酢浆草对小鼠急性腹膜炎的抗炎镇痛作用研究

郭美仙，王艳双，施贵荣，沈 磊

（大理学院药学与化学学院，云南大理 671000）

酢浆草对小鼠急性腹膜炎的抗炎镇痛作用研究

郭美仙，王艳双，施贵荣，沈 磊

（大理学院药学与化学学院，云南大理 671000）

目的：研究酢浆草对醋酸所致急性腹膜炎小鼠的抗炎镇痛作用。方法：腹腔注射醋酸制备小鼠急性腹膜炎模型，观察酢浆草乙醇提取物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响；观察酢浆草乙醇提取物对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响。结果：酢浆草乙醇提取物能使小鼠扭体反应次数减少；能降低小鼠腹腔毛细血管的通透性。结论：酢浆草对醋酸所致小鼠急性腹膜炎具有一定的抗炎镇痛作用。

酢浆草；急性腹膜炎；抗炎；镇痛

酢浆草（Oxalis corniculata L.），又名酸浆草、酸茭草、斑鸠酸、三叶酸等，白族药名双巴子、双驹驹子。全草入药，有利湿止泻、止痛消肿等功效〔1-3〕。李良等〔4〕通过临床观察，发现酢浆草对肝炎、肾盂肾炎、病毒性疱疹等有较好疗效，还具有祛痰平喘，止痛的作用。酢浆草的醇提物中含有较高的黄酮类成分〔5〕。王玉仙〔6〕研究结果表明酢浆草能抑制角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀，降低MDA含量。丁良等〔7-8〕对酢浆草提取物的体外抗氧化活性和抑菌活性进行了研究，结果表明酢浆草具有抗氧化和抑菌作用。马鸿军〔9〕研究结果表明酢浆草具有较好的调脂和护肝作用。李静〔10〕研究结果表明酢浆草具有一定抗肺癌的活性。目前国内外尚未见酢浆草对醋酸所致小鼠腹膜炎的抗炎镇痛作用研究报道，本实验研究了酢浆草对醋酸所致小鼠腹膜炎的抗炎镇痛作用，现报道如下。

1 实验材料

1.1动物KM种小鼠，SPF级，雌雄各半，体重18～22 g，由昆明医学院实验动物中心提供，生产合格证：SCXK（滇）2011-0004。

1.2药品与试剂阿司匹林肠溶片（云南白药集团股份有限公司，ZFA1307）；葡萄糖注射液（昆明市宁斯药业有限责任公司，H53022077）；伊文思蓝（上海化学试剂采购供应站经销，82-11-02）；冰乙酸（天津市风船化学试剂科技有限公司，080308）；氯化钠注射液（昆明南疆制药有限公司，B080817f2）。

1.3仪器ER-5205旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；SHB-IIIT循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；80-2电动离心机（江苏金坛市忆通电子有限公司）；722S可见光光度计（上海菁华科技有限公司）。

2 方法

2.1样品处理样品采自大理市下关镇，经大理学院生药学张德全博士鉴定为酢浆草科（Oxalidaceae）酢浆草属（Oxalis）植物酢浆草（Oxalis corniculata L.）。称取干燥粉碎后的酢浆草全草10 kg置于合适的容器中，用75%的乙醇浸泡4次每次24 h，用纱布过滤收集4次的浸泡液，用旋转蒸发器浓缩为浸膏，在浸膏中加入95%的乙醇，放置于4℃冰箱24 h，过滤，滤液加水至浑浊，放置于4℃冰箱24 h，再次过滤，浓缩滤液。最后冷冻干燥器后得599 g乙醇提取物，每克浸膏含生药16.69 g，装瓶密封置零度以下的冰箱中备用。

2.2酢浆草对醋酸所致小鼠扭体反应的影响取小鼠48只，随机均分为模型对照组（10%葡萄糖溶液）、阳性对照组（2%阿司匹林）、酢浆草低剂量组（6%酢浆草乙醇提取物）、酢浆草高剂量组（12%酢浆草乙醇提取物）；各小鼠按10 mL∕kg灌胃给药，1次∕d，连续5 d。于末次给药后30 min，各小鼠腹腔注射1%的醋酸溶液10 mL∕kg，观察注射后15 min内小鼠产生扭体反应（以小鼠出现腹部内凹、躯干与后肢伸张，臀部高起为扭体反应）的次数，计算扭体反应抑制率〔11-12〕。

抑制率=（模型组扭体反应次数-给药组扭体反应次数）∕模型组扭体反应次数×100%

2.3酢浆草对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响取小鼠48只，分组及给药同方法2.2。于末次给药后30 min，各小鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.2 mL∕只，20 min后腹腔注射1%的醋酸溶液10 mL∕kg。注射后30 min，处死小鼠、剖腹、用生理盐水5 mL分数次洗涤腹腔，吸出洗涤液，合并后，3 000 r∕min离心5 min，取上清液在578 nm处测定吸光度（OD），计算毛细血管通透性抑制率〔11，13〕。

抑制率=（模型组OD值-给药组OD值）∕模型组OD值×100%

2.4统计方法实验数据以-x±s表示，采用SPSS 17.0软件处理，进行单因素方差分析，并进行两两比较（t检验）。

3 结果

3.1酢浆草对醋酸所致小鼠扭体反应的影响与模型组比较，阳性组、酢浆草乙醇提取物高剂量组和低剂量组小鼠的扭体反应次数显著减少，差异有统计学意义（P＜0.01）。结果表明：酢浆草乙醇提取物可减少醋酸所致小鼠扭体反应次数，具有镇痛作用，且在一定剂量范围内存在剂量依赖性，但作用强度不及阿司匹林。见表1。

3.2酢浆草对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响与模型组比较，实验第5天，阳性组、酢浆草乙醇提取物高剂量组小鼠的“体重”显著减轻，差异有统计学意义（P＜0.01，P＜0.05），结果表明：酢浆草乙醇提取物对小鼠胃肠道刺激小于阿司匹林。与模型组比较，阳性组、酢浆草醇提取物高剂量组和低剂量组小鼠的腹腔渗出液中伊文思蓝含量明显减少，差异有统计学意义（P＜0.01）。结果表明：酢浆草醇提取物可降低醋酸所致小鼠腹腔毛细血管的通透性，具有抗炎作用，且在一定剂量范围内存在剂量依赖性，但作用强度不及阿司匹林。见表2。

表1 酢浆草对醋酸所致小鼠扭体反应的影响（n=12）

表1 酢浆草对醋酸所致小鼠扭体反应的影响（n=12）

注：与模型组比较△△P＜0.01；与阳性组比较**P＜0.01。

扭体反应抑制率∕% 0.00 73.44 51.56 32.81分组模型组阳性组高剂量组低剂量组给药剂量∕(g∕kg)—0.20 20.04 10.02第1天体重∕g 23.4±2.2 22.9±1.7 22.7±2.3 23.1±2.5第5天体重∕g 28.7±2.2 23.1±2.8△△25.7±2.3△△**26.8±1.7**扭体反应次数∕次64±13 17±5△△31±8△△**43±10△△**

4 讨论

急性腹膜炎是机体针对损伤因子的一种保护性和防御性反应，表现为红、肿、热、痛和功能障碍。渗出是急性腹膜炎重要特征性的改变，渗出的原因是毛细血管通透性增加，所渗出的体液、蛋白质和白细胞等形成腹腔液〔14〕。醋酸是急性炎症常用的诱导剂之一，本实验是利用给小鼠腹腔注射醋酸，引起毛细血管通透性增加来制备急性腹膜炎动物模型。实验结果显示，酢浆草乙醇提取物能降低小鼠腹腔毛细血管的通透性，具有抗炎的作用。

表2 酢浆草对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响（）

表2 酢浆草对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响（）

注：①与模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01；与阳性组比较*P＜0.05，**P＜0.01；②低剂量组有1只小鼠腹腔渗出液有血废弃。

通透性抑制率∕% 0.00 51.02 37.35 24.69分组模型组阳性组高剂量组低剂量组样本量∕n 12 12 12 11给药剂量∕(g∕kg)—0.20 20.04 10.02第1天体重∕g 22.9±2.0 23.3±2.4 22.7±1.8 23.5±2.2第5天体重∕g 28.1±2.4 23.6±3.1△△26.0±2.5△**27.2±2.0**腹腔渗出液∕OD值0.490±0.102 0.243±0.059△△0.307±0.081△△*0.369±0.063△△**

疼痛是直接作用于身体的伤害性刺激在脑内的对应，是一种保护性的警觉功能，是多种疾病的常见症状之一〔15〕。醋酸致小鼠扭体法目前广泛用于中药的止痛药效学评价，通过化学刺激产生持久的疼痛，致使小鼠出现腹部内凹、躯干后腿伸张、臀部高起等扭体反应。实验结果表明：酢浆草乙醇提取物具有一定的镇痛作用。

阿司匹林常见不良反应为胃肠道反应，实验过程中每组小鼠都给等量饲料，其中阳性组（阿司匹林）的饲料每天都有剩余，实验第5天，阳性组、酢浆草乙醇提取物高剂量组小鼠的体重显著减轻，差异有统计学意义（P＜0.01），结果表明：酢浆草乙醇提取物对小鼠胃肠道可能存在刺激作用。酢浆草中含有黄酮类成分，酢浆草的抗炎、镇痛作用可能与其有关，作用机理还有待研究。

〔1〕中国科学院《中国植物志》编委会.中国植物志〔M〕.北京：科学出版社，1998，43（1）：11.

〔2〕兰茂.滇南本草〔M〕.昆明：云南人民卫生出版社，1959：74-75.

〔3〕大理白族自治州人民政府.大理中药资源志〔M〕.昆明：云南民族出版社，1991：89-90.

〔4〕李良，李传芹.酢浆草的临床应用〔J〕.中国临床与保健，1992，4（4）：50.

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〔6〕王玉仙.酢浆草水提物对大鼠角叉菜胶性炎的影响〔D〕.保定：河北大学，2011.

〔7〕丁良，李静，杨慧.酢浆草提取物体外抗氧化活性研究〔J〕.辽宁中医杂志，2011，38（10）：2055-2056.

〔8〕丁良，李静，杨慧，等.酢浆草的体外抑菌活性〔J〕.医学研究与教育，2010，27（6）：16-18.

〔9〕马鸿军.酢浆草对高脂血症大鼠血脂代谢和护肝作用的研究〔D〕.保定：河北大学，2010.

〔10〕李静.酢浆草提取物体外抗肿瘤和抗氧化研究〔D〕.保定：河北大学，2011.

〔11〕孙晓萍，欧立娟，宓穗卿，等.冰片抗炎镇痛作用的实验研究〔J〕.中药新药与临床药理，2007，18（5）：353-355.

〔12〕贺海波，石孟琼，陈涛，等.珠子参水提物抗炎镇痛作用的实验研究〔J〕.第三军医大学学报，2010，32（20）：2224-2227.

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〔15〕尤启冬.药物化学〔M〕.7版.北京：人民卫生出版社，2011：237-239.

（责任编辑 李 杨）

Anti-inflammatory and Analgesic Effects of Oxalis corniculata L.on Acute Peritonitis in Mice

GUO Meixian,WANG Yanshuang,SHI Guirong,SHEN Lei
（College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000，China）

Objective:To study the analgesic and anti-inflammatory effects of Oxalis corniculata L.on acute peritonitis induced by acetic acid in mice.Methods:Mice peritonitis model caused by intraperitoneal injection of acetic acid was used to observe the effects of the ethanol extract of Oxalis corniculata L.on the body torsion reaction and the abdominal blood capillary permeability.Results:The ethanol extract of Oxalis corniculata L.reduced the body torsion times and the abdominal capillary permeability of mice induced by acetic acid.Conclusion:Oxalis corniculata L.showed anti-inflammatory and analgesic effects on acute peritonitis in mice.

Oxalis corniculata L.;acute peritonitis;anti-inflammatory;analgesic

R285.5

A

1672-2345（2014）02-0006-03

10.3969∕j.issn.1672-2345.2014.02.003

2013-12-06

2013-12-23

郭美仙，实验师，主要从事中药药理学研究.