血清趋化因子受体CCR5和CXCR3与胎膜早破并发绒毛膜羊膜炎的关系

樊柳宜

广东省佛山市顺德区桂洲医院产科，广东佛山 528305

PROM是产科常见的并发症，是指发生于临产前的胎膜自然破裂，可引起CAM，脐带脱垂、羊水过少，胎盘早剥，早产、新生儿感染，增加孕产妇及围生儿的感染率和病死率。从50年代起，研究人员已开始重视和探索PROM发病原因，但至今并不十分明确，现在公认重要发病因素是感染，而在近年研究中，已关注到了PROM中炎性因子所起的作用，CK受体对炎细胞在炎症活动中的趋化及聚集到有炎症的地方发挥着较关键作用。在PROM中，CCR5和CXCR3可能会有表达量的改变。本研究以孕妇血清中游离CCR5和CXCR3为检测指标，拟探讨其与PROM-CAM的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年7月—2013年7月在本院产科住院分娩的PROM时间不超过24h孕妇72例（实验组），平均年龄（28.12±4.27）岁，孕周（38.39±1.22）周，根据产后最终胎盘、胎膜病理检查结果再分为PROM-CAM组（实验组1）38例、PROM无并发CAM组（实验组 2）34 例。再按破膜不同时间分为 0～6、6～12、12～24h 组。选取同期正常足月孕妇 40例（对照组），平均年龄（27.03±3.88）岁，孕周（39.21±2.06）周，两组孕妇均为单活胎头位、足月妊娠（37～41+6周）、无全身性或下殖道感染症状、无产科其它并发症，无内外科疾病，分娩方式不限，未使用过抗生素，对照组的病检均无CAM。统计两组人员的年龄和孕周平均值和标准差，差异无统计学意义。

1.2 方法

所有孕妇在使用抗生素之前、分娩前以干燥管抽取外周血静脉血3～4 mL（不加抗凝剂），3000 r/mim离心10 mim后取血清，置-20℃冰箱保存备用。采用ELISA检测血清中的CCR5、CXCR3水平。按ELISA试剂盒要求进行操作。胎盘病理学检查：胎盘娩出后于胎膜破口边缘取胎盘及胎膜取约 2 cm×2 cm做组织学标本，甲醛固定，送病理科常规石蜡包埋切片，HE染色，由专人阅片。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 实验组和对照组的CCR5、CXCR3水平比较

PROM-CAM组 (实验组1)CCR5、CXCR3表达水平明显高于PROM无CAM组（实验组2）及对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05），PROM 无 CAM 组（实验组 2）CCR5、CXCR3 表达水平虽高于对照组，但差异不具有统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 实验组和对照组的CCR5、CXCR3水平比较（±s）

表1 实验组和对照组的CCR5、CXCR3水平比较（±s）

注：实验组1与实验组2、对照组比较P＜0.05，实验组2与对照组比较P＞0.05。

组别例数CCR5 CXCR3实验组1实验组2对照组38344042.92±10.4521.45±6.8617.20±7.1934.66±12.3816.91±8.6512.32±9.61

2.2 PROM时间与CCR5、CXCR3水平变化关系

破膜时间＞12 h血清中CCR5、CXCR3表达水平高于破膜时间不足12 h的两组，差异具有统计学意义（P＜0.05），破膜时间不足12 h的两组间的CCR5、CXCR3水平，差异不具有统计学意义结论（P＞0.05）见表 2。

表2 PROM 时间与 CCR5、CXCR3水平变化关系（±s）

表2 PROM 时间与 CCR5、CXCR3水平变化关系（±s）

注：＞12 h 组与 6～12、0～6 h 时组比较 P＜0.05，6～12 h 组与 0～6 h 时组比较 P＞0.05。

组别例数CCR5 CXCR3＞12 h 6～12h 0～6hh 30241841.36±14.7124.79±9.8519.06±7.7833.42±11.1915.22±5.5213.28±8.59

3 讨论

完整的胎膜，使羊膜腔内保持着适量的羊水，防止了阴道的上行性感染，引起PROM病因很多。越来越多的资料证实羊膜腔感染与PROM密切相关[1]。破膜时间的长短与羊膜腔感染的严重程度有关，病原体通过宫颈口感染胎膜，也可经血行播散至子宫、胎盘、羊水及胎膜。微生物产生的蛋白水解酶或者感染部位的血管渗出、白细胞浸润水肿等，胎膜张力更为低下，从而引起PROM[2]。

但是在早期的羊膜腔感染的孕妇中，绝大多数无临床表现，因此在产前早期快速检测出亚临床感染的PROM孕妇，并给予及时治疗，可以降低围产期孕妇发病率和死亡率。这就需要有相应的指标来进行监测，可有利于早期诊断改善妊娠结局。

现在PROM的发病与Thl／Th2失衡可能有关的观点越来越得到了研究人员的认可。羊膜绒毛膜炎是PROM的一个重要发病因素，羊膜绒毛膜炎胎膜组织内的主要炎细胞为中性粒细胞及单个核细胞[3]。中性粒细胞可以产生Thl化学CK受体配体干扰素，诱导T细胞到胎膜组织中，在胎膜中T细胞再次释放干扰素等进一步诱导T细胞到胎膜组织中从而形成正反馈，促进Thl免疫炎症。Th2细胞可以发挥抗炎作用是负反馈机制中抑制Thl细胞介导的免疫反应，控制Thl细胞引发的组织损伤。机体中对抗细菌、病毒羊膜绒毛膜炎与Thl、Th2细胞因子之间平衡偏移结果相关。在PROM时胎膜组织存在炎性破坏过度和修复不足，呈现Th1免疫炎症。

CK是有趋化作用的细胞因子，是一类在淋巴细胞募集过程中发挥趋化和激活作用的蛋白质超家族，相对分子质量8000～12000，分为CXC、CC、C、CX3C四个亚家族。CK受体是一类介导CK行使功能、与G蛋白相偶联并具有7次跨膜结构的受体，它的表达是CK发挥作用的一个重要决定因素[4]。CK及其受体在T细胞活化和Th1／Th2介导的免疫应答中也起了重要作用。CK对CD4+T细胞亚群有选择作用。Th1和Th2细胞表面表达不同种类的CK受体，并对不同的CK产生反应，如Th1细胞活化后主要表达CK受体CCR5和 CXCR3，Th2细胞活化后主要表达CCR3、CCR4和CCR8。因此，CK受体可以作为Th1和Th2细胞的表面标志[5]。CCR5和CXCR3与Th1细胞亚群关系密切，其表达量改变，可能是PROM的重要影响因素。

本研究结果显示：PROM-CAM组CCR5、CXCR3水平明显高于PROM无CAM组及对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05），PROM无CAM组CCR5、CXCR3水平虽高于正常对照组，但差异不具有统计学意义 （P＞0.05）,破膜时间＞12 h血清中CCR5、CXCR3水平高于破膜时间不足12 h的两组，差异具有统计学意义（P＜0.05），破膜时间不足 12 h 的两组间的 CCR5、CXCR3 水平，差异不具有统计学意义（P＞0.05）。

通过本研究，提示孕妇血清中CK受体CCR5、CXCR3与PROMCAM之间密切相关，CCR5、CXCR3表达水平的检测可作为一种指标用于PROM-CAM的早期诊断，尤其是亚临床感染的孕妇，节约诊治时间，减少围产期产妇和围生期新生儿的各种不良合并症。这一结果也利于深入探讨CK受体拮抗剂在PROM治疗中的可行性，为探索PROM的治疗新途径提供理论依据。

[1]Briery CM,Veillon E W,Klauser C K,et al.Women with preterm premature rupture of the membranes do not benefit from weekly progesterone[J].American journal of obstetrics and gynecology,2011,204(1):54.e1-54.e5.

[2]吕发辉.胎膜早破并发绒毛膜羊膜炎的诊断进展[J].医学综述,2013,19(2):294-297.

[3]Kim C J,Romero R,Kusanovic J P,et al.The frequency,clinical significance,and pathological features of chronic chorioamnionitis:a lesion associated with spontaneous preterm birth[J].Modern Pathology,2010,23(7):1000-1011.

[4]Popowski T,Goffinet F,Maillard F,et al.Maternal markers for detecting early-onset neonatal infection and chorioamnionitis in cases of premature rupture of membranes at or after 34 weeks of gestation:a two-center prospective study[J].BMC pregnancy and childbirth,2011,11(1):26.

[5]Xie A L,DI X D,Chen X M,et al.Factors and neonatal outcomes associated with histologic chorioamnionitis after premature rupture of membranes in the preterms[J].Zhonghua fu chan ke za zhi,2012,47(2):105.