气相色谱法测定硫酸阿米卡星中乙醇的残留量

张朋飞 王 琳 刘素鸽

(保定学院 生化系，河北 保定 071000)

硫酸阿米卡星为新型广谱卡那霉素A的半合成衍生物，具有抗菌谱广、活性强的特点，是临床上敏感性细菌导致的疾病有效治疗药物之一[1－4]。

该药合成过程中需使用甲醇、乙醇、丙酮、乙腈等溶剂，未能被全部清除。人用药品注册技术要求国际协调会(ICH)[5]和中国药典(2010版)规定了69种组分作为药品中残留溶剂的检测对象及各组分在药品中的残留限度，其中乙醇的残留限度为 0.5%[2－5]。

本实验根据中国药典第二部2010版有机溶剂残留量测定的原则[3]，建立了毛细管气相色谱法，对硫酸阿米卡星中甲醇、乙醇、乙腈、丙酮四种残留的有机溶剂进行分离，并使用内标分析法测定硫酸阿米卡星中乙醇的残留量。

1 实验部分

1.1 仪器设备与材料

GC－4000(A)毛细管气相色谱仪(北京东西电子厂)，A5000气相色谱仪工作站(北京东西分析仪器有限公司)，SGH－500高纯氢发生器(北京东方精华苑科技有限公司)，G103色谱用空气发生器(北京东方精华苑科技有限公司)，硫酸阿米卡星注射液(批号2101441FA，齐鲁制药有限公司)，其他试剂均为分析纯。

1.2 溶液的配制

分别配制五种有机溶剂此为标准溶液1、2、3、4、5号，浓度分别为(0.007917 ml、0.007895 ml、0.004000ml、0.001580ml、0.003214 ml)。分别各取上述甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、正丙醇1.0 mL，0.5 mL，0.5 mL，0.2 mL，0.6 mL 于100 mL 容量瓶中，配成对照品溶液6;精确量取5 mL乙醇，于100 mL容量瓶中，配成贮备液。

1.3 色谱条件

OV－17(30m×0.32mm)毛细管气相色谱柱;检测器为FID;载气为氮气，柱前压为0.06MPa;进样口温度200℃;检测器温度200℃;柱温:40℃恒温;进样量为1μL;载气分流流量为53.85mL/min。取待测试剂0.8μL 和正丙醇0.2μL，直接分流进样。

2 结果与讨论

2.1 专属性实验

取配制好的标准溶液6进样。如图1表明甲醇保留时间为 1.70 min，乙醇为 1.90min，丙酮为 2.15 min，乙腈为 2.48 min，正丙醇为 2.57min，相邻色谱峰间的分离度分别为 0.9，1.05，1.26，0.85，基本可以分离。

图1 标准溶液图

图2 硫酸阿米卡星谱图

2.2 校正因子

取乙醇和正丙醇标准溶液各0.5μL，按上述色谱条件进行检测，平行测五次，由公式:

其中Ar=标样组份的峰面积;Cr=标样组份的浓度;Ai=内标物的峰面积;Ci=内标物的浓度。

计算出校正因子数值分别为(1.639、1.631、1.642、1.648、1.628，其 RSD 为 0.51%)

2.3 线性关系考察

精密量取贮备液 0.2mL、0.8mL、1.4mL、2.0mL、2.6mL、3.2mL分别置于25mL容量瓶中，配制成一系列浓度的溶液，分别进样测定峰面积(14455、55286、88409、141534、207137 和246945)，进行线性回归分析(A=2.52125×107×C －9646.0482，其中 R=0.99488)

2.4 硫酸阿米卡星的测定

仪器的噪声为0.4405μA*s，经计算，乙醇的检出限为0.00019g/mL。表明检测灵敏度能够满足要求。取试剂0.8μ和正丙醇0.2μL，进行检测，结果如图2，按内标法计算药品中的乙醇的残留量。

计算公式为如下:

其中Ar=样品组份的峰面积或峰高;Ai=内标物的峰面积或峰高;Rf=校正因子。

由试剂色谱图和以上两公式可知供试品中乙醇含量为0.283%，符合中国药典2010版二部附录ⅧP的规定。

3 结论

本文所建立的方法专属性良好，所测有机残留溶剂乙醇具有良好的线性关系，RSD=2.6%，方法灵敏、准确、快速且分离度良好，适用于硫酸阿米卡星注射液中乙醇含量的测定。乙醇含量为0.283%，符合中国药典2010年版二部附录ⅧP的规定。

[1]王立萍，李茜，刘英.硫酸阿米卡星注射液质量评价[J].湖南畜牧兽医，2008，2(1):10 －11.

[2]宁建龙，刘进辉，孙志良等.硫酸阿米卡星脂质体注射液对猪细菌性疾病的疗效研究[J].湖南畜牧兽医，2008，2(1):10－11.

[3]周洪柱，翠云表.气相色谱法测定乙腈废水中乙腈的含量[J].云南化工，2005，32(5):42－43.

[4]朱小兵.解析气相色谱[N].中国包装报，2006－9－18(6).

[5]国家药典委员会.中国药典[M].第七版，北京:中国医药科技出版社，2000:1326－1327.