用HPLC法对一清颗粒中大黄的定量测定

孙 雪

用HPLC法对一清颗粒中大黄的定量测定

孙 雪

（河北省衡水市食品药品检验所，衡水053000）

目的建立对一清颗粒中大黄的定量分析。方法用HPLC法测定一清颗粒中大黄中大黄素和大黄酚的含量。结果线性范围分别是大黄素0.016～0.164μg（r=0.9996，n=5）；大黄酚0.032～0.328μg（r=0.9995，n=5）。平均回收率：大黄素97.1%，RSD为1.29%；大黄酚97.4%，RSD为1.37%。结论该方法准确可靠，可用于一清颗粒的质量控制。

一清颗粒；大黄素；大黄酚；中药定量分析

一清颗粒由黄连、大黄、黄芩三味中药制成，该药具清热泻火解毒，化瘀凉血止血功效，火毒血热所致的身热烦燥、目赤口疮、咽喉牙龈肿痛的治疗，该药使用广泛、疗效确切，但是该药品的质量标准［1］没有对主要大黄进行定量的分析，为了更好地控制产品的内在质量，使临床治疗安全有效，本实验采用HPLC（高效液相色谱）法对其进行质量标准研究。

1 仪器与试药

仪器：Waters e2695高效液相色谱仪；BP110S电子分析天平；WFH-203三用紫外分析仪。

试药：乙腈和甲醇为色谱纯，水为纯化水，其它试剂为分析纯；大黄素（批号：110756-201211）、大黄酚（批号：110796-201210）均由中国药品生物制品检定所提供。一清颗粒由衡水市哈励逊国际和平医院提供，厂家：江西红星药业有限公司，批准文号：国药准字Z20064055规格：每袋装7.5g。

2 含量测定

2.1色谱条件［2］色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱150mm×4.6μm；流动相：乙腈-水-0.1%磷酸（60：40：1）；流速：1.0m1／min；柱温：35℃；检测波长：254nm。

2.2对照品溶液的制备精密称取大黄素、大黄酚对照品各10mg，分别置100m1量瓶中，用甲醇稀释至刻度。分别精密量取大黄素溶液2m1、大黄酚溶液4m1，置50m1量瓶中，加甲醇（稀释成含大黄素4.224μg／ml、大黄酚8.398μg／ml的混合溶液。

2.3供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，研细，取约15g，置锥形瓶中，加甲醇100ml，称重，超声30min，置水浴中加热回流1小时，立即冷却，用甲醇补足失去重量，用三氯甲烷强力振摇提取4次，每次15ml，合并三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶液溶解，移25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4阴性对照品溶液的制备取缺少大黄的样品，按供试液制备方法制成阴性对照品溶液。见图1。

图1 高效液相色谱图

2.5线性范围试验精密吸取对照品溶液（大黄素4.224μg／ml、大黄酚8.398μg／ml）1、2、5、10、15μl按上述色谱条件测定。求得回归方程分别为大黄素Y=7.81× 102X+1.018r=0.9996，大黄酚Y=1.483×103X+3.382 r=0.9995。结果表明：大黄素、大黄酚分别在0.016-0.164μg，0.032～0.328μg范围内线性关系良好。

2.6重复性试验取同一批号样品照上述供试品溶液制备方法配制5份供试液，分别取10μl进样，结果大黄素RSD为1.07%，大黄酚RSD为1.43%。

2.7精密度试验取对照溶液各10μl，分别连续进样5次，记录各自的峰面积，大黄素RSD为0.47%，大黄酚RSD为0.52%。

2.8稳定性试验精密吸取同一批供试品溶液各10μl，分别在0、2、4、6、8h、12h测定峰面积，结果表明大黄素RSD为1.05%，大黄酚RSD为RSD为1.13%。

2.9加样回收率试验精密量取已知含量的一清颗粒6份每份7.5g，分别精密加入对照品大黄素（1μg／ml） 1.0ml和大黄酚（2μg／ml）1.0ml，照3.3制备待测溶液，按3.1测定，结果平均回收率及RSD分别为98.4%、1.98%和97.7%、1.33%。

表1 回收率试验结果

3 讨论

3.1大黄在处方中为主药所以本文以大黄素、大黄酚为指标，进行含量测定方法的研究，采用HPLC法对大黄素、大黄酚的含量进行测定，将测定波长选定在254nm波长处，此波长对紫外吸收灵敏。

3.2选了四组流动相分别为甲醇-0.1%磷酸（85∶15），甲醇-0.1%磷酸（80：20），甲醇-0.1%磷酸-乙腈（85∶13∶2），乙腈-水-0.1%磷酸（60∶40∶1），结果表明乙腈-水-0.1%磷酸（60：40：1）为流动相，分离度好，峰型好。

［1］中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：化学工业出版社，2005.

［2］巫涛，顾明君.HPLC测定黄连上清胶囊中大黄素、大黄酚含量［J］.中成药，2005，27（4）：472-473.

不能空腹吃柿子

柿子是人们喜食的水果之一，不仅富含维生素C，而且所含糖分也很高。因其甜美可口，并有润肺、清肠、止咳等作用，所以深受群众喜爱。可每逢柿子上市时，总有人因一次过量食入，在胃中聚合成团块，大者如拳，疼痛剧烈，严重者不得不进行手术将肿物取出，这就是医生们说的胃柿石症。

“胃柿石”的形成原因是多方面的。柿子中含有柿胶酚，遇到胃内的酸液后，可产生凝固而沉淀；柿子中还含有一种可溶性收敛剂红鞣质（未成熟的柿子中含量高），红鞣质在胃酸作用下与蛋白质结合，会凝成一种不溶于水的鞣酸蛋白而沉淀在胃内，并逐渐凝聚成大块；再加上柿子本身所含的树胶和果胶，遇酸凝集，沉淀黏合，并与食物残渣聚积，愈积愈大，便成了巨大团块——胃柿石。

——中国中医药报

The Determination of Rhubarb in Yiqing Particles by HPLC Method

Sun Xue
（Hengshui city food and drug inspection，Hebei provice，053000，China）

ObjectiveTo establish the quantitative analysis of rhubarb in Yiqing Particles.Methodsusing HPLC to determination the content of emodin and rhubarb phenol in the Yiqing Particles.Resultsemodin linear range were0.016～0.164 mu of g（r=0.9996，n=5）.Rhubarb phenol 0.032～0.328 mu g（r=0.9995，n=5）.The average recovery：emodin 97.1%，RSD was 1.29%；Rhubarb pheno1 97.4%，RSD was 1.37%.Conclusionthe method is accurate and reliable and can be used for quality control of a clear grain.

Yiqing Particles；Emodin；Rhubarb phenol

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.04.092

：1672-2779（2014）-04-0146-02

苏 玲 本文校对：耿红梅

2013-11-07）