟台渤海制药集团有限公司，山东烟台264003）

目的建立补气活血胶囊质量标准。方法采用薄层色谱法对方中黄芪、赤芍和红花进行了定性鉴别，并用高效液相色谱法对制剂中芍药苷进行了含量测定。结果薄层色谱鉴别斑点清晰，高效液相色谱法定量准确，阴性对照无干扰。结论本法简便可行、重复性好，可有效控制该制剂的质量。

补气活血胶囊；质量标准；薄层鉴别；高效液相色谱法

补气活血胶囊是由黄芪、当归、赤芍、桃仁、红花等十一味中药组成，具有补气，活血，通络之功效。用于治疗中风恢复期属气虚血瘀证，本文对方中黄芪、赤芍、红花进行了薄层鉴别。并用高效液相色谱法对制剂中赤芍所含成分芍药苷进行了含量测定。

1 仪器与试药

DYQ－II薄层点样器；KQ3200DE型超声波处理器；Agilent 1100高效液相色谱仪；优普超纯水处理器。甲醇为色谱纯，水为高纯水，其他试剂均为分析纯。芍药苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110736－201136）；黄芪甲苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110781－200512）；补气活血胶囊由烟台渤海制药集团有限公司提供。

2 实验方法与结果

2.1 鉴别试验

2.1.1 黄芪的鉴别

2.1.1.1 供试品溶液的制备 取本品内容物10 g，研细，加甲醇50 mL，超声处理20 min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水15 mL，分次溶解，加乙醚提取2次，每次15 mL，弃去乙醚液，水液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15 mL，合并正丁醇提取液，加氨试液提取2次，每次20 mL，弃去氨液，将正丁醇水浴蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.1.2 对照药材溶液的制备 另取黄芪对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。

2.1.1.3 对照品溶液的制备 取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.1.1.4 阴性样品溶液的制备 按照处方比例和制法制成缺黄芪药材的阴性样品。按照供试品溶液的制备方法制成缺黄芪的阴性样品溶液。

2.1.1.5 试验方法 吸取上述溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－乙酸乙酯－甲醇－水（4∶1∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。薄层色谱斑点分离效果好，重现性好，阴性对照无干扰，结果见图1。

图1 黄芪的薄层色谱图

2.1.2 赤芍的鉴别

2.1.2.1 供试品溶液的制备 取本品内容物10 g，加甲醇50 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水20 mL洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2.2 对照药材溶液的制备 另取赤芍对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。

2.1.2.3 阴性样品溶液的制备 按照处方比例和制法制成缺赤芍的阴性样品。按照供试品溶液的制备方法制成缺赤芍的阴性样品溶液。

2.1.2.4 试验方法 取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－甲酸（40∶5∶10∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，结果见图2。

图2 赤芍的薄层色谱图

2.1.3 红花的鉴别

2.1.3.1 供试品溶液的制备 取本品内容物5 g，加甲醇30 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20 mL，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.3.2 对照药材溶液的制备 另取红花对照药材2 g，加水100 mL，煎煮1 h，趁热过滤，滤液浓缩至5mL，加甲醇20 mL，混匀，静置，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，自“用水饱和的正丁醇振摇提取”起，同法制成对照药材溶液。

2.1.3.3 阴性样品溶液的制备 按照处方比例和制法制成缺红花的阴性样品。按照供试品溶液的制备方法制成缺红花的阴性样品溶液。

2.1.3.4 试验方法 吸取供试品溶液和阴性样品溶液各1μL、红花对照药材溶液20μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷－乙醚－三氯甲烷（1∶4∶4）为展开剂，0～10℃预平衡15 min，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏20 min，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点，结果见图3。

2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱Spherisorb C18，4.6 mm ×250 mm；流动相：甲醇－水－冰醋酸（30∶70∶0.5）；进样体积：10μL；流速1.0 mL·min－1；检测波长为230 nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于4 000。

2.2.2 溶液的制备 供试品溶液的制备：取装量差异项下的样品，研细，取1.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W，频率33 kHz）10 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

图3 红花的薄层色谱图

对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含64μg的溶液，即得。

阴性样品溶液的制备：按处方比例制成缺赤芍药材的阴性样品，取阴性样品1.2 g，按照供试品溶液的制备方法制得阴性样品溶液。

2.2.3 专属性考察 取上述3种溶液进行测定，结果阴性样品溶液色谱图中在芍药苷对照品峰相应位置处无色谱峰出现，说明阴性样品溶液无干扰。结果见图4～6。

图4 芍药苷对照品的HPLC色谱图

2.2.4 线性关系考察 精密称取芍药苷对照品3.24 mg，加甲醇使溶解，定容至25 mL（129.60μg·mL－1），备用。精密量取上述对照品溶液1.0、2.0、5.0、8.0、10.0 mL于10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为系列标准溶液。分别进样10μL，按上述色谱条件测定。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标绘制标准曲线，计算得回归方程：Y＝1 366X－ 6.834 7（R2＝0.999 8），结果表明，在此色谱条件下，芍药苷在0.129 6～1.296 0μg内其含量与峰面积线性关系良好。

图5 供试品溶液的HPLC色谱图

图6 阴性样品溶液的HPLC色谱图

2.2.5 精密度试验 取“线性”项下浓度为64.80 μg·mL－1的溶液，按选择的色谱条件操作，注入液相色谱仪10μL，连续进样6次，结果芍药苷平均峰面积为865.7，RSD为0.82%，结果表明其精密度良好。

2.2.6 溶液的稳定性试验 配制供试样品溶液，室温下放置，于0、2、4、6、8、10、12、24 h测定含量，结果芍药苷平均峰面积为1 142.85，RSD为0.90%，结果表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.2.7 重复性试验 精密称取同批供试品六份，按供试品溶液制备方法制备测定溶液，进样10μL，结果测定溶液中芍药苷的平均含量为3.48 mg·g－1，RSD为0.98%，结果表明重复性试验良好。

2.2.8 回收率试验 采用加样回收法，取重复性试验中的样品5份，每份约0.6 g，精密称定，分置具塞锥形瓶中，另精密吸取浓度为129.60μg·mL－1的对照品溶液15 mL，精密加入20%的甲醇45 mL，密塞，称定重量，超声处理1 h，放冷至室温，称定重量，补足减失的重量，摇匀，滤过，再用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，弃去初滤液，收集续滤液，即得。按线性关系考察项下方法测定芍药苷的总量，结果芍药苷的平均回收率为99.18%，RSD为0.97%，结果见表1。

Study on quality standards for Buqi Huoxue Capsules

LILing1，WANG Ji-peng2，LIU Xin2
（1.Yantai Institute for Food and Drug Control，Yantai264000，China；2.Yantai Bohai Pharmaceutical Group Co.，Ltd.，Yantai264003，China）

ObjectiveTo establish the quality standard of Buqi Huoxue Capsules.MethodsRadix Astragali，Radix Paeoniae Rubra and Carthamus tinctoriuswere identified by TLC.An HPLCmethod for the determination of Paeoniflorin was established.ResultsTLC spots developed were fairly clear.The HPLCmethod was accurate and the blank test showed no interference.ConclusionThemethod was simple，accurate and reproducible.The established quality standards can control the qualities of this product effectively.

Buqi Huoxue Capsules；Quality standards；TLC；HPLC

R927.1

：A

2095－5375（2014）03－0142－004

李玲，女，主管药师，研究方向：药物分析，E－mail：wangjipeng＠bohaizhiyao.com