山楂叶总黄酮对慢性脑缺血大鼠脑组织氧化应激损伤的影响

张天鸽，李蒙蒙，吴晓光

(1.承德医学院2012级麻醉本科，河北承德 067000;2.指导教师)

学生园地

山楂叶总黄酮对慢性脑缺血大鼠脑组织氧化应激损伤的影响

张天鸽1，李蒙蒙1，吴晓光2

(1.承德医学院2012级麻醉本科，河北承德 067000;2.指导教师)

山楂叶总黄酮;慢性脑缺血;超氧化物酶;谷胱甘肽过氧化物酶; 丙二醛

山楂叶总黄酮(total flavone of hawthorn leaf，TFHL)的主要有效成分为牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃糖苷、牡荆素、芦丁、有机酸类和一些微量元素，具有降血压、增加冠脉血流量、抗心律失常等作用[1]。但TFHL对慢性脑缺血氧化应激损伤的影响少见报道。本研究通过观察TFHL对慢性脑缺血损伤后脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量的变化，探讨TFHL对慢性脑缺血大鼠脑组织氧化应激的干预作用。

1 材料与方法

1.1 动物与分组 雄性大鼠40只，体质量230-250g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，饲养于承德医学院二级实验动物中心。大鼠随机分为假手术组，模型组，TFHL35、70、140 mg/kg组，每组8只。

1.2 药物与试剂 采摘承德本地山楂树叶，采用水煎醇沉法提取TFHL:山楂树叶粉碎后，加入8倍体积的60%乙醇，80℃回流提取3h，残渣另用60%乙醇清洗3遍，同滤液合并后浓缩成35mg/ml备用。SOD、GSH-Px、MDA试剂盒由南京建成生物研究所提供。

1.3 动物模型制备及给药 模型组、TFHL各剂量组大鼠均采用永久性结扎双侧颈总动脉法制备慢性脑缺血模型:30mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠，钝性分离颈总动脉，双线结扎并切断双侧颈总动脉，术后24h内未苏醒者剔除，并及时补遗。假手术组仅分离双侧颈总动脉，但不结扎。术后第14d开始，TFHL各组大鼠分别给予相应剂量TFHL灌胃，连续给药30天;假手术组和模型组大鼠灌胃给予等量生理盐水。

1.4 指标检测 末次给药后1h，取大鼠脑组织，分析天平称重后，置于提前预冷的生理盐水中，制成10%的匀浆，3500r/min离心10min，取上清液，BCA法蛋白定量后，按试剂盒说明书操作步骤检测各组大鼠脑组织SOD、GSH-Px活性和MDA含量。

2 结果

与假手术组比较，慢性脑缺血模型组大鼠脑组织SOD、GSH-Px活性明显降低(P＜0.01)，MDA含量明显升高(P＜0.01);与模型组比较，TFHL药物干预各组大鼠脑组织SOD、GSH-Px活性明显升高(P＜0.05)，MDA含量显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。见附表:

附表 TFHL对大鼠脑组织SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影响(n=8,±s)

附表 TFHL对大鼠脑组织SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影响(n=8,±s)

与假手术组比较:*P＜0.01;与模型组比较:#P＜0.01，##P＜0.05

组别 剂量(mg/kg/d) SOD(U/mg pro) GSH-Px(U/mg pro) MDA(nmol/mg pro)假手术组 - 119.33±3.72 229.46±5.14 1.61±0.05模型组 - 82.46±5.82* 191.91±4.78* 2.29±0.14* 35 88.01±3.01## 198.94±5.45## 2.14±0.12## TFHL组 70 94.61±2.81# 203.34±4.31# 2.01±0.11# 140 97.85±3.14# 206.13±4.53# 1.99±0.09#

3 讨论

慢性缺血性脑损伤的机制极为复杂，研究认为，氧化应激反应与慢性缺血性脑损伤密切相关[2]。因此，有效清除自由基，抑制氧化应激反应是减轻慢性缺血性脑损伤的靶点之一。SOD、GSH-Px是体内自然存在的自由基清除剂，在正常生理状态下，氧自由基的生成与清除维持动态平衡。当脑供血不足时，线粒体能量代谢障碍，细胞膜脂质过氧化，氧自由基大量生成，脑组织SOD、GSH-Px等抗氧化酶被大量消耗，自由基清除能力减弱，诱发氧化应激反应，产生不可逆性脑损伤。MDA是氧自由基氧化细胞膜上不饱和脂肪酸所产生的一种副产物，可对细胞膜的流动性和通透性造成障碍，使细胞功能失调甚至破裂、死亡，从而对脑组织造成损伤[3-4]。慢性脑缺血时氧自由基生成的多少与MDA含量密切相关，MDA含量可间接反映体内氧化应激反应的程度[3]。抑制自由基生成，尽快清除自由基，可减轻慢性缺血性脑损伤。

本研究结果显示，TFHL可明显提高慢性脑缺血大鼠脑组织SOD、GSH-Px活力，降低MDA含量，提示TFHL可能通过提高抗氧化酶活性，抑制脂质过氧化反应，从而减轻慢性脑缺血对脑组织的损害。

[1]王肖，杜义龙，赵胜男，等.承德产山楂叶总黄酮5种黄酮类成分含量的动态分析[J].中国实验方剂学杂志，2013，19(17):171-17.

[2]贺晓丽，王月华，秦海林，等.小续命汤有效成分对慢性脑缺血大鼠氧化应激损伤及细胞凋亡的影响[J].中华神经医学杂志，2012，11(12):1214-1218.

[3]张广林，王本瀚，熊家锐，等.绞蓝总皂甙对慢性脑缺血性白质氧化性损伤的保护作用[J].中华神经医学杂志，2012，11(12):1219-1224.

[4]吴小慧，段忠心，匡小霞，等.泽泻提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激的影响[J].中华老年医学杂志，2014，33(7):795-798.

(学生园地栏目编辑:张 健)

R285

A

1004-6879(2014)06-0538-02

2014-10-21)