闽产“柘参2号”太子参多糖含量考察
2013-10-16陈锦龙白少伟庞文生
陈锦龙 白少伟 胡 娟,2 庞文生
1.福建中医药大学药学院,福建 福州 350122;2.福建中医药研究院,福建 福州 350003
太子参多糖具有增强机体免疫、润肺镇咳、降低血糖、改善胰岛素抵抗等作用,是太子参重要的一类活性成分[1-3]。通过考察闽产柘荣“柘参2号”太子参总多糖含量,为开发闽产柘荣太子参多糖有效部位积累科学数据。
1 试剂和仪器
中药材提取罐中试设备 (武汉中大制药设备有限公司);冷冻干燥仪 (德国CHRIST公司);TU-1800PC紫外可见分光光度计 (北京普析通用仪器有限公司)。
无水葡萄糖对照品 (中国药品生物制品检定所,批号110833-200302);浓硫酸、苯酚等试剂均为分析纯;水为超纯水;“柘参2号”太子参,由福建省闽东力捷迅药业有限公司GAP种植基地提供。
2 方法与结果
2.1 太子参多糖提取与精制 将太子参粉碎 (20目),置于中药提取罐中,按料液比1∶5,加85%乙醇溶液,室温下浸泡1h,加热提取2次,1.5h/次,过滤,残渣挥干乙醇,按料液比1:5加入水,浸泡1h;100℃加热,提取2次,2h/次,过滤,合并滤液,减压浓缩至为0.5g/ml生药量。用Sevage法除去蛋白,离心,上清液用终浓度90%乙醇沉淀,静置24h,4000r/min离心15min,沉淀用无水乙醇,丙酮,乙醚依次洗涤多次,冷冻干燥,即得精制太子参多糖。
2.2 样品供试液的制备 精密称取太子参粉末0.10g,置于100ml圆底烧瓶中,加85%乙醇100ml于100℃温度回流提取1.5h,过滤,药渣加入100ml蒸馏水100℃温浸提取2h,趁热过滤,药渣加热蒸馏水洗涤数次,洗液并入滤液,冷却后移入100ml容量瓶中,蒸馏水定容备用。
2.3 标准曲线 精密称取10mg经过105℃减压干燥至恒重的D-无水葡萄糖,加水溶解,定容至100ml量瓶中,作为对照品贮备液。采用苯酚硫酸法[4],以葡萄糖浓度(μg/ml)为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程 y=0.019x+0.0272,r=0.9991,在10~50μg/ml线性关系良好。
2.4 换算因子测定 精密称取干燥至恒重的精制太子参多糖10mg,加蒸馏水溶解,定容至100ml量瓶中,摇匀,精密吸取溶液1.0ml,照标准曲线制备项下的方法,测定多糖供试液中葡萄糖的浓度,按f=W/(C×D)计算换算因子。式中W为多糖的重量 (μg),C为多糖溶液中葡萄糖浓度 (μg/ml)测定值,D为稀释后多糖溶液体积 (ml);测得换算因子f=1.692。
2.5 样品多糖含量测定 精密吸取10个批次太子参供试液各0.5ml于具塞试管中,按标准曲线制备项下方法操作,测定葡萄糖的含量。按下式计算多糖含量:多糖含量=为样品溶液中葡萄糖浓度测定值 (μg/ml);D为稀释后样品溶液体积,f为换算因子,W为样品溶液中太子参重量。
表1 10个批次闽产柘荣太子参多糖含量测定结果
3 讨论
据文献报道,江苏产的太子参多糖含量在3.69%~24.47%,贵州产的太子参多糖含量在7.83%~22.39%,福建产的太子参多糖在10.50% ~23.93%[4-9];本文测定10个批次“柘参2号”太子参多糖含量在18.67%~25.43%之间,平均含量为21.76%。柘荣县太子参种植面积3.2万亩,年产量4900多吨,产销量占全国三分之二,2005年太子参GAP基地通过认证。闽产柘荣太子参多糖含量较高并相对稳定,对其研究及开发具有广阔的前景。
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