子午流注序贯穴位埋线治疗HBeAg阴性乙肝病毒携带者外周血T细胞亚群变化的临床观察*

殷小兰 侯秋科

HBeAg阴性乙肝病毒携带者易反复发生肝炎，且较HBeAg阳性乙肝病毒携带者有更高的形成肝硬化甚至肝癌的风险。因而，近年来对HBeAg阴性乙肝病毒携带者越来越重视，但西医缺乏满意的治疗手段。为探索中医传统疗法对HBeAg阴性乙肝病毒携带者的治疗作用，我们自2010年1月－2011年12月采用用子午流注序贯穴位埋线治疗HBeAg阴性乙肝病毒携带者120例，取得较好效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 120例HBeAg阴性乙肝病毒携带者均为柳州市中医院消化科肝病门诊患者，符合诊断标准［1，2］:①血清HBsAg(+)，HBeAg(－)，抗-HBe(+)，排除合并其他嗜肝病毒感染，病程超过1年;②HBV DNA≥2000IU/ml;③1年内连续3次以上检查ALT和AST均在正常范围;④肝胆脾胰超声检查无异常或仅有肝实质光点增粗表现，无肝硬化或占位性病变的表现。随机分为两组，治疗组60例，男38例，女22例，年龄18～68岁，平均37.2岁;对照组60例，男33例，女27例;年龄17～67岁比较，平均35.8岁。两组患者在病程、病情、HBV DNA值等方面比较，差异无统计学意义 (P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治疗方法 两组病例均在门诊治疗，定期复查。治疗组予子午流注序贯穴位埋线治疗，即在申时 (下午3时至下午5时)序贯开穴 (肝腧、胆腧，然后期门、日月)，将针头刺入穴位，提插得气后，用针芯抵住羊肠线缓缓退出针管，将羊肠线留在穴内，敷无菌棉球以胶布固定，穴位埋线1周1次，3个月为1个疗程。对照组予胸腺肽肠溶片，口服，1片/次，3次/d。3个月为1个疗程。

1.3 观察方法 流式细胞仪检测T细胞亚群，所有受试者均清晨抽取空腹外周血2ml，肝素抗凝 (1小时内进行检测)。按T细胞亚群免疫荧光检测试剂盒说明进行操作 (购于德国Partec公司)，测定CD4+、CD8+，结果采用FloMax专用软件进行分析。

1.4 统计学方法 采用SPSS 13.0统计软件分析，数据以(±s)表示，采用t检验。

2 结果

两组患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+变化 见表1。

表1 两组患者治疗前后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较(±s)

表1 两组患者治疗前后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较(±s)

与本组治疗前比较，*P＜0.05;与对照组治疗后比较，#P＜O.05

组别 CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+26.21±6.65 20.12±6.45 1.32±0.42(n=60) 治疗后 35.53±9.03*# 24.32±6.83*# 1.45±0.64*#对照组 治疗前 25.38±8.25 19.98±7.12 1.29±0.23(n=60) 治疗后治疗组 治疗前28.35±4.98 20.12±10.01 1.27±0.26

3 讨论

一般认为，在慢性乙型肝炎病毒感染过程中，e抗原与抗-HBe的血清学转换标志着病毒复制的降低，肝内炎症活动趋于缓解、静止。因此，临床上ALT正常的HBeAg阴性慢性HBV感染者往往被人们认为是发生了HBeAg血清学转换，而不被重视［3］。而肝穿刺组织病理学及免疫组化研究进一步证实，大多数乙肝病毒携带者均出现不同程度的肝脏炎症样改变及微循环障碍，其中肝纤维化程度高者 (S2期)以HBeAg阴性者为多。研究发现，对于ALT＜2ULN的患者，选择核苷类似物或干扰素抗病毒治疗的效果都不尽人意［4］。因此，对HBeAg阴性乙肝病毒携带者，特别是高病毒载量的患者，探讨一种更安全疗效更佳的治疗方法具有重要的临床意义。

子午流注是中医脏腑经络学说中的一种规律，即每日的12个时辰对应于人体12条经脉。由于时辰在变，因而不同的经脉在不同的时辰也有兴衰。把人的脏腑、经脉之气血在12个时辰中的兴衰联系起来看，环环相扣，十分有序，其循行次序是:寅时肺经－卯时大肠经－辰时胃经－巳时脾经－午时心经－未时小肠经－申时膀胱经－酉时肾经－戌时心包经－亥时三焦经－子时胆经－丑时肝经，最后再流入肺经，首尾相接，如环无端。不过，据上述12经脉按时辰循行来推算，很多经脉流注时辰在晚上或者是深夜，比如肝胆经在半夜11点至凌晨3点，而在深夜则不利于治疗。所以笔者根据经脉五行属性，经脉虚则补其母、实则泻其子、子午对冲、气血互注以及五行相生原理，以阴水 (肾)生阳木 (胆)，阳水 (膀胱)生阴木 (肝)为依据，观察了在膀胱经气血旺盛 (申时)的时候直接调节肝经的气血阴阳，即在申时气血旺盛时取膀胱经肝、胆俞配合肝、胆募穴期门、日月治疗肝胆疾病的临床疗效。穴位埋线疗法［5］寓粗针透穴、放血、穴位注射、组织疗法于一体，具有“以线带针”的长效针感治疗效果，可提高穴位的兴奋性与传导性，具有止痛、解痉、调和气血、疏通经络、扶正祛邪、平衡阴阳，调节机体有关脏腑器官功能，使其趋于平衡，达到良性、双向性调整作用。

CD4+T细胞为辅助性T细胞，能促进B细胞、细胞毒性T淋巴细胞和其他免疫细胞的增殖及分化，调节体液免疫和细胞免疫。CD8+细胞由细胞毒性T淋巴细胞和抑制性T细胞组成，CD8+细胞是决定HBV清除状态的关键细胞亚群，通过细胞溶解或非溶解机制是CD8+细胞清除机体感染HBV的主要方式［6］。本研究结果显示，与对照组相比，治疗组患者治疗前CD4+T细胞表达和CD4+/CD8+下降，这提示CD4+T细胞、CD8+T细胞参与了肝细胞损伤。HBV感染后CD4+T和CD8+T细胞反应对病毒的清除和疾病的转归起重要作用［7］，CD4+T和CD8+T细胞的减少，可能导致机体细胞免疫功能下降，感染乙肝病毒后不易清除，与疾病的慢性化有关。治疗组治疗后CD4+T和CD8+T增加，说明此方法提高了机体的细胞免疫功能。T细胞免疫功能紊乱在慢性乙肝的病理损伤中发挥作用是一个复杂的过程，我们通过近期三个月的临床观察发现，运用流式细胞检测到在干细胞移植后T细胞亚群表达处在上升趋势，由此可见，子午流注序贯穴位埋线可以有效的改善经络气血运行，调节脏腑功能，激发免疫功能，提高机体免疫应答能力，从而提高机体清除病毒的能力，改善远期预后，值得临床进一步研究。

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［4］丁虹.恩替卡韦与阿德福韦酯抗乙型肝炎病毒作用的比较［J］.世界感染杂志，2007，7(4):303－304，311.

［5］布的尔坡，张兴明.穴位埋线疗法的治疗原理与临床应用价值［J］.西部医学，2009，21(5):852－854.

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［7］ KINGSLEY CL，KARIM M，BUSHELL AR，et al.CD25+CD4+regulatory T cells prevent graft rejection:CTLA-4 and IL-10-dependent immunoregulation of alloresponse ［J］ .J Immunol，2002，168(3):1080－1086.