长小苞黄芪化学成分研究

程 霞，肖朝江，孙俊哲，姜 北

（大理学院药学与化学学院，云南大理 671000）

长小苞黄芪化学成分研究

程 霞，肖朝江，孙俊哲，姜 北*

（大理学院药学与化学学院，云南大理 671000）

目的：研究长小苞黄芪（Astragalus balfourianus）的化学成分。方法：采用硅胶、RP-18、sephadex LH-20、MCI等柱层析进行分离纯化，通过波谱方法等进行结构鉴定。结果：从长小苞黄芪甲醇提取物的乙酸乙酯部位分得6个化合物，分别鉴定为：白桦酸（1）、β-谷甾醇（2）、异甘草素（3）、角鲨烯（4）、芒柄花苷（5）、芒柄花素（6）。结论：所有的化合物均是首次从该植物中分离得到。

长小苞黄芪；化学成分；分离鉴定

豆科（Leguminosae或Fabaceae）黄芪属（Astrag⁃alus）植物系一年生或多年生草本、半灌木，较少为灌木；全世界约2 000余种，主要分布于北半球。我国有278种，2亚种，35变种及2变型，南北各省区均产。黄芪属植物具有重要的经济价值，其中中药黄芪有“补药之长”的美誉〔1〕。药典上规定中药黄芪为豆科黄芪属植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus Bge.var.mongholicus或膜荚黄芪A.membranaceus的干燥根〔2〕，主要含有黄芪苷类，多糖类和黄酮类生物活性物质〔3〕，具有多种药理活性，包括增强机体免疫功能，抗氧化，保肝利尿，对心血管的作用，对血液系统的作用等〔4〕，广泛应用于临床。

云南作为黄芪属植物的一个分布中心，黄芪属植物资源十分丰富，共有51个种，6个变种〔5-6〕，但无正品黄芪自然分布，因此，许多同属近缘植物在该地区充当正品黄芪使用，例如地八角、梭果黄芪等均可作为黄芪代用品〔7〕。云南黄芪属植物资源虽然异常丰富，但该地区黄芪属植物大多从未有研究，无法深入利用与保护。我们前期研究表明，部分云南黄芪属植物在化学成分、生物活性上有显著特点与开发潜力，因此，对云南产黄芪属植物资源进行全面系统研究很有必要。

长小苞黄芪（A.balflourianus）为云南黄芪属植物之一，又称雪山芪、滇西北黄芪，多年生草本，生于海拔2 500～2 900 m的草坡及林下，主要分布于云南西北部及川西地区。为深入了解该植物的品质，我们近来对其进行了系统的研究，从中分离得到6个化合物，现报道如下。见图1。

1 材料与方法

图1 化合物1～6的化学结构

1.1仪器和材料Bruker Advance III-400核磁共振仪，四甲基硅烷（TMS）为内标；层析填充材料分别为RP-18（40～75µm；日本Fuji公司）、Sepha⁃dex LH-20（Amersham Biosciences，Sweden）、MCI-gel CHP-20P、硅胶和薄层层析硅胶GF254（青岛海洋化工厂）；薄层层析显色剂为10%硫酸甲醇；氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇等有机溶剂均为工业纯经重蒸后使用；去离子水、异丙醇为分析纯。

实验用长小苞黄芪植物样品2012年7月采自云南迪庆藏族自治州，植物标本（20120718-1-A）存放于大理学院药学与化学学院姜北教授研究组。

1.2提取与分离长小苞黄芪干燥根0.998 5 kg，粉粹后用甲醇冷浸提取6次，减压浓缩得浸膏170 g；用水分散浸膏，再用乙酸乙酯萃取，蒸干得浸膏31 g，浸膏用硅胶（200～300目）柱层析，氯仿-丙酮混合溶剂梯度洗脱（1：0，20：1，10：1，5：1，0：1），在TLC的检测下合并相同流分得10个组分。

组分1经反复硅胶柱层析（石油醚∕石油醚-丙酮300：1）及Sephadex LH-20（氯仿：甲醇=1：1）得化合物4（20 mg）。组分2经Sephadex LH-20（氯仿：甲醇=1：1）柱层析得到化合物2（694 mg）。组分9经Sephadex LH-20（氯仿：甲醇=1：1）和RP-18柱层析（甲醇：水=50%～100%）得到化合物3（31.3 mg）。组分5经Sephadex LH-20（氯仿：甲醇=1：1）和硅胶（氯仿：异丙醇=150：1）柱层析得化合物1（9.8 mg）。组分10用MCI（甲醇：水=50%～100%）柱层析，再经Sephadex LH-20（甲醇）柱层析得化合物5（1.05 g）。组分4经Sephadex LH-20（氯仿：甲醇=1：1）和反复硅胶柱层析（氯仿：异丙醇=100：1）得化合物6（15.6 mg）。

2 结构鉴定

化合物1：淡黄色粉末。1H NMR（400 MHz，pyridine-d5）δ：4.93（1H，d，J=2.2 Hz，H-29a），4.75（1H，brs，H-29b），3.57～3.50（1H，m，H-3），3.47～3.41（1H，m，H-19），2.75～2.69（1H，m，H-13），2.62（1H，d，J=12.7 Hz，H-16），2.27～2.18（2H，m，H-22），1.77（3H，s，Me-30），1.21（3H，s，Me-23），1.04、0.99、0.79（各3H，s，Me-24，25，26），1.03（3H，s，Me-27）；13C NMR（100 MHz，pyridine-d5）δ：178.7（C-28），151.1（C-20），109.8（C-29），77.8（C-3），56.4（C-17），55.6（C-5），50.7（C-9），49.5（C-19），47.5（C-18），42.6（C-14），40.8（C-8），39.3（C-4），39.0（C-1），38.3（C-13），37.4（C-22），37.3（C-10），34.6（C-7），32.6（C-16），30.9（C-15），30.0（C-21），28.4（C-23），28.1（C-2），25.8（C-12），20.9（C-11），19.2（C-30），18.5（C-6），16.2（C-24），16.2（C-25），16.1（C-26），14.6（C-27）。上述波谱数据与文献〔8〕报道的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为白桦酸。

化合物2：无色针晶（丙酮）。在TLC上经多种溶剂系统分别展开后化合物2与已鉴定的对照品β-谷甾醇标准品Rf值及斑点颜色均一致，故鉴定该化合物为β-谷甾醇。

化合物3：黄色粉末（丙酮）。1H NMR（400 MHz，acetone-d6）δ：13.67（1H，s，2'-OH），9.46（2H，s，4，4'-OH），8.13（1H，d，J=8.9 Hz，H-6'），7.84（1H，d，J=15.3 Hz，H-α），7.77（1H，d，J=15.3 Hz，H-β），7.74（2H，d，J=8.5 Hz，H-2，6），6.93（2H，d，J=8.5 Hz，H-3，5），6.47（1H，dd，J=8.9，2.1 Hz，H-5'），6.37（1H，d，J= 2.1 Hz，H-3'）；13C NMR（100 MHz，acetone-d6）δ：192.8（C=O），167.6（C-4'），165.7（C-2'），161.1（C-4），145.2（C-β），133.3（C-6'），131.8（C-2，6），127.5（C-1），118.2（C-α），116.8（C-3，5），114.4（C-1'），108.7（C-5'），103.7（C-3'）。上述波谱数据与文献〔9〕报道的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为异甘草素。

化合物4：无色油状液体（氯仿）。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.10～5.14（6H，m，H-3，7，11，14，18，22），1.97～2.09（20H，m，H2-4，5，8，9，12，13，16，17，20，21），1.68（6H，brs，Me-1，24），1.60（18H，s，Me-2′，6′，10′，15′，19，23′）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：135.1（C-10，15），134.9（C-6，19），131.3（C-2，23），124.4（C-3，22），124.3（C-11，14），124.3（C-7，18），39.7（C-5，9，16，20），28.3（C-12，13），26.8（C-4，21），26.7（C-8，17），25.7（C-2′，23′），17.7（C-1，24），16.1（C-10′，15′），16.0（C-6′，19′）。上述波谱数据与文献〔10〕报道的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为角鲨烯。

化合物5：白色粉末（氯仿-甲醇）。1H NMR（400 MHz，pyridine-d5）δ：8.25（1H，d，J=8.9 Hz，H-5），8.02（1H，s，H-2），7.64（2H，d，J= 8.8 Hz，H-2′，6′），7.33（1H，d，J=2.3 Hz，H-8），7.19（1H，dd，J=8.9，2.3 Hz，H-6），6.95（2H，d，J=8.8 Hz，H-3′，5′），5.71（1H，d，J= 7.3 Hz，glc H-1），3.57（3H，s，-OCH3）；13C NMR（100 MHz，pyridine-d5）δ：176.0（C-4），162.9（C-7），160.5（C-4′），158.3（C-9），153.6（C-2），131.2（C-2′，C-6′），128.3（C-5），125.5（C-3），125.2（C-1′），120.2（C-10），116.5（C-6），114.7（C-3′，C-5′），104.7（C-8），102.3（glc C-1），79.8（glc C-5），78.9（glc C-3），75.3（glc C-2），71.7（glc C-4），62.9（glc C-6），55.7（-OCH3）。上述波谱数据与文献〔11-12〕报道的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为芒柄花苷。

化合物6：白色粉末（氯仿-甲醇）。1H NMR（400 MHz，pyridine-d5）δ：8.44（1H，d，J=8.7 Hz，H-5），8.15（1H，s，H-2），7.77（2H，d，J= 8.8 Hz，H-2′，6′），7.22（1H，dd，J=8.7，2.2 Hz，H-6），7.11（1H，d，J=2.2 Hz，H-8），7.06（2H，d，J=8.8 Hz，H-3′，5′），3.67（3H，s，-OCH3）；13C NMR（100 MHz，pyridine-d5）δ：176.1（C-4），164.7（C-7），160.4（C-4′），159.0（C-9），153.3（C-2），131.3（C-2′，6′），128.7（C-5），125.8（C-1′），125.1（C-3），118.4（C-10），116.4（C-6），114.7（C-3′，5′），103.4（C-8），56.7（-OCH3）。上述波谱数据与文献〔12〕报道的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为芒柄花素。

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〔11〕刘毅，海力茜，赵玉英，等.天山岩黄芪异黄酮类成分研究〔J〕.中国药学杂志，2009，44（20）：1533-1535.

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*通信作者：姜北，教授，博士.

（责任编辑 李 杨）

Study on the Chemical Constituents of Astragalus balfourianus

CHENG Xia,XIAO Chaojiang,SUN Junzhe,JIANG Bei*
（College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000，China）

Objective:To explore the chemical constituents of Astragalus balfourianus.Methods:The constituents were isolated by chromatography applying silica gel column,RP-18,sephadex LH-20 and MCI,and the structures were identified on the basis of spectral data and physicochemical properties.Results:Six compounds were isolated from ethyl acetate fraction of the MeOH extract from rhizomes and were identified as betulinic acid（1）,β-sitosterol（2）,isoliquiritigenin（3）,squalene（4）,ononin（5）,and formononetin（6）.Conclusion:Thesecompounds wereobtained from Astragalusbalfourianus forthe first time.

Astragalusbalfourianus;chemical constituents;isolation andidentification

R284.2

A

1672-2345（2014）02-0003-03

10.3969∕j.issn.1672-2345.2014.02.002

国家自然科学基金资助项目（31170313）；云南省百名海外高层次人才引进计划基金资助项目（云组通〔2011〕123号）

2013-12-13

2013-12-20

程霞，硕士研究生，主要从事药物化学研究.