临床血液学检验分析前质量控制浅析

晋 晶 曹喜俊

（1南方医科大学珠江医院检验医学部，广州510280；2广州中医药大学，广州510282）

临床血液学检验分析前质量控制浅析

晋 晶1曹喜俊2

（1南方医科大学珠江医院检验医学部，广州510280；2广州中医药大学，广州510282）

血液检验；质量控制；血栓；止血

为临床提供及时、准确的实验室数据，是临床检验全面质量管理的出发点和归宿。大量资料表明，临床实验室在实验检查的分析前、分析中和分析后三个阶段均有可能出现分析误差，而分析前质量控制不当导致的分析误差可达60%以上，且由其导致的73%的分析误差可以通过有效的质量管理措施预防［1］。为保证临床检验质量，分析前质量控制与管理包括医生申请、患者准备、标本采集、储存、运输及前处理等因素成为了临床检验质量保证的一个重要环节［2］。本文就临床血液学检验各专业分析前质量控制进行进一步分析探讨，目的是做好分析前质量控制，确保检验结果的真实性和可靠性。

1 临床血液一般检验

1.1患者准备新生儿红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白含量会有生理性增高，而3个月的婴儿至15岁以前的儿童红细胞计数及血红蛋白含量可较正常人低10%～20%。白细胞分类中，婴幼儿淋巴细胞较高，有时可达50%发上，出生后2周的婴儿，单核细胞可达15%或更多，儿童阶段也较成人稍多。妊娠中、后期孕妇和老年人红细胞计数和血红蛋白会生理性减少。剧烈运动、情绪激动等也可使红细胞计数及白细胞计数出现一过性的升高。

1.2标本采集

1.2.1患者体位正常人坐立时血浆总量比卧位减少12%左右，因此，坐立位与卧位相比，血红蛋白、白细胞计数、红细胞计数、红细胞压积升高5%～15%［3］。住院病人统一采用卧位，门诊病人采用坐位，因此，住院病人与门诊病人的检测结果会有所差别。

1.2.2抗凝剂CLSⅠ推荐血液细胞学及形态学检测用EDTA-K2抗凝管，采血后应立即轻轻上下颠倒混匀5～10次与抗凝剂充分混匀。Giuseppe Lippi，MD等也通过分别对12位自愿者的三份血液标本（采血后直立放置、立即上下颠倒混匀6次、12次）在采血后30～60min内进行检测，发现仅采血后未立即与抗凝剂混匀的标本与混匀后标本检测的白细胞计数、血小板计数、红细胞计数、血红蛋白等结果有显著差异［4］。

1.2.3采血部位绝大多数专家建议，应用全自动血细胞分析仪时应用静脉血取代手指末梢血标本。有研究表明，末梢血和静脉血的血常规检验结果有显著性差异，末梢血的检验准确性和可重复性差：白细胞计数明显高（＋8%）而血小板计数明显低（-9%）［3］。

1.3标本贮存用EDTA抗凝管采集的血标本，室温下在标本采集30min后至8h内检测可得到最佳的检测结果。由于粒细胞形态在2h内会有变化，因此需要进行白细胞镜检分类时，应及早推制血片。

2 血栓与止血实验

2.1患者准备情绪紧张、激烈运动、饱食油腻会激活或干扰血小板、凝血因子和纤溶成份。甘蓝、菠菜、豆制品、奶制品等富含维生素K的食品可以影响华法林的抗凝效果。因此，患者应处于平静和空腹状态。不同围产期的孕妇许多指标会发生生理性的变化。正常女性纤维蛋白原含量不能超过0.4g／L，而产前孕妇达到0.8g／L仍属正常之列。妊娠晚期会出现活化部分凝血活酶时间缩短、D-二聚体结果增高。老年人纤维蛋白原含量、组织纤溶酶原激活物也较正常人高［5］。

2.2标本采集采血人员应技术熟练，以防止标本溶血、组织损伤，外源性凝血因子进入试管，影响实验结果。止血带应松紧适宜，时间应尽量缩短。避免从输液三通管取血及凝血块、污染的组织液或经此途径给予的药物污染标本，导致检测结果不准确。采血完毕，应立即与抗凝剂充分混合，但要避免溶血。使用真空采血系统，一次静脉穿刺后，所采集的第一管血可以用于血生化等无需抗凝剂的实验，第二管用于血栓和止血实验［3］。

2.3抗凝剂的选择常用抗凝剂为0.109mol／L枸橼酸钠同时需严格按1∶9比例抗凝。血液比例过低，抗凝剂相对过剩，对很多检验会造成严重影响。所谓1∶9是指1份抗凝剂对9份红细胞比积正常的血液中的血浆而言。因此，当红细胞比积过高（大于70%）或过低（小于20%）时，就要调整抗凝剂的浓度，否则就会产生错误的结果［5］。

Joshua L.Hood和Charles S.Eby研究发现，从静脉或动脉导管取血导致的肝素污染、3.8%而非3.2%的高浓度枸椽酸钠抗凝管导致标本溶血、标本红细胞比积＞55%或标本量不足导致离子钙相对不足以及未及时检测等情况均可以导致PT和APTT延长［6］。

2.4标本的运输标本送检需严防剧烈振动、日光直射和异物落入。在室温下立即送检且在1小时内检测完毕。低温会损伤血小板，至使因子Ⅵ，Ⅺ活化，使APTT和PT缩短。但是有些项目如β-血小板球蛋白，血小板因子Ⅳ和凝血因子等需在4℃下运送，以防止因子Ⅴ和Ⅱ的降解［3］。采血完成后，应及时处理并检测，以防标本贮存时，血细胞的代谢活动、蒸发作用和升华作用、化学反应、微生物降解、渗透作用、光学作用、气体扩散等等，直接影响标本的质量。如凝血VIII因子、凝血V因子极不稳定，随着时间的延长，保存环境温度的增高，凝血活性逐渐消失。曾研究证实在32℃条件下保存的血浆，在6h、24h因子活性分别消失52%、41%和95%。即使在4℃冰箱中，活性也分别消失5%、55%和71%。因此，进行VⅠⅠⅠ因子活性检查，应在采血后2h内完成检测。若不能及时检查，应于－80℃冰箱中保存［5］。

2.5标本处理标本应尽快离心分离血浆，一般在15～20℃离心，但纤溶试验需在4℃离心。富血小板血浆需慢速离心800×g 15分钟；贫血小板血浆需快速离心2000～2500×g 30分钟。吸取血浆层的中三分之一的血浆供检测用。溶血会引起血小板活化和凝血时间缩短，标本应回退。血浆标本原则上应立即检测或当天检测，否则应低温保存。标本的保存时间与保存温度有关，22～24℃保存2小时，2～4℃保存4小时，－20℃保存2周，－70℃保存6个月［3］。

3 红细胞沉降率检测

3.1患者准备进食可使血沉加快，因此，应空腹采集标本。妇女月经期、妊娠3个月以上，老年人血沉均较正常人偏高。另外，服用口服避孕药、阿司匹林、维生素A等药物会使血沉加快。

3.2标本采集、运送抗凝管常用抗凝剂为枸橼酸钠，同时需按1∶4比例抗凝，不能出现凝血块。采集标本后应室温及时送检，采集后3h内检测完毕，超过3h会使血沉减慢。

总之，为了提高检验结果的真实性与可靠性，检验科与临床科室应积极沟通交流、举办业务讲座，使医护人员对检验标本分析前质量控制各环节工作的重要性有更进一步的了解和认识，规范操作，提供高质量的检测标本，确保为医生的诊疗决策提供重要依据的检验结果真实可信。

［1］Paolo Carraro and Mario Plebani．Clin Chem 07 Errors in a stat laboratory types and frequencies 10 years later［J］．Clinical Chemistry，2007，53（7）：1338-1342．

［2］zay Arikan Akan，Esra Elmali，Zihni Karaeren．Evaluation of pre errors in clinical laboratory paractice［J］．LABMEDICINE，2006，37（8）：478-480．

［3］丛玉隆，张海鹏，任珍群．血液学检验分析前质量控制的重要因素——标本的采取及其控制［J］．中华医学检验，1998，1（21）：52-55．

［4］Giuseppe Lippi，Gian Luca Salvagno，Martina Montagnana，et al．Evaluation of Different Mixing Procedures for K2 EDTA Primary Samples on Hematological Testing［J］．LABMEDICINE，2007，38（12）：723-725．

［5］马新英．实验室分析前质量管理与控制中存在的问题［J］．国际检验医学杂志，2010，31（8）：885-886．

［6］Joshua L．Hood and Charles S．Eby．Evaluation of a Prolonged Prothrombin Time［J］．Clinical Chemistry，2008，54（4）：765-769．

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.06.057

：1672-2779（2014）-06-0093-02

张文娟 本文校对：欧锦霞

2013-12-04）