4种中成药对左氧氟沙星吸收及抗菌作用的影响

2013-12-23田恩圣淄博市食品药品检验所山东淄博255086

中国医院药学杂志 2013年18期

田恩圣（淄博市食品药品检验所，山东淄博255086）

感冒是一种常见、多发病，是由多种病毒或细菌引起的疾病，以上呼吸道感染最为常见，俗称“伤风”，感冒在临床上又分为普通感冒与流行性感冒。对感冒的治疗以对症治疗为主，中药对缩短感冒发病周期、缓解感冒症状具有较好的作用，特别是许多中成药，已经成为诸多家庭的必备药品。临床上，单纯病毒引发的感冒最为普遍，无需应用抗生素治疗，但日常生活中用抗生素进行治疗或预防细菌感染还是较为普遍［1］。左氧氟沙星（LVFX）是喹诺酮类抗菌药物，其抗菌作用强，不良反应相对较小，经常和抗感冒药合用用于治疗感冒引发的心肌炎［2］、肺炎［3］、支气管炎等疾病，但合用以后的效果如何，特别是中成药复杂的药物成分是否影响LVFX 的生物活性，尚未见报道。本文选用常用的4种抗感冒中成药和LVFX 配伍，应用血清药理学的研究方法对两类药物的合用进行研究，现报道如下。

1 材料

1.1 动物 Wistar大鼠，雌雄各半，体质量200～220 g，由山东鲁抗医药股份有限公司提供，许可证号：SCXK（鲁）20080002。动物饲养于万级屏障环境，室温20～25 ℃，湿度40%～70%，日温差小于3 ℃，换气次数10～20 次／h，昼夜明暗交替时间12／12，动物置于有垫料的塑料盒具中，每盒5只，自由饮水，摄食。

1.2 药物与试剂 LVFX 胶囊（扬子江药业集团，批号12062641）；小柴胡颗粒（江西南昌桑海制药厂，批号100943）；板蓝根颗粒（广州白云山和记黄埔中药有限公司，批号F1K007）；羚翘解毒颗粒（北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，批号0114750）；银黄颗粒（云南金柯制药有限公司，批号20100830）；左氧氟沙星对照品（中国食品药品检定研究院，批号130455－201005）。

1.3 仪器高效液相色谱仪：Agilent200高效液相色谱仪；ZY－300IA 抗菌圈测定仪（北京先驱威锋技术开发公司）；电子天平（BT125D 北京赛多利斯仪器系统有限公司）

2 方法与结果

2.1 药物浓度检测条件与方法的建立［4］色谱柱：C18柱；流动相：醋酸钠高氯酸钠溶液（取醋酸铵4.0 g和高氯酸钠7.0g，加水1 300 mL 使溶解，用磷酸调节pH 值至2.2）－乙腈（85∶15）；检测波长：294 nm。对照品稀释液的配制：取LVFX 对照品5 mg，用0.1 mol·L－1HCl溶液10 mL 溶解，备用。进样量：10μL。在该色谱条件下，色谱图见图1。

图1 HPLC色谱图Fig 1 HPLC chromatogram

取对照品稀释液，用去蛋白大鼠血浆分别稀释成质量浓度为16，8，4，2，1μg·mL－1的系列标准品溶液，按以上方法进样。以LVFX 峰面积为纵坐标，LVFX 质量浓度C（μg·mL－1）为横坐标，进行线性回归。结果显示LVFX 在1～16μg·mL－1范围内线性关系良好，标准曲线方程为：Y ＝0.011 3 X＋0.096 1，r2＝0.999 9。去蛋白大鼠空白血浆对LVFX 色谱峰无干扰。

2.2 分组与给药 Wistar大鼠40只，随机分为5组，每组8 只，分别为LVFX 组（0.1 g·kg－1）、LVFX（0.1 g·kg－1）＋小柴胡颗粒组（7.5 g·kg－1）、LVFX（0.1 g·kg－1）＋板蓝根颗粒组（12.0g·kg－1）、LVFX（0.1 g·kg－1）＋羚翘解毒颗粒组（3.5 g·kg－1）、LVFX（0.1 g·kg－1）＋银黄颗粒组（2.0g·kg－1）。按给药剂量取LVFX 片，研细后与一定量的中药颗粒分别混匀，纯化水稀释到所需体积（给药体积为10 mL·kg－1），混匀。每天1次，连续灌胃给药5 d。

2.3 血药浓度检测［5］最后一次给药结束前12 h，所有大鼠禁食，自由饮水，给药结束后1 h，眶静脉取血，肝素抗凝，2 500 r·min－1，离心10 min，取血浆0.2 mL，加300 g·L－1三氯醋酸0.2 mL，12 000 r·min－1，离心5 min，取上清液20μL，进样，曲线下面积代入回归方程，计算各组大鼠LVFX 的血药浓度，结果见表1。

表1 不同中成药对大鼠血浆中LVFX 浓度的影响±s，n＝8）Tab 1 Effect of different proprietarg Chinese medicine on the content of LVFX in red plasma±s，n＝8）

注：与LVFX 组比较，aP＞0.05，b P＜0.01

组别给药剂量／g·kg－1血药浓度／μg·mL－1 LVFX 0.1 10.8±1.4 LVFX＋小柴胡颗粒 0.1＋7.5 7.07±0.27b LVFX＋板蓝根颗粒 0.1＋12.0 9.83±0.13a LVFX＋羚翘解毒颗粒 0.1＋3.5 9.9±1.8a LVFX＋银黄颗粒 0.1＋2.0 5.9±0.8 b

结果显示，LVFX 与小柴胡颗粒、银黄颗粒合用后，血药浓度显著下降（P＜0.01），板蓝根颗粒、羚翘解毒颗粒与LVFX 合用，LVFX 浓度与对照组相比，无显著改变（P＞0.05）。

2.4 血浆的抗菌作用

2.4.1 LVFX 抗菌作用平板方法的建立取LVFX 对照品16 mg至20 mL量瓶，加空白大鼠血浆溶解，配制成LVFX 质量浓度为80μg·mL－1的对照品溶液。用空白大鼠血浆逐次稀释，配制成LVFX 质量浓度为20，10，5，2.5，1.25μg·mL－1的系列标准品溶液。分别取不同质量浓度的对照品溶液0.3 mL，按中国药典2010年版抗生素微生物检定方法（管碟法）测定抗菌圈大小，菌种分别用金黄色葡萄球菌（88×106cfu·mL－1）和的大肠杆菌（74×105cfu·mL－1）。

分别取质量浓度为20，10，5，2.5，1.25μg·mL－1的系列标准品溶液，按“2.4.1”方法进行操作。以LVFX 质量浓度负对数为横坐标，抗菌圈直径为纵坐标，进行线性回归。结果显示LVFX 在1.25～20μg·mL－1范围内线性关系良好，标准曲线回归方程为：Y＝6.611 5 X＋12.495，r2＝0.984。

2.4.2 血浆对不同菌种的抑制作用取各组大鼠血浆0.3 mL，按中国药典2010年版抗生素微生物检定方法（管碟法）测定抗菌圈大小，比较LVFX 与不同中成药合用后，对LVFX 抗菌作用的影响，结果见表2。

表2 大鼠血浆对两种细菌的抑制作用±s，n＝8）Tab 2 Inhibitory effect of rat plasma on the two kinds of bacteria±s，n＝8）

注：与LVFX 组比较，aP＞0.05，b P＜0.01，c P＜0.05

组别给药剂量／g·kg抗菌圈大小／mm－1金黄色葡萄球菌大肠杆菌LVFX 0.1 19.2±0.9 20.6±1.0 LVFX＋小柴胡颗粒 0.1＋7.5 17.6±1.6c 20.2±0.7a LVFX＋板蓝根颗粒 0.1＋12.0 16.5±1.4b 20.3±1.0a LVFX＋羚翘解毒颗粒0.1＋3.5 19.6±1.6a 20.9±1.2a LVFX＋银黄颗粒 0.1＋2.0 14.9±1.5b 17.4±1.4 b

结果显示，LVFX 与银黄颗粒合用后，大鼠血浆对2种细菌的抗菌作用与对照组比显著下降（P＜0.01）；与小柴胡颗粒、板蓝根颗粒合用后，大鼠血浆对金葡菌的抗菌作用显著下降，对大肠杆菌的抗菌作用无显著改变；与羚翘解毒颗粒合用后，大鼠血浆的抗菌作用与对照组比无显著改变（P＞0.05）。

3 讨论

LVFX 与中成药一起服用，通过测定其血药浓度，能比较准确地反映中成药对LVFX 吸收情况的影响；LVFX 的性质相对稳定，为体外研究抗菌作用提供了可能，通过分离大鼠血浆，研究大鼠血浆对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌作用，能较为客观地反映LVFX 在体内的生物活性，从而了解中成药对LVFX 生物活性的影响。

随着中西医结合的不断发展，在临床上中西药合用的现象越来越普遍，中西药合用的配伍及相互作用的研究主要集中在理化方面的影响［6］，对生物活性的研究相对较少，为临床用药产生了较大的隐患。通过本实验证实，部分中成药确实影响了LVFX的抗菌作用，包括影响其吸收、抗菌作用等。而合用后是否会生成未知化合物，从而导致不良反应的发生，还需进一步的试验进行研究。西药对中成药药效研究的影响更为缺乏，需要大量的工作来考察和研究，为临床用药提供必要的参考和指导作用。

［1］王金彩，郑继海，杨海楠，等.左氧氟沙星的使用频度与常见细菌耐药相关性分析［J］.中国医院药学杂志，2013，33（12）：1010－1011.

［2］吴定苏，詹美伶，吴建放.感冒并发心肌炎治疗体会［J］.中国民族民间医药，2009，4：123.

［3］陈燕力，孙利红，赵洪杰.感冒合剂辅助治疗门诊社区获得性肺炎39例临床观察［J］.中医药导报，2012，6：37－38.

［4］中国药典.二部［S］.2010：652.

［5］付春梅，李章万，洪诤，等.反相高效液相色潽法测定盐酸左氧氟沙星的血药浓度［J］.药物分析杂志，2000，20（6）：373－375.

［6］程淑锋，郑林，林滔.中西药合用物理及化学性配伍禁忌分析［J］.中国实用医药，2011，6（7）：157.