脑胶质瘤组织中核干细胞因子的表达*

林爱琴，程 森，寿记新#，马 林，巫庆荣

1)郑州铁路职业技术学院护理学院 郑州 450052 2)郑州大学第五附属医院神经外科 郑州 450052 3)郑州大学医院 郑州 450052

胶质瘤亦称神经胶质细胞瘤，起源于神经上皮细胞，是一种常见的颅内恶性肿瘤,具有高发病率、高复发率、高死亡率及低治愈率的“三高一低”的特点。核干细胞因子(nucleostemin，NS)是一个细胞核内的鸟嘌呤核苷酸结合蛋白，定位于干细胞和肿瘤细胞的细胞核，参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控[1-3]。目前已有研究[4-5]显示，在多种癌组织中均有NS的高表达。作者观察了NS蛋白在脑胶质瘤组织中的表达情况，报道如下。

1 材料、方法与结果

1.1材料取郑州大学第五附属医院2009年6月至2011年6月手术切除的部分胶质瘤存档蜡块35例，其中男19例，女16例；年龄7～79岁，中位年龄42岁。按WHO 2000年分类和分级标准[3]：Ⅰ期3例，Ⅱ期9例，Ⅲ期19例，Ⅳ期4例。另取该院神经外科颅脑外伤行内减压术的11例患者的正常脑组织作对照，其中男6例，女5例；年龄12～68岁，中位年龄39岁。

1.2NS检测标本组织经生理盐水冲洗、固定、脱水处理，二甲苯透明，石蜡包埋，4～6 μm厚度连续切片。采用免疫组化染色方法检测NS蛋白。鼠抗羊IgG购自上海恒斐生物科技有限公司，即用型SABC免疫组化染色试剂盒购自上海联硕生物科技有限公司，操作严格按照说明书进行。一抗按100倍稀释。DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片，晾干后镜检。以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知NS蛋白阳性的结肠癌组织切片为阳性对照。

1.3结果判断标准NS蛋白阳性信号表现为胞核或胞质内棕黄色颗粒状着色。选取5个以上高倍(×400)视野，计数不少于200个细胞，根据染色程度及阳性细胞百分率进行评分。①按染色程度进行评分：无染色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。②按阳性细胞百分率进行评分：<30%为1分，30%～70%为2分，>70%为3分。取两项评分的乘积为最终评分，≤1分记为阴性，>1分记为阳性。

1.4 2组NS蛋白表达的比较见图1。正常脑组织及胶质瘤组织中NS蛋白阳性表达率分别为9.1%(1/11)、57.1%(20/35)，脑胶质瘤组织中NS蛋白阳性表达率高于正常脑组织(χ2=7.789，P=0.005)。

图1 NS蛋白的表达(SABC,×400)

1.5NS蛋白表达与脑胶质瘤临床病理分期的关系

Ⅰ、Ⅱ期脑胶质瘤组织中NS蛋白阳性表达率为25.0%(3/12)，Ⅲ、Ⅳ期为73.9%(17/23)，Ⅲ、Ⅳ期脑胶质瘤组织中NS蛋白阳性表达率高于Ⅰ、Ⅱ期(χ2=7.704，P=0.006)。

2 讨论

NS是一个细胞核内的鸟嘌呤核苷酸结合蛋白，以三磷酸鸟苷(guanosine triphosphate,GTP)依赖的形式穿梭于核仁和核质之间，这一动力学的穿梭过程调控细胞增殖[1-3]。 研究[6]表明干细胞和肿瘤细胞之间存在着许多相似的生物学特性。维持干细胞内环境稳定的关键是协调控制自我更新和保证分化，如果这种平衡被打破就易导致肿瘤的发生。目前已有研究[7]显示NS蛋白可能充当调控正常干细胞和癌细胞增殖的双面角色，肿瘤细胞和肿瘤组织中NS基因的高表达普遍存在。该研究证实：脑胶质瘤组织中NS蛋白的表达明显高于正常脑组织，且临床病理分期Ⅰ、Ⅱ期脑胶质瘤组织中NS蛋白的表达明显低于Ⅲ、Ⅳ期，提示NS不仅与脑胶质瘤的发生有关，还与其恶性程度(临床分期)密切相关。

总之，NS蛋白的表达与脑胶质瘤临床分期之间的相关性使其有可能成为脑胶质瘤的又一个靶向治疗基因，这为脑胶质瘤的临床治疗提供了一个新的研究方向。

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