凝血测定中抗凝剂的应用

罗清华

凝血测定中抗凝剂的应用

罗清华

目的 探讨血液与抗凝剂不同比例及红细胞压积(Hct)的变化对测定凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响。方法 抽取25例体检健康者血液与抗凝剂9:1和5:1混匀，分离血浆后立即测定PT、APTT，另取PT、APTT、Hct均正常血液10份，每份模拟成Hct是10%～80%各系列标本，全血与抗凝剂9:1抗凝，混匀，分离血浆测定。结果 血液与抗凝剂比例缩小，PT、APTT时间延长(P＜0．01);Hct的变化对PT、APTT测定结果均有影响(P＜0．01)。结论 检测PT、APTT应严格把握抗凝剂比例，特别是Hct≥60%时。

凝血测定;抗凝剂;凝血酶原时间;活化部分凝血活酶时间

在凝血测定时所用标本均为抗凝剂与全血按1:9比例混匀的抗凝血，经分离血浆后进行检测，因为抗凝剂只对血浆起作用，准确的说，1:9指的是1份抗凝剂对9份红细胞压积正常血液中血浆总量而言，由于抗凝剂加入量不准和由于贫血或红细胞增多症，血浆量的变化引起抗凝剂的比例变化均可影响实验结果，因此抗凝剂的合理使用是凝血分析质量控制的重要环节，笔者对此进行了探讨，现报告如下。

1 对象与方法

1．1 对象 红细胞压积正常(Hct40%～50%)者25例，红细胞压积(Hct)、凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)三者均正常者10例。采血部位为肘前静脉，均抽血顺利。

1．2 方法 仪器与试剂:ACL200凝血仪及配套试剂，抗凝剂为ICSH和ICTH推荐使用的3．2%0．109 mol/L枸椽酸钠抗凝剂。操作方法:(1)取Hct正常的静脉血液25份，用枸椽酸钠抗凝剂与同一份血液按1:9、1:5配制成抗凝血，混合后，以4 000转/min离心15 min，测定PT和APTT。(2)取Hct、PT、APTT均正常的血液10份，根据计算模拟成Hct为10% ～80%各系列的标本，分别按抗凝剂与全血1:9抗凝，再测定它们的PT、APTT。

2 结果

2．1 正常压积下血液与抗凝剂不同比例混合，PT、APTT测定结果 抗凝剂比例增大可引起PT、APTT明显延长。经配对t检验，1:5比例抗凝剂较1:9比例抗凝结果差异有显著性(P ＜0．01)。见表1。

表1 抗凝剂与不同全血比例PT、APTT的测定结果(±s)

表1 抗凝剂与不同全血比例PT、APTT的测定结果(±s)

抗凝剂:全血 例数 PT(s) APTT(s) 1: 5 25 17．5±2．64 47．8±4．71 9 25 12．4±0．66 35．5±2．66 1:

2．2 不同Hct的枸椽酸钠抗凝血PT、APTT的测定结果 正常Hct者(Hct45%)的测定结果与各非正常Hct者结果均进行配对t检验，显示差异均有显著性(P＜0．01)。见表2。

表2 Hct枸椽酸钠抗凝血浆PT、APTT的影响(±s)

表2 Hct枸椽酸钠抗凝血浆PT、APTT的影响(±s)

Hct(10%) 例数 PT(s) APTT(s) 10 10 12．06±0．65 29．94±2．19 20 10 12．24±0．67 31．93±2．47 30 10 12．54±0．73 33．74±2．47 45 10 12．65±0．79 35．03±2．72 60 10 14．80±1．08 40．02±3．05 70 10 17．75±1．48 46．82±3．73 80 10 51．43±7．91 90．75±16．69

3 讨论

凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)是临床上的常规检测项目。PT测定是一种外源性凝血系统的过筛实验，综合反映血浆中凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ活性。APTT实验是较敏感的初筛内源性凝血系统凝血缺陷的常规方法［1］。

在目前的日常工作中，特别是已经使用真空采血管采血的医院，加入抗凝剂的量是固定的，但当抽血量过多或过少时，加入的抗凝剂量没进行相应的调整而造成抗凝剂量相对过少或过多。从表1的结果中可以知道抗凝剂量的改变，对实验结果有影响，特别是抗凝剂增多可使PT、APTT结果明显延长。这样的标本，特别是血量严重偏少时应重新采样。

从表2的结果中可以看出，Hct的多少也会直接影响实验结果，特别是当Hct≥60%时，不仅与Hct正常的结果差异有显著性(P＜0．01)，而且超出了正常参考范围(PT11s～14s，APTT30s～40s)。因为准确的1:9是指1份抗凝剂对9份红细胞压积正常血液中血浆总量而言，Hct的变化间接引起了抗凝剂的过多或过少。在实际工作中，经常会遇到贫血或红细胞增多症引起Hct增减的标本，测定了患者Hct后，可用公式:抗凝剂用量(ml)=0．185×血量×(1-患者红细胞压积)计算后调整抗凝剂量再进行PT、APTT的测定。但根据表2的结论，Hct＜40%时虽与Hct正常的结果差异有显著性，但并未超出正常的参考范围，对这样的标本，只在必要时重新采样即可［2］。

综上分析，掌握好抗凝剂的量在凝血实验中的应用，对实验结果的准确性、可靠性有很大意义，可为临床诊断及治疗提供更准确的辅助检查依据。

［1］ 李绵绵，陈小剑，江明华．不同抗凝剂浓度对TEST1全自动血沉仪测定血沉结果的影响［J］．江西医学检验，2007，25(3):282．

［2］ 吴 凯，熊建辉，赵 健．不同抗凝剂浓度对血细胞分析仪测定结果的影响［J］．实用医技杂志，2005，12(8B):2197．

10．14126/j．cnki．1008-7044．2015．06．032

R446．11

A

1008-7044(2015)06-0574-02

江西省丰城矿务局总医院检验科，331141

罗清华(1974-)，男，江西丰城市人，主管检验师，大学。

2015-05-04)