雄激素受体在乳腺癌中的表达及临床意义

张文进

乳腺癌是性激素依赖性肿瘤，其发生、发展及预后都与性激素受体有着密切的关系。研究证明雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)在乳腺癌的发生、发展中起重要的促进作用，成为乳腺癌的独立预后因子，用于指导内分泌治疗及判断预后。绝经后女性雌激素水平大量减少，但是研究发现女性乳腺癌的发病率并未减少。这是因为女性体内不光有ER，还有雄激素受体(AR)，特别是绝经后女性，雌激素大量减少，而AR没有受到明显影响或者仅有少量下降。雄激素在一些研究中显示对乳腺癌的发生、发展有重要作用，但目前的研究结果不尽相同［1，2］。此外内分泌治疗对ER、PR阴性患者是无效的，是否还有其他途径可走，一直是许多学者研究的热点。因此我们运用免疫组化法，对乳腺癌组织进行AR检测，进一步了解AR与乳腺癌的关系，为乳腺癌的治疗及预测预后积累资料，提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择河北医科大学第四医院乳腺中心2008年6月至2009年6月确诊为乳腺癌的320例患者的临床资料，均为女性，术前均未行任何治疗，无其他合并恶性肿瘤，均为第一次发病，年龄28～75岁，平均年龄51.3岁;其中浸润性导管癌257例，浸润性小叶癌32例，髓样癌13例，黏液腺癌10例，其他8例。术后切除标本送我院病理科行石蜡病理及免疫组化检测。

1.2 方法 以10%甲醛溶液固定标本，切4μm厚的石蜡切片，同时保留1张连续切片作HE染色观察;用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(SP法)检测乳腺癌组织中AR、ER、PR、Ki-67、Her-2蛋白的表达。用已知阳性染色切片作为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照，省去一抗作为空白对照。

1.3 结果判定标准

1.3.1 AR阳性表达为棕黄色细颗粒位于细胞核内。根据染色强度及阳性细胞数量来分级：阳性细胞数＜10%为(-)，10% ～25%为(+)，26% ～50%为(++)，＞50%为(+++)。最后将(-)为阴性，(+)～(+++)为阳性。

1.3.2 ER和PR阳性表达为棕黄色颗粒位于细胞核内。阳性程度按整张切片中阳性肿瘤细胞所占所有肿瘤细胞的比例分级：阳性细胞数 ＜5%为(-)，5% ～30%为(+)：30% ～60%为(++)，＞60%为(+++)。最后将(-)为阴性，(+)～(+++)为阳性。

1.3.3 Ki-67阳性表达为黄棕色颗粒位于细胞核内。阳性程度按整张切片中阳性肿瘤细胞所占所有肿瘤细胞的比例分级：阳性细胞数 ＜5%为(-)，5% ～25%为(+)，25% ～50%为(++)，＞50%为(+++)。最后将(-)为阴性，(+)～(+++)为阳性。

1.3.4 C-erbB-2阳性表达为棕黄色颗粒位于细胞膜上。阳性标准及阳性强度参照FDA推荐的Hercep Test结果评分，根据阳性物质着色程度及阳性细胞数分为4级：(-)为0～数个细胞的细胞膜呈浅黄色;(+)为超过10%的癌细胞胞膜染色，染色间断分布，未环绕胞膜(可见细胞膜散在浅黄或棕黄色细颗粒);(++)为超过10%的癌细胞胞膜弱到中度阳性，染色连续并环绕整个胞膜(可见细胞膜上棕黄色细颗粒及粗颗粒);(+++)超过10%的癌细胞胞膜强阳性，染色连续并环绕整个胞膜(大部分阳性细胞的细胞膜可见深棕色或褐色团块)。最后将(-)为阴性，(+)～(+++)为阳性。

1.4 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，采用秩和检验和Spearman相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AR表达率 AR主要定位于乳腺癌细胞核中，也有一部分AR在细胞浆中，AR在乳腺癌中的阳性表达率为69.38%(222/320)。

2.2 AR与临床病理指标的关系 AR表达与肿瘤大小、组织学分级呈负相关(r=-0.403，P ＜0.05;r=-0.447，P ＜0.05)。与肿瘤大小有关联(肿瘤≤2 cm者，AR阳性率92.5%，肿瘤大小2～5 cm者AR阳性率为72.2%，肿瘤≥5 cm者AR阳性率为53.3%。三者比较差异有统计学意义(P=0.000);与年龄、是否绝经、病理学类型、有无脉管瘤栓、淋巴结转移无相关性(P ＞0.05);与ER、PR、Her-2、Ki-67的表达无相关性(P ＞0.05)。见表1。

表1 AR蛋白表达与乳腺癌临床病理的关系 例

3 讨论

AR属于核受体超家族成员，位于Xq11.2-q12，是乳腺癌的4个遗传敏感性基因之一［3］。大部分乳腺癌组织都表达AR，尤其在乳腺癌细胞中，AR的表达比ER还要广泛［4］。目前越来越多的证据表明雄激素可能通过与雄激素受体结合而直接发挥抑制乳腺组织以及乳腺癌细胞的增殖作用［5，6］。而AR的突变则导致雄激素通过AR对乳腺癌细胞生长产生的抑制作用减弱或丧失。反之雄激素的一些具雌激素活性的代谢产物和雌激素可通过ER刺激乳腺癌细胞生长，为导致乳腺癌进一步发生发展的原因［7］。本研究发现乳腺癌组织中的AR的表达与组织学分级、TNM分期呈负相关，提示随着AR表达程度的增高，预示肿瘤的恶性程度较低，患者预后越好，与文献报道［8，9］相同。AR表达还与肿瘤大小有关联，肿瘤≤2 cm者，AR阳性率79.9%，肿瘤大小在2～5 cm者AR阳性率为66.9%，肿瘤≥5 cm者AR阳性率为63.6%。三者比较差异有统计学意义(P=0.000)提示体积越小的肿瘤中AR表达的越多。Agoff等［10］的研究也显示AR在较小的肿瘤中有更高的表达率。推测AR可能是乳腺癌预后良好的一个指标。

本研究还发现，AR的表达与ER、PR的阳性表达率呈正相关。乳腺癌中AR大多与ER、PR同时表达，只有少于10%的癌组织单独表达AR。Kuenen-Boumeester等［11］应用AR的单克隆抗体经免疫组化法测定100例乳腺癌患者肿瘤组织中的AR，发现76%为AR阳性，该结果与我们的研究结果相近，其中，53%表现为AR、ER、PR全部阳性，只有9%只表达AR，另外，13%的肿瘤不表达AR、ER、PR的任何受体，全部为III期肿瘤。提示若肿瘤表达AR则预后较好。1935年Murlin等报道引用雄激素对晚期乳腺癌有一定疗效，对绝经后晚期的患者有效率为20%～30%。激素受体阳性者有效率为46%，阴性者仅为8%［12］。因此，AR成为激素治疗的一个重要指标。

AR在乳腺癌组织中广泛表达，其基本结构与功能，及其与疾病关系的研究已有很大进展，但如何与其他转录因子相互作用，参与雄激素的各个生理过程，其各种突变与疾病的关系，如何影响乳腺癌的发生、发展及治疗，均有待于进一步深入研究。

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10 Agoff SN，Swanson PE，Linden H，et al.Androgen Receptor Expression in Estrogen Receptor Negative Breast cancer：Immunohistochemical，Clinical，and Prognostic Associations.Am Jclin Pathol，2003，120：725-731.

11 Kuenen-Boumeester V.Vander kwast TH，van Putten WL，et al.Immunhistochemical determin ation of cntrogen receptors in relation to oestrogen and progesterone receptors in female breast Cancer.Int J Cancer，1992，52：581-584.

12 李树玲主编.乳腺肿瘤学.第1版.北京：科学技术文献出版社，2007.130.