雌激素受体与妊娠期肝内胆汁淤积症的相关性研究

何春容,杨 芳,刘小乐,范 涛,胡晓榕,张 仙

(广东省深圳市福田区人民医院妇产科,广东深圳,518000)

妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)是以妊娠期出 现瘙痒及黄疸为特点,能引起较高的胎儿早产率及围产儿死亡率,受到临床医师的重视。ICP的发病机制目前尚不完全清楚。由于其好发于妊娠中晚期,而此时是雌激素合成的高峰期,因此有学者认为ICP与雌激素有关。但是也有报道称ICP患者血清雌激素水平与正常孕妇相比未见明显升高,而是由于患者对雌激素敏感度增加或雌激素降低胆酸代谢而导致ICP。本研究测定ICP患者血清雌三醇(E3)和绒毛促性腺激素-β(β-hCG)水平,并分析产后雌激素受体(ER)的表达情况,探讨ER与ICP之间的相关性,现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年3月—2013年3月于本院住院分娩的70例孕妇作为研究对象,其中ICP患者32例,正常孕妇38例;孕妇年龄23～39岁,平均(27.5±4.7)岁;孕龄35～40周,平均(37.7±2.6)周。将ICP患者纳入研究组,正常孕妇纳入对照组。2组孕妇年龄、孕龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 研究组纳入标准

研究组纳入标准[1]:①妊娠中晚期出现全身或局部皮肤瘙痒症状;②血清转氨酶检测有中度升高;③因妊娠导致血清生化升高;④乙肝五项检测抗体呈阴性;⑤产后生化、体征以及相关临床症状消失。

1.3 实验方法

1.3.1 样本收集 2组孕妇均于分娩前30 min空腹肘静脉取血5 mL,双盲编号,离心后收集血清,置于-40℃冰箱保存备用。产前10 min内将胎盘母体中央组织取出,组织面积为3cm×2 cm×2 cm,用10%甲醛固定后,石蜡包埋。

1.3.2 血清β-hCG和E3水平测定 采用放射免疫法对β-hCG和E3水平进行测定,放免试剂盒均由北京华英生物技术研究所提供。

1.3.3 胎盘免疫组化 采用免疫组织化学染色法对收集胎盘中ER、HCG表达水平进行测定。免疫组化染色前将石蜡切片,平均片厚5μ m,2组均同时采用免疫组化染色,采用SP-9002免疫组化染色试剂盒(北京博乐通生物科技有限公司),所有操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 判断标准

判断标准[2]分为以下2种,按照染色强度:无染色:0;轻微染色:1;中度染色:2;强染色:3。按照染色面积:无染色:0;细胞染色面积<25%:1;细胞染色面积25%～50%:2;细胞染色面积>50%:3。综合2种标准,判定积分之和,参考标准:-:0;+:1～2;2+:3～4;3+:5～6。其中,≥+作为阳性结果,-作为阴性结果。

1.5 统计学方法

所有研究数据均采用SPSS 17.0统计学软件包进行统计分析,患者资料均用均数±标准差表示,采用 t检验,组间率的比较采用 χ2检验。相关性采用Spearman关联性分析,以 P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组血清β-hCG和E3水平比较

研究组E3水平为(18.53±9.73)ng/mL,显著高于对照组的(12.64±5.49)ng/mL,差异有统计学差异(P<0.05);研究组和对照组β-hCG水平分别为(17.03±8.56)ng/mL和(15.95±7.41)ng/mL,经比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 2组胎盘组织中ER、HCG表达阳性率比较

研究组ER阳性表达率为71.88%,显著高于对照组的26.32%(P<0.05);而2组HCG阳性表达率经比较差异无统计学意义(P>0.05),见表1。

表1 2组胎盘组织中ER、HCG表达阳性率对比[n(%)]

2.3 研究组血清β-hCG、E3水平与ER相关性分析

Spearman关联性分析结果显示,研究组血清E3与胎盘组织ER表达显著正相关(r=0.604,P<0.05);而血清β-hCG水平与胎盘组织HCG表达无显著相关性(r=0.198,P>0.05)。

3 讨 论

ICP是出现于中晚期妊娠期间,以生化检查胆汁淤积以及皮肤瘙痒为主要症状的疾病。该病随着妊娠的持续,一般在产后逐渐消失。有研究[3]报道该病在以后妊娠中存在复发的可能,但是在未孕期间,患者无明显肝脏疾病的临床表现,肝功能检查也正常。对母亲来讲,ICP是一种良性疾病,即使出现持续性瘙痒也不会给孕妇带来不利的病理影响;对胎儿来讲,ICP会带来严重后果,主要包括流产、死胎或早产等。关于ICP的发病机制目前尚不完全清除,有报道[4]称ICP的孕妇中,胎儿脐血内胆汁酸水平明显升高,而雌激素会降低胆酸代谢,因此有学者认为雌激素水平与ICP发生发展有密切关联。

雌激素在孕妇体内合成释放的过程与ICP模式相近,它的合成高峰期在妊娠中晚期。研究[5]发现单胞胎妊娠ICP发生率明显低于双胞胎妊娠,而双胞胎妊娠孕妇雌激素水平和孕激素水平是单胞胎妊娠的5倍以上。Oztekin[6]调查发现,有ICP病史的妇女口服避孕药发生ICP的风险会显著增加。针对ICP的发病机制,学者们做了大量基础性研究,目前主要有5种假说[7]:胆汁渗透性明显增加;钠泵(Na-K-ATP酶)活性降低;雌激素代谢异常;膜流动性明显降低和肝蛋白合成异常。雌激素可能通过影响其中一种或几种途径来介导胆汁淤积。陈新萍[8]证实乙炔雌二醇会特异性地改变窦状膜区,使牛磺胆酸盐的摄取量降低;而窦状膜区的改变与钠泵密切相关。也有学者发现,雌激素与肝脏内葡糖醛酸和硫酸盐结合,一般认为这些结合物具有胆汁淤积的作用;通过一系列复杂的过程导致体内硫酸盐与葡糖醛酸失衡,进而引发胆汁淤积。黄桂琼[9]研究发现,ICP孕妇体内雌激素前体物质脱氢表雄酮浓度降低,导致了雌激素如E2、E3等合成减少。作者认为当ICP发生时,胎儿存在器官功能障碍,而脱氢表雄酮浓度降低则提示毒性作用于胎儿肾上腺素。本研究显示研究组E3水平为(18.53±9.73)ng/mL,对照组为(12.64±5.49)ng/mL,研究组明显高于对照组(P<0.05);且研究组ER阳性表达率显著高于对照组(P<0.05);Spearman关联性分析结果显示,研究组血清E3与胎盘组织ER表达显著正相关(r=0.604,P<0.05)。这一结果提示ICP孕妇中雌激素水平显著升高,此外雌激素受体水平也相应增加,这与患者体内雌激素持续刺激有关,雌激素的持续刺激可以反馈性增加ER水平,而ER水平增加又进一步提高胎盘对雌激素的敏感性。

绒毛促性腺激素是由胎盘合成并在孕妇血、尿中大量存在的一种激素。有研究[10]发现ICP孕妇β-hCG水平显著高于正常孕妇,其原因可能是胎盘血供不足导致绒毛变性坏死,因此可以将β-hCG作为胎盘功能检测的一项指标。本研究结果发现,研究组β-hCG略高于对照组,但2组βhCG水平差异无统计学意义(P>0.05);而2组HCG阳性表达率经比较差异也无统计学意义(P>0.05);血清β-hCG水平与胎盘组织HCG表达无显著相关性(r=0.198,P>0.05)。这可能与本研究中ICP孕妇在产前进行积极治疗或提前终止妊娠有关。

综上,ICP孕妇体内E3和ER水平明显升高,且血清E3与胎盘组织ER表达明显正相关,这一变化可能与ICP发生有关,并对胎儿预后产生一定的不良影响。

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[9]黄桂琼,刘正飞,何毛毛,等.妊娠期肝内胆汁淤积症患者血浆促肾上腺皮质激素释放激素增长受限[J].中华围产医学杂志,2011,14(10):624.

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