学龄前原发性肾病综合征患儿淋巴细胞亚群测定

刘峻峰

周口市中心医院儿科 周口 466000

原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)是儿童时期常见的肾脏病,复发率高。患儿长期应用激素药物及后期加用免疫抑制剂，可出现代谢紊乱、免疫力低下、易感染、肾上腺皮质功能不全等副作用[1]，影响患儿的生长发育,特别是3～7岁的学龄前儿童。近年来PNS发生率有增加的趋势,且复发率较高[2]。作者分析了明确诊治的学龄前PNS患儿淋巴细胞亚群的改变，探讨学龄前PNS患儿细胞免疫功能的变化与激素治疗的敏感性和复发的关系，为及时选择合适的治疗方案提供依据。

1 临床资料

1.1一般资料选择2006年1月至2012年11月周口市中心医院儿科收治的3～7岁PNS患儿86例,均符合中华医学会儿科分会肾脏病学组的PNS诊断标准[3]。患儿除外继发性肾病综合征，且未接受糖皮质激素或免疫调节剂治疗，随访均超过1 a。其中男54例，女32例，年龄3～7(5.1±1.6)岁。选取同期儿科门诊20名正常健康体检儿童20例为正常对照组，其中男12例，女8例，年龄3～7(4.5±2.1)岁。

1.2观测指标分别采集对照组及PNS患儿治疗前清晨空腹静脉血2 mL送检淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞，NK细胞和B淋巴细胞)。应用Facs Culibur流式细胞仪(美国BD公司) 采用双色分析系统分析检测各亚群淋巴细胞的比例。记录1 a内足量泼尼松治疗后尿蛋白转阴时间及复发情况。

1.3疗效判断及复发标准

1.3.1 疗效判断[4-5]①激素敏感：以泼尼松足量[2 mg/(kg·d)或60 mg/(m2·d)]治疗≤4周，尿蛋白转阴。②激素耐药：以泼尼松足量治疗>4周尿蛋白仍阳性。

1.3.2 复发标准[1]①复发：连续3 d，晨尿蛋白由阴性转为(+++)或(++++)或24 h尿蛋白定量≥50 mg/kg或尿蛋白/肌酐≥2.0。②频复发：半年内复发≥2次，或1 a内复发≥3次。

1.4统计学处理应用SPSS 17.0进行分析，2组儿童外周血淋巴细胞亚群比例、PNS患儿激素敏感和激素耐药组外周血淋巴细胞亚群比例的比较采用两独立样本t检验，未复发、复发和频复发组外周血淋巴细胞亚群比例的比较采用单因素方差分析和SNK-q检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1PNS和正常对照组儿童外周血淋巴细胞亚群比例比较见表1。

表1 PNS和正常对照组儿童外周血淋巴细胞亚群比例比较 %

2.2激素敏感与激素耐药型学龄前PNS患儿外周血淋巴细胞亚群比例比较见表2。

表2 激素敏感与激素耐药型学龄前PNS患儿外周血淋巴细胞亚群比例比较 %

2.3未复发、复发和频复发的学龄前PNS患儿外周血淋巴细胞亚群比例比较见表3。

表3 未复发、复发、频复发学龄前PNS患儿外周血淋巴细胞亚群比例比较 %

*:与未复发组比较，P<0.05；△:与复发组比较，P<0.05。

3 讨论

PNS的病因目前尚不清楚, 林广裕等[6]提出PNS可能与T细胞功能异常, 从而分泌某些循环淋巴因子作为毒性物质损伤肾小球基底膜有关。淋巴细胞各亚群在正常机体内保持着一定的比例, 一旦比例失调, 体内免疫功能则发生紊乱, 将导致感染性或免疫性疾病的发生[7]。

T淋巴细胞各亚群的平衡是构成机体免疫系统的重要因素。体内免疫平衡是通过辅助性CD4+和抑制性CD8+T淋巴细胞形成的细胞网络来维持，2者的升高与降低均可导致机体免疫功能的异常或紊乱[8]。NK细胞是外周血第三类淋巴细胞，能比较准确地反映机体免疫活性细胞的功能状态,在机体免疫监视过程中发挥重要功能。机体免疫功能受到明显抑制时，NK细胞活性下降[9]。刘碧华等[10]报道PNS儿童T淋巴细胞亚群间存在失衡现象，给予激素、环磷酰胺或中药等治疗, 病情控制后, T淋巴细胞亚群之间的失衡明显改善, 而无效者T细胞亚群失衡也不能恢复。该研究发现学龄前期PNS患儿CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+及NK细胞较正常对照组儿童显著降低，提示PNS患儿在发病过程中存在T细胞免疫应答能力降低,与陆彪等[11]报道相一致。NK细胞亦明显出现紊乱，而B淋巴细胞与正常儿童比较无差异，与刘秀云等[12]的报道不一致。

该研究发现学龄前PNS患儿激素耐药组CD8+T淋巴细胞比例低于激素敏感组，CD4+/CD8+和NK细胞比例高于激素敏感组，提示CD8+T淋巴细胞明显受抑制的学龄前PNS患儿可能更容易出现激素耐药，NK细胞受抑制的PNS患儿可能对激素更敏感，这或许可以为临床中是否行肾穿刺活检术提供参考。学龄前PNS儿童随访1 a，复发与频复发组CD8+T淋巴细胞比例高于未复发组，而复发组与频复发组间无显著差别；NK细胞比例在复发和频复发组中较低。以上结果是否能说明CD8+T淋巴细胞受抑制明显的PNS患儿相对不易复发或者可以在PNS复发后首选能明显抑制CD8+T淋巴细胞、提高NK细胞的药物治疗，有待进一步研究。

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