青枣核果木枝叶乙酸乙酯段脂溶性成分GC-MS 分析

孙玉婉，蔡雯雯，应娉婵，何沂飞，刘平怀

海南大学材料与化工学院，海口 570228

核果木属(Drypetes)植物约有200 种，属于大戟科(Euphorbiaceae)叶下珠亚科(Phyllanth oideae Ascherson)核果木族［Drypeteae (Pax et Hoffm.)Hurusawa］，广泛分布于亚洲、美洲和非洲中西部等热带、亚热带地区。在非洲民间，核果木作为传统药材的来源，主要用于治疗淋病、牙痛、痢疾、肿瘤、黑热病等［1，2］，同时还具有抗氧化、抗衰老、抗炎等功效［3，4］。

青枣核果木［Drypetes cumingii (Baill.)Pax et Hoffm］主要分布于海南、广东、广西、云南等地。本文以青枣核果木为材料结合硅胶柱层析法对其枝叶的乙酸乙酯部位脂溶性提取物进行成分分离，利用GC-MS 技术进行分析与鉴定，通过其所得的质谱图解析确定乙酸乙酯段提取物的各个化学成分，为之后的进一步研究与开发利用提供一定的科学根据。

1 实验部分

1.1 实验仪器与试剂

RE-52AA 旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);GC7890A/MSD5975C 毛细管气相色谱-质谱联用仪(美国Agilent Technologies 公司);BT224S 电子天平(德国Sartorious 公司);KQ-250DE 型医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器公司);中药粉碎机(上海淀久中药机械制造有限公司);色谱硅胶(均为青岛海洋化工厂产品)。

乙酸乙酯、乙醇、石油醚、正丁醇等(分析纯，广州化学试剂厂)。

1.2 原材料

2012年4 月，采自于海南省霸王岭国家级自然保护区，经中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所冯锦东研究员鉴定，并将其制成标本为青枣核果木枝叶，存放于海南优势资源化工材料应用技术教育部重点实验，采后自然晒干，贮存备用。

1.3 实验方法

1.3.1 样品制备

将青枣核果木枝叶自然风干，粉碎后称量19 kg，用95%乙醇在室温下浸泡提取3 次，合并提取液后减压浓缩得到无醇味浸膏1248 g。将其分散于水中制成悬浊液，依次经石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇依次萃取后减压浓缩得到石油醚墨绿色油状萃取物130.9 g，乙酸乙酯萃取物177.0 g，正丁醇萃取物327.53 g。取乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，干法上样，氯仿、氯仿-甲醇梯度洗脱，TLC 检测合并浓缩相同流份，得到的成分中有两个脂溶性成分为脂溶性提取物1 和脂溶性提取物2。

1.3.2 GC-MS 分析条件

气相色谱条件:石英毛细管柱HP-FFAP(30 mm× 0.25 mm，0.2 μm)，程序升温:从80 ℃开始，持续3 min 后，以6 ℃/min 升温到150 ℃，再以80 ℃/min 升温到250 ℃，保持5min，载气为He，柱流量1.0 mL/min，进样口温度250 ℃，分流比为80 ∶1。质谱条件:EI 源，电离电压:70 eV，离子源温度230℃，扫描范围10～550 aum，进样量1.0 μL。

2 结果与讨论

利用GC-MS 分析技术在上述实验条件下进行操作，得到提取物I 与II 的GC-MS 总离子流图，再对总离子流图中的各峰通过质谱扫描后得质谱图，经计算机用NIST98 标准图库检索，人工谱图解析，并查对有关质谱资料［5，6］，从图谱的基峰、质荷比和相对丰度等方面进行直观比较、分析和鉴定，确定了脂溶性提取物1 中15 种化学成分和提取物2 中的32 种化学成分，并利用面积归一法确定各个成分的相对含量，其结果见下表1 和表2。

表1 青枣核果木枝叶乙酸乙酯提取物I 成分分析Table 1 Chemical constituents of ethyl acetate extract I of D.cumingii leaves and stems

由表1 可以看得出:提取物1 中分离鉴定所得的15 种化学成分占总峰面积的98.95%，其中主要成分有角鲨烯(30.34%)、油酸乙酯(16.58%)、棕榈酸乙酯(16.27%)、9，12-十八碳二烯酸乙酯(16.08%)。

提取物1 中所鉴定成分多数为酯类化合物，占总峰面积61.54%;少数为脂肪烃类化合物2 种，占4.73%、酸类化合物2 种，占2.34%、以及仅有的一种萜类化合物—角鲨烯，占30.34%。

表2 青枣核果木枝叶乙酸乙酯提取物II 成分分析Table 2 Chemical constituents of ethyl acetate extract II of D.cumingii leaves and stems

由表2 可以看出:提取物2 经分离、鉴定得到了其中的32 个化学成分，占色谱总峰面积的76.22%，其主要成分有橙花叔醇(6.06%)、1，2-苯二羟酸-2-基己基酯(5.87%)、角鲨烯(5.77%)、4，8，12，16-四甲基十五碳-4-内酯(4.12%)、1，5-庚二烯，3，4-二甲基-(3.87%)、雌舞毒蛾引诱剂(3.71%)。

提取物2 的鉴定成分中含有萜类化合物6 种，占总峰面积19.72%;酯类化合物5 种，占16.58%;脂肪烃与芳香烃类化合物7 种，占14.18%;醇类化合物酸类物质7 种，占峰面积的10.74%;其余少数成分分别是酚类、酮类、酸类与酰胺类化合物。

3 结论

提取物1 与2 中共同含有成分较多的角鲨烯物质是种开链三萜类化合物，具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性，从而起到抗疲劳作用，同时还具有渗透、扩散、杀菌的能力，另外它还可以增强机体免疫能力、抗肿瘤、抗癌等多种生理功能［7，8］，是一种重要的生物活性物质。

其中提取物1 中主要成分是酯类物质，含量最高的油酸乙酯，可用于表面活性剂和其他有机化学品的制备，也可用作香料。提取物2 中成分种类多，其中萜类化合物含量最大，以橙花叔醇比重最多，其可作为配制玫瑰型、紫丁香型等香精的成分［9］，为化妆品和食品工业不可缺少的原料，因此对其研究具有重要意义。除此之外提取物2 中还含有一种生物信息素—雌舞毒蛾引诱剂，用于预测预报及捕杀成虫［10］。

之前对青枣核果木枝叶石油醚部位脂溶性成分的分析也显示含有大量的角鲨烯，并且同课题组已研究过海南核果木具有较强的抗氧活性［4］。因此初步表明青枣核果木枝叶乙酸乙酯部位提取物中富含多种重要功能性物质，对其在医药、食品、化妆品等领域上具有一定的研究价值。

1 Dalziel MJ.The Useful Plants of West Tropical Africa.London:The Crown Agents for the Colonies，1937.140-141.

2 Irvine FR.Woody Plants of Ghana.London:Oxford University Press，1961.223-226.

3 Walker AR，Sillans R，Trochain JL.Les Plantes utiles du Gabon Ed.Paris:Paul Lechevalier 12-Rue de Tounron，1961.165-166.

4 Chen DL(陈德力)，Xiao M(肖曼)，Liu PH(刘平怀).Antioxidant activity of extracts from Drypetes Hainanensis Merr.Fine Chem(精细化工)，2011，28:1103-1106.

5 Han ZH(韩志慧)，Cao WH(曹文豪)，Li XB(李新宝).Analysis of chemical composition of essential oil in Cornus officinalis sieb.et Zucc by GC-MS.Fine Chem(精细化工)，2006，2:130-132.

6 Zhou B(周波)，Zhou J(周静).GC-MS Study on volatile oil composition of Glycosmis citrfolia (Willd1)Lindl.J Chin Med Mater(中药材)，2004，27:640-645.

7 Guan B(官波)，Zheng WC(郑文诚).The extraction，purification and application of squalene.Cereals ＆ Oils (粮食与油脂)，2010，2:44-46.

8 Dai YH(戴宇航).Research on technology of separation and purification of squalene from Olive Oil.Tianjin:Tianjin university(天津大学)，2009.1.

9 Guo T(郭腾)，Wu ZW(吴震纬)，Shen XT(沈晓婷).Analysis of the constituents of the volatile oil from the Leaf of Lindera Glauca(Sieb·et Zucc·)BL·from Zhejiang.Strait Pharmaceutical J(海峡药学)，2011，6:46-48.

10 Hu CX(胡春祥).Research progress of the biological control for Lymantria dispar.L.J Northeast Forestry Univ(东北林业大学学报)，2002，4:40-43.