脐带源间充质干细胞移植治疗难治性系统性红斑狼疮

夏宇欧 王宏

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病，临床表现千变万化［1］。特点是自身反应性T细胞和B存在，导致B细胞多克隆活化淋巴细胞，由此产生的自身抗体等细胞因子释放［2］。其中最具有临床特征的是狼疮性肾炎［3］。常规免疫抑制或免疫调节如糖皮质激素治疗，环磷酰胺(CYC)和霉酚酸酯(MMF)，可控制大部分疾病，但不是所有的患者狼疮性肾炎都有效。有一部分狼疮肾炎患者的疾病或者不敏感或复发。尽管不断进行化疗，其预后仍然不佳［4］。在过去的十年中，造血干细胞移植(HSCT)已被报告为一个充满希望治疗，可以达到长期缓解狼疮的目的，但复发率和毒性很高，因此，期待一种较新的治疗方法，比目前的方法更有效、更安全［5-7］。

1 资料与方法

1.1 一般资料 ①入选条件:＜60岁;所有入选患者符合对SLE风湿病学会标准11项中的至少4项。该合格标准包括狼疮活动指标。疾病常规治疗6个月无效;病情进展，脏器损害危及生命;移植后有可能改善生活质量;主要脏器功能可耐受移植。②排除条件:明确感染;不能控制的心律失常或心力衰竭;肺功能检查明显异常;肾脏明显缩小;肾皮质厚度＜0.8 cm;血肌酐＞442μmol/L。符合条件的病例2例，男、女各1例，均合并狼疮性肾炎Ⅳ型，这个协议经四平市中心医院伦理委员会批准，获得了患者的知情同意。③1例有狼疮性肾炎、浆膜炎、白细胞减少、关节炎。另一例有狼疮性肾炎、浆膜炎、血小板减少。狼疮活动性评分＞12分。

1.2 细胞来源 使用我院中心实验室提供的脐带间充质干细胞。

1.3 干细胞回输 输入前地塞米松5 mg静脉注射，生理盐水开路，接干细胞悬液，最后用生理盐水冲管。输入过程中应反复摇匀干细胞悬液，以免出现凝集，堵塞管路。

1.4 疗效观察 分别在移植前和移植后1，6，12个月对患者临床症状和体征的变化、体液及细胞免疫功能(CD3、CD4、CD8、CD19)、风湿谱(ANA)进行跟踪随访，定期检查血常规、尿常规、肾功能的变化。

2 结果

2.1 造血和免疫重建 2例患者分别在移植后6 d及7 d复查，白细胞最低点为3.2×109/L，血小板最低点为18×109/L，淋巴细胞最低点为0.02×109/L，血红蛋白最低点为96 g/L、移植过程中未输注红细胞、血小板。

2.2 移植相关并发症 移植过程中未出现明显的并发症，未出现发热、出血性膀胱炎、肝静脉闭塞综合征、巨细胞病毒感染等。

2.3 移植后临床症状变化 移植后2 d，患者的临床症状开始缓解，随访12个月，没有复发，均已分别恢复日常工作、学习。

2.4 移植前后有关实验室检查的改变 移植后6个月患者狼疮相关的抗体均逐渐转为阴性，补体C3、C4在移植后升高，尿蛋白逐步降低，随访12个月时患者补体C3均升至正常，24 h尿蛋白定量降至0.15 g以下。

表1 移植前、后有关实验室检查的改变

2.5 移植后免疫功能的变化 经移植治疗后，患者免疫功 能逐渐升高，尤以CD4、CD19最为显著，见表1。

表2 移植前、后免疫功能的变化(%)

3 讨论

系统性红斑狼疮是一种累及多器官、多系统，以免疫调节异常为特征的自身免疫性疾病。确切病因并不清楚，可能与遗传背景、环境因素、内分泌异常、免疫系统紊乱等多因素相关。目前治疗主要手段是依靠激素和免疫抑制剂等，但只能部分控制疾病活动，不能治愈，尤其对部分患者效果欠佳。

间充质干细胞是一类具有显著的自我更新和多向分化的细胞，主要存在于骨髓、脐血、脐带、全身结缔组织和器官间质［8］。脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells，UC-MSC)是目前临床研究和应用较多的间充质干细胞之一。它来源于脐带，易于获取，对产妇及新生儿均无伤害;且可在体外大量扩增，传代稳定;其细胞活性、增殖能力及数量均能得到保证，即质量、数量可控;不受伦理、道德及法律方面的争论与限制;相对纯净，与干细胞输注相关的病毒和病原微生物感染率远低于骨髓移植;人脐带MSCs不表达或低表达免疫排斥相关标记，免疫原性低，是一类低免疫原性细胞，不需经过严格配对使用，适宜于不同个体之间的移植。

造血干细胞移植治疗自身免疫病的原理有两方面，一是在预处理时，通过大剂量化疗或全身照射摧毁患者的异常免疫系统，对自身免疫病起缓解作用;二是移植的自体外周血干细胞重建正常的免疫系统。在免疫重建中阻断自身抗体的产生或诱导对自身抗原的免疫耐受，后者被认为是造血干细胞移植治疗SEE并使其长期缓解的原理。

非清髓的MSCs移植(MSCT)治疗自身免疫性疾病的机制可能是抑制潜在的免疫干扰，从根本上 改变免疫系统。调节性T细胞是由原始CD4T分化而来的细胞亚群。最近十年来，关于T细胞在控制免疫活性方面进行了大量研究。最近的研究证实，活动期SLE患者存在T细胞功能的不足，但可以恢复。糖皮质激素治疗诱发疾病缓解。在这项研究中，我们观察到脐带间充质干细胞能明显上调 CD4的百分比。

总之，我们提供直接的证据表明，脐带间充质干细胞移植对于重症难治性系统性红斑狼疮具有重要影响，至少在短期内是安全的，有效的。进一步的临床试验需要更多患者、长时间的随访，并与标准治疗比较，以确定这种新型的治疗方法的疗效和安全性。

［1］ Rahman A，Isenberg DA.Systemic lupus erythematosus.N Engl J Med，2008，358:929-39.

［2］ Hoffman RW.T cells in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus.Clin Immunol，2004，113:4-13.

［3］ Balow JE.Clinical presentation and monitoring of lupus nephritis.Lupus，2005，14:25-30.

［4］ Sanchez-Ramos J，Song S，Cardozo-Peleza F，et al.Adult bone marrow stromal cells differentiate into neural cells in vitro.Exp Neurol，2000，164:247-56.

［5］ Saulnier N，Lattanzi W，Puglisi MA，et al.Mesenchymal stromal cells multipotency and plasticity:induction toward the hepatic lineage.Eur Rev Med Pharmacol Sci，2009，13(1):71-78.

［6］ Fan L，Lin C，Zhuo S，et al.Transplantation with survivin-engineered mesenchymal stem cells results in better prognosis in a rat model of myocardial infarction.Eur J Heart Fail，2009，11:1023-1030.

［7］ Chun Qiao，Wen rong XU，et a.l Human mesenchymal stem cells isolated from the umbilical cord.Cell Biology Internationa，2008，32:8-15.

［8］ Caplan AL.Mesenchymal stem cells.Orthop Res，1991，9(5):641-650.