Kai1蛋白的表达与不同类型癌转移的相关性

张素素，郭瑞珍，边 可，汪秋鸿

(遵义医学院珠海校区1.2008级临床医疗系，2.病理学教研室,广东 珠海 519041)

Kai1蛋白的表达与不同类型癌转移的相关性

张素素1，郭瑞珍2，边 可1，汪秋鸿1

(遵义医学院珠海校区1.2008级临床医疗系，2.病理学教研室,广东 珠海 519041)

目的探讨Kai1蛋白与不同类型癌转移的相关性。方法采用免疫组织化学SP法分别检测35例皮肤基底细胞癌(BCC)、18例皮肤鳞状细胞癌(SCC)、46例乳腺癌和64例大肠癌组织中Kai1蛋白的表达；利用计算机图像分析系统采集、分析图像，并对数据进行统计学处理。结果①Kai1蛋白在皮肤BCC和SCC中的表达分别呈阳性和阴性或弱阳性， BCC组的表达显著高于SCC组(P﹤0.01)；②Kai1蛋白在没有淋巴结转移的乳腺癌、大肠癌中均呈阳性表达，而在有转移的乳腺癌、大肠癌中均呈弱阳性或阴性表达，无转移组的表达均显著高于有转移组，均有统计学意义(Plt;0.01)。结论①与SCC组比较，Kai1蛋白的高表达可能与BCC几乎不发生转移的生物学特性有关；②乳腺癌和大肠癌中Kai1蛋白的低表达，可能与转移有关。

癌；Kail；转移

1995年Dong等[1]在研究前列腺癌时首先发现Kail基因，该基因曾一度被认为是前列腺癌的特异性转移抑制基因。后有研究报道，Kai1的异常表达与多种肿瘤的转移有密切关系[2-3]，被认为是近年发现的新的肿瘤转移抑制基因，较多的研究认为Kail的低表达是肿瘤发生转移的指征，Kail表达水平与肿瘤转移潜能呈负相关[4]。本组通过检测Kai1蛋白在基底细胞癌(BCC)、鳞状细胞癌(SCC)、乳腺癌和大肠癌中的表达，探讨Kai1与不同来源肿瘤转移的相关性。

1 材料与方法

1.1 受检标本 收集遵义医学院第一附属医院和第五附属医院病理科2005年1月至2008年12月的外检石蜡包埋标本，连续4 μm厚切片，每例4张，备用。常规HE染色，光镜观察，确诊。所有病例术前均未经放、化疗。

1.1.1 皮肤BCC和SCC组 皮肤BCC组35例，平均年龄66岁；头面部30例，胸部2例，颈部、背部及腹部各1例。SCC组18例，平均年龄63岁；头面部10例，上肢、颈部、腹部各1例，下肢5例。

1.1.2 乳腺癌组 经手术切除，组织学确诊，分为有淋巴结转移和无淋巴结转移两组：有转移的18例中，平均年龄49岁，组织学类型包括有浸润性导管癌、导管内癌，临床表现同侧腋窝淋巴结肿大(1枚～数枚)。无转移的28例中，平均年龄49岁。组织学类型包括有浸润性导管癌、导管内癌、浸润性小叶癌。

1.1.3 大肠癌组 经手术切除，组织学确诊，分为有淋巴结转移和无淋巴结转移两组：有转移组22例，平均年龄56岁；直肠癌8例，结肠癌14例，临床手术见局部淋巴结或远隔淋巴结肿大。无淋巴结转移组42例，平均年龄63岁；直肠癌13例，结肠癌29例。组织学类型包括有乳头状腺癌、管状腺癌、黏液/印戒细胞癌。

1.2 试剂 多克隆抗体Kai1(兔抗人)、S-P免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒均购自武汉博士德公司。

1.3 免疫组化染色(SP法) 用前列腺增生组织作阳性对照，以PBS代替一抗为空白对照。切片经过脱蜡和微波抗原修复后，实验和操作按试剂盒说明书进行，经DAB显色，苏木素复染，透明，中性树胶封片。

1.4 结果判定 以肿瘤细胞胞质和胞膜出现棕黄色颗粒为Kai1蛋白阳性表达，阳性表达评分标准以阳性细胞数和染色强度记分的乘积来判定，以半定量标准平均灰度值表示定级标准。

2 结果

2.1 BCC和SCC组 Kai1蛋白在BCC组织中呈阳性或弱阳性表达， 在SCC组织中呈阴性或弱阳性表达，BCC组的表达均显著高于SCC组，差异有统计学意义(Plt;0.01)(见图1、表1)。

注： A:在基底细胞癌中的阳性表达；B:在鳞状细胞癌中的弱阳性表达。 图1 基底细胞癌和鳞状细胞癌中Kai1蛋白的表达(IHC×400)

2.2 乳腺癌组 Kai1蛋白在无淋巴结转移的乳腺癌组织中呈弱阳性或阳性表达，在有淋巴结转移乳腺癌组织中呈阴性或弱阳性表达。无淋巴结转移组的表达显著高于有淋巴结转移组，差异有统计学意义(Plt;0.01)(见图2、表1)。

注： A：在无淋巴结转移的乳腺癌中的阳性表达；B：在有淋巴结转移的乳腺癌中的阴性表达。 图2 无淋巴结转移和有淋巴结转移的乳腺癌中Kai1蛋白的表达(IHC ×400)

2.3 大肠癌组 Kai1蛋白在无淋巴结转移的大肠癌组织中呈弱阳性或阳性表达，在有淋巴结转移的大肠癌组织中呈阴性或弱阳性表达，前一组表达明显高于后一组，差异有统计学意义(Plt;0.01)(见图3、表1)。

注： A:在无淋巴结转移的大肠癌中的阳性表达；B:在有淋巴结转移的大肠癌中的阴性表达。 图3 无淋巴结转移和有淋巴结转移的大肠癌中Kai1蛋白的表达(IHC ×400)

组 别例数Kai1蛋白的表达PAODBCC组350．176±0．0730．30±0．026SCC组180．049±0．061∗0．19±0．043∗无转移乳腺癌组280．227±0．0590．287±0．031有转移乳腺癌组180．076±0．042#0．225±0．026#无转移大肠癌组420．225±0．0480．287±0．033有转移大肠癌组220．114±0．053∗∗0．226±0．015∗∗

注：PA代表阳性面积/分析区域面积；OD代表光密度；VS BCC 组比较，*Plt;0.01；VS无转移乳腺癌组比较，#Plt;0.01；VS无转移大肠癌组比较，**Plt;0.01。

3 讨论

Kail基因与皮肤肿瘤:同源于皮肤的BCC和SCC均是恶性肿瘤，但是，在生物学行为上两种肿瘤有着截然不同的表现，SCC浸润转移能力很强，而BCC却几乎不发生转移。本研究针对BCC和SCC两种肿瘤不同转移潜能的生物学行为进行对比性研究发现，BCC组Kai1蛋白的表达明显高于SCC组，差异有统计学意义(Plt;0.01)。这提示：BCC生长缓慢及极少转移的生物学特性可能与Kai1的高表达有关。反之，Kai1蛋白在SCC中的低表达可能与SCC转移易感性增强有关。也提示：在来源相同的不同转移潜能的肿瘤组织中，Kai1蛋白表达的强度不尽相同，Kai1表达强度影响肿瘤转移的能力。目前，Kai1基因与皮肤肿瘤在(黑色素瘤)浸润转移方面的作用有不同的结果，在鼠黑色素瘤的研究中认为Kail与转移抑制相关[5]，而在人黑色素瘤的研究中认为Kail与转移抑制无关[6]。不同的研究结果，可能与研究对象种属的不同有关，不同种属其基因所起的作用可能也有差异。

Kai1基因与乳腺癌和大肠癌:Kai1基因与乳腺癌的相关性研究在本世纪初由最初的对体外细胞系的研究，逐步进入对人乳腺癌的研究，研究结果都体现了Kai1蛋白在乳腺癌中发挥了肿瘤转移抑制功能。Kail基因与大肠癌的研究表明，Kail基因对多种消化道恶性肿瘤的转移存在不同程度的抑制作用，李冬霞等[7]对比研究了52例胃癌和30例正常胃黏膜，认为Kail 蛋白的异常表达可能在胃癌的发生、发展及浸润转移过程中发挥重要作用。Yang等[8]研究认为 Kail的低表达与胃癌、食管癌、结直肠癌的发生、发展、转移关系密切。2011年吴剑秋研究报道了109例乳腺癌和115例结直肠癌组织，发现肿瘤转移抑制基因KAll/CD82在乳腺癌和结直肠癌有无淋巴结转移之间，两者差异均有统计学意义，认为KAll/CD82是影响乳腺癌、结直肠癌淋巴结转移的因素[9、10]。本组研究结果显示，无淋巴道转移的乳腺癌、大肠癌组织中Kai1的表达显著高于伴有淋巴结转移的乳腺癌、大肠癌，提示在乳腺癌、大肠癌生长、演进过程中，获得异质性的能力逐渐增强，表现出Kai1蛋白逐渐降低的表达现象，这种低表达可能在乳腺癌、大肠癌发生淋巴结转移的过程中发挥了一定作用，与上述作者研究结果一致。

有研究认为，Kail与nm23、BRMS1等肿瘤抑制基因均具有抑制肿瘤细胞脱离原发灶而发生转移抑制的潜在作用，其机制可能是通过影响一些黏附分子作用而抑制肿瘤细胞的转移[11]。Kai1蛋白的高表达，参与了调节肿瘤细胞间的同质性黏附，抑制肿瘤细胞与细胞外基质的黏附，从而抑制肿瘤的转移，还认为Kai1蛋白的高表达还可抑制细胞增殖，致使肿瘤细胞生长缓慢，体现了Kai1基因是一种抑癌基因，具有抑癌作用。

综上所述，Kai1蛋白的表达与肿瘤转移呈负相关，在不同转移潜能的肿瘤组织中，Kai1蛋白表达的强度不尽相同，肿瘤转移能力受Kai1表达强度的影响；肿瘤生长的不同时期其转移潜能不一样，肿瘤晚期转移潜能的增强，受Kai1蛋白低表达的影响。

[1] Dong J T，Lamb P W，Rinker Schaeffer C W，et al.KAI1，a metastasis supperssor gene for prostate cancer on human chromosome l1p1l.2[J].Science,1995,268(5212):884-886.

[2]Takeda T，Hattora N，Tokuhara T，et a1.Adenoviral transduction of MRP-1/CD9 and KAI 1/CD82 inhibits lymph node metastasis in orhotopic lung cancer model[J].Cancer Res，2007，67(4)：1744-1749.

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[9]吴剑秋，张晓梅，刘德林，等.肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82第8内含子剪接区域多态与乳腺癌发病及转移的相关性 [J].肿瘤防治研究 ， 2011，38(1)：63-66.

[10] 吴剑秋，马国建，李金田，等.应用变性高效液相色谱技术研究肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82多态与结直肠癌发病及转移的相关性[J].中华生物医学工程杂志，2011,17(1)：48-52.

[11] 年峰，彭开桂.乳腺癌转移抑制基因在肿瘤中的研究进展[J].蚌埠医学院学报，2010，35(3)：318-321.

[收稿2012-11-10;修回2012-12-23]

(编辑：谭秀荣)

CorrelationbetweenKailproteinexpressionandmetastasisofdifferentcancer

Zhangsusu1，Guoruizhen2，Bianke1，Wangqiuhong1

(1.Department of Clinical Medicine, Zhuhai Campus of Zunyi Medical University, Guangdong Zhuhai 519041, China; 2.Department of Pathology, Zhuhai Campus of Zunyi Medical University, Guangdong Zhuhai 519041, China)

ObjectiveTo investigate the correlation between Kail protein expression and metastasis of different cancer.MethodsThe Kai1 protein expressions in 35 cases of skin basal cell carcinoma (BCC), 18 cases of skin squamous cell carcinoma (SCC), 46 cases of breast cancer and 64 cases of colorectal cancer were detected by immunohistochemical method.Pictures were collected and statistically analyzed by computer medical image analysis system.Results① The positive expression of Kail protein was found in BCC group and the negative or weak positive expression was shown in SCC group and there was significant difference between these 2 groups (Plt;0.01).②The Kai1 protein positive expression was detected in breast cancer and colorectal cancer without lymph node metastasis and the negative or weak positive expression was indicated in breast cancer and colorectal cancer with lymph node metastasis.The Kai1expression levels in cancer without lymph node metastasis were significantly higher than those in cancer with lymph node metastasis (Plt;0.01).Conclusion① Compared with the SCC group, the high Kai1 protein expression in BCC group might be related to the biological characteristics of BCC without metastasis.②The low Kai1 protein expression in breast cancer and colorectal cancer might be associated with cancer metastasis.

carcinoma; Kai1; metastasis

遵义医学院大学生科技创新项目(2011-D-10)。

郭瑞珍，女，教授，研究方向：皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌，E-mail:jichubuyouxiang@sina.com。

R73-37

A

1000-2715(2013)01-0037-04