结直肠癌淋巴微转移的判定及相关因素分析

2014-01-20韦皓棠董保国王佳雷

现代消化及介入诊疗 2014年5期

韦皓棠李霖董保国王佳雷

结直肠癌淋巴微转移的判定及相关因素分析

韦皓棠李霖董保国王佳雷

目的探讨结直肠癌患者淋巴结微转移灶的特点及与临床病理参数间的关系遥方法收集2010年1月至2014年1月我院收治的65名结直肠癌患者的临床资料袁对其淋巴结进行免疫组化检测袁分析微转移灶与临床病理特征间的相关性遥结果对65例结直肠癌患者的624枚淋巴结进行了CK19及CEA免疫组化染色遥结果显示院淋巴结阳性表达率为21.79%(136/624)袁52.31%(34/65)的患者淋巴结呈阳性表达曰CK19阳性表达率为15.54%(97/624)袁46.15%(30/65)的患者淋巴结染色为阳性曰CEA阳性表达率为20.19%(126/ 624)袁47.69%(31/65)的患者淋巴结染色为阳性遥淋巴结CK19及CEA阳性表达与肿瘤大小相关(P<0.05)袁而与年龄、性别、肿瘤部位、TNM分期、分化程度及有无血管浸润无显著相关性(P>0.05)遥结论免疫组化方法是检测结直肠癌微转移的有效手段袁结直肠癌的微转移的发生与有无淋巴结浸润及肿瘤大小相关。

结直肠癌曰微转移曰淋巴结转移曰细胞角蛋白曰癌胚抗—

结直肠癌是一种临床常见的消化系统恶性肿瘤袁发病率位列第三袁仅次于肺癌和乳腺癌袁且近年来呈上升趋势遥淋巴结转移是评定肿瘤分期和制定治疗方案的主要参考指标袁也是影响结直肠癌预后的重要因素[1]遥结直肠癌的治疗一般采用局部—发灶的手术切除遥但术后仍有20%~45%的患者复发袁提示结直肠癌患者在术前已存在淋巴结微转移(mi—crometastasis,MCM)遥目前临床上判断局部淋巴结转移的方法主要是病理组织学检查遥但MCM的出现并不等于临床病灶的形成袁因此微转移时虽存在少量肿瘤细胞转移但通过病理组织学观察并不能够发现[2]遥这些隐匿性的转移灶可通过免疫组织化学检测细胞角蛋白19(CK 19)和癌胚抗—(CEA)等被发现遥本文通过对65例无淋巴结转移的结直肠癌患者淋巴结进行检测袁对其临床病理意义进行分析袁现报告如下。

资料与方法

一、临床资料

收集2010年1月至2014年1月我院收治的65名结直肠癌患者的临床资料袁所有患者匀实施根治性切除术袁术前未进行放疗、化疗并排除有其他脏器肿瘤遥男性36例袁女性29例袁平均年龄(61.13依7.45)岁遥其中结肠癌27例袁直肠癌38例曰高分化癌48例袁低分化癌17例遥共获取淋巴结624枚。

二、方法

将65例结直肠癌患者的淋巴结蜡块进行连续切片6张袁厚度为4m袁其中1张进行HE染色袁其余5张进行CEA、CK19免疫组化检测遥由两位病理医师复检淋巴结HE染色片袁如发现转移袁则排除在研究之外遥免疫组化检测采用SP法袁用柠檬酸盐对切片进行抗—修复袁依次进行过氧化氢孵育、水洗、非免疫血清孵育袁滴加CEA兔单克隆抗体和CK 19单克隆抗体孵育过夜袁使用SP试剂盒(美国Zymed公司提供)袁严格按照试剂盒说明进行操作遥以CEA、CK19阳性的结直肠癌组织作为阳性对照袁PBS替代一抗作为阴性对照遥由两位病理医师判断结果。

三、统计学分析

采用SPSS20.0统计软件进行分析袁计数资料间比较采用字2检验袁检验水准琢=0.05。

结果

一、免疫组化检测结果

65例结直肠癌患者共计624枚淋巴结HE染色结果均为阴性遥免疫组化染色结果显示院CK19染色后袁淋巴结阳性表达率为15.54%(97/624)袁患者微转移发生率为46.15%(30/ 65)曰CEA染色后袁淋巴结阳性表达率为20.19%(126/624)袁患者微转移发生率为47.69%(31/65)曰两项联合检测淋巴结阳性表达率为28.5%(178/624)袁患者微转移发生率为72.3%(47/65)遥见图1、2。

图1 CEA染色结果

图2 CK19染色结果

二、临床病理特征与微转移的关系

淋巴结阳性表达与肿瘤大小相关(P<0.05)袁而与年龄、性别、肿瘤部位、TNM分期、分化程度及有无血管浸润无显著相关性(P>0.05)袁见表1。

表1 临床病理因素与微转移的关系

讨论

结直肠癌微转移被认为是一个独立的预后指标袁对于临床分期的判断、手术方式及手术范围的确定、个体辅助化疗方案的制定起着重要的作用[3]遥目前将肿瘤微转移的概念定义为院非血液系统的恶性肿瘤在病情进展过程中播散于淋巴系统、血循环、肝、骨髓、肺等组织中的微小病灶袁常为单个转移肿瘤细胞或细胞团袁直径<2mm袁无特殊血供袁常无任何临床表现袁可以逃脱免疫监视袁发展成为肉眼可见病变袁通过常规的HE染色检测难以检出[4]遥肿瘤微转移常导致临床分期判定错误并影响治疗袁因此近年来出现大量关于结直肠癌淋巴结MCM检测方法的研究袁如免疫组化法、放射免疫检查、核酸杂交法、细胞化学技术、流式细胞技术等袁最终确定免疫组化法简单易行、且检测灵敏度高袁是目前临床研究结直肠癌MCM的主要检测手段[5]。

目前袁大肠癌标志物以k-ras、CEA、p53基因、CD44的研究为多袁这些肿瘤标志物各有优缺点[6]遥CEA是一种胚胎性抗—袁可作为多种肿瘤的广谱标志物袁在消化道恶性肿瘤、肺癌、及乳腺癌等患者的血清中可高表达袁因此敏感性较低袁在检测中常常需要和其他肿瘤标志物联合应用[7]遥细胞角蛋白(CK)是细胞骨架的组分之一袁在细胞转化过程中能保持其亚微结构和免疫性袁在肿瘤发生过程中仍保持其标记特性袁因此也用作肿瘤的特异性检测[8]遥本文65例结直肠癌患者的624枚淋巴结HE染色结果均为阴性袁但CK19及CEA免疫组化染色结果显示分别有15.54%及20.19%的淋巴结为阳性袁而CK 19及CEA联合检测淋巴结的阳性反应可达28.5%袁提示免疫组化法是检测结直肠癌淋巴结微转移较为敏感的手段之一。

关于微转移的发生与肿瘤的分化程度、组织学类型、临床病理参数是否相关袁目前的研究结果并不一致遥本研究发现淋巴结阳性表达与肿瘤大小相关袁而与年龄、性别、肿瘤部位、TNM分期、分化程度及有无血管浸润无显著相关性袁而肿瘤大小是决定微转移发生的重要因素袁同时也决定了患者的预后遥研究发现处于临床早期的结直肠癌患者中也可检出微转移袁提示肿瘤细胞始终处于生物活性期袁在疾病早期就可发生侵袭、扩散和转移[9]遥随着肿瘤的生长袁浸润程度逐渐增强袁肿瘤细胞淋巴扩散加剧袁发生微转移的可能性加大遥虽然有研究表明在结直肠癌肠旁淋巴结多存在微转移灶袁但是对于结直肠癌区域淋巴结的微转移灶的分布并未明确袁在对淋巴结的解剖位置进行分组后发现袁不同部位的淋巴结微转移发生率并没有明显差异遥由于微转移灶癌细胞具有进一步发展形成癌巢的可能性袁因此即使未发现明确的淋巴结转移迹象袁在手术时也要对这些淋巴结常规进行预防性切除[10]遥研究中未发现肿瘤微转移与肿瘤分化程度、部位及病理分期之间有显著的关系袁不排除本研究病例数较少袁结果存在偏差的可能性袁有扩大样本实验进一步研究的必要性。

综上所述袁免疫组化方法是检测结直肠癌微转移的有效手段袁结直肠癌的微转移的发生与有无淋巴结浸润及肿瘤大小相关袁据此为结直肠癌患者的临床诊治提供参考依据。

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3周慧俊,殷先利,刘振洋,等.mFOLFOX6方案与CapeOX方案治疗老年转移性结直肠癌临床疗效分析.实用临床医药杂志,2013, 17(13):33-36.

4李俊,张剑锋,董淑晓,等.直肠癌根治术后复发转移特点及危险因素分析.癌症进展,2013,11(6):576-586.

5冉文华,王子卫.结直肠癌肝转移转化治疗研究进展.重庆医学, 2013,18(9):1069-1072.

6王碧玉,庄晓泉,黄芳,等.结直肠癌术后腹腔引流液CEA、CA125、CA19-9的检测与肿瘤淋巴转移的相关性分析.海南医学,2013,16(8):1154-1156.

7谢汀江.结直肠癌伴不可切除的同时性肝转移的腹腔镜治疗[D].山东大学,2013.

8高春芳,范乃军,王秀丽,等.应用SELDI-TOF-MS技术初步建立结直肠癌区域淋巴转移分类树模型.解放军医学杂志,2010,4 (2):121-125.

9孙立辉,王大巍,樊毅.联合检测外周血及腹水中CK 20水平对结直肠癌微转移的意义.辽宁医学院学报,2014,35(4):30-32.

10贺更生,丁成明,韩东,等.结直肠癌中VEGF-C和EphA 2的表达与淋巴转移的关系.南华大学学报(医学版),2010,3(2):214-218.

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