健脾理气方对痞满患者血浆MTL、CGRP、NO的影响

赵 鹏，黄穗平，尚文璠，谭明义

(1.广东省中西医结合医院，广东佛山528200;2.广东省中医院，广东广州510120)

痞满患者多伴有早饱、嗳气、反酸、恶心等症状。在功能性消化不良4个亚型中，动力障碍型约占50%，此类患者胃排空延迟、胃动力减低是其主要改变。有研究［1］发现:此类患者多有胃排空迟缓并伴有血浆胃动素(MTL)水平明显降低。降钙素基因相关肽(CGRP)可降低胃内压，抑制胃肠运动，松弛胃窦环行肌和胃底纵行肌，通过外周静脉注射降钙素基因相关肽可明显延迟胃排空。有研究［2］发现:胃窦壁内一氧化氮合酶(NOS)及神经纤维末梢增多、活性增强普遍见于胃排空延迟的消化不良患者。健脾理气方由四君子汤加味而成，经过临床广泛运用，治疗痞满病疗效确切。2007年3月—2008年1月，笔者针对健脾理气方对脾虚气滞型痞满病患者血浆中MTL、CGRP、NO等胃肠动力相关因子的影响进行研究，以探讨该方治疗痞满病的作用机制。

1 一般资料

选择广东省中医院、广州军区总医院消化内科住院和门诊脾虚气滞型痞满病患者63例，采用随机数字表法随机分为治疗组和对照组。治疗组32例，男14例，女18例;年龄18～65岁，平均(37.59±1.98)岁;病程1 个月 ～2 a，平均(10.64 ±3.42)个月。对照组31例，男18例，女13例;年龄18～65 岁，平均(38.26 ±1.67)岁;病程 1 个月 ～3 a，平均(11.27±3.28)个月。两组患者一般资料对比，差别无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

2 诊断标准

中医诊断、辨证标准按照《中药新药治疗痞满证的临床研究指导原则》［3］;西医诊断标准按照《2003年中国中西医结合学会重庆会议制订的《慢性胃炎中西医结合诊断标准》［4］和2006年9月中华医学会消化病学分会全国第二届慢性胃炎共识上海会议制订的《慢性胃炎诊断标准》［5］。

3 试验病例标准

3.1 纳入病例标准

符合痞满病中西医诊断标准及中医辨证的患者，可纳入试验病例。

3.2 排除病例标准

①有过多兼夹证或明显兼夹证者;②辨证不明及影响消化道动力的器质性疾病;③全身其他系统疾病;④近2周内，使用过影响胃肠动力药物者。

4 治疗方法

治疗组给予健脾理气方，药物组成:陈皮10 g，法半夏 15 g，木香 10 g，砂仁 10 g，党参 15 g，茯苓15 g，白术 15 g，浙贝母10 g，海螵蛸15 g，郁金15 g，延胡索15 g，炙甘草6 g。对照组给予《国家药典》香砂六君子方，药物组成:木香6 g，砂仁6 g，党参10 g，茯苓 9 g，白术 9 g，陈皮 9 g，法半夏 12 g，炙甘草6 g。为增强患者的依从性，两组均选用免煎颗粒剂冲服，每日2次。试验期间不得使用对本病本证有治疗作用的其他药物。

两组均以4周为1个疗程，共治疗1个疗程。

5 检测试剂与材料

5.1 主要试剂

抑肽酶。MTL和CGRP指标检测试剂盒:内含酶联板、标准品(冻干品)、样品稀释液、检测稀释液AB、检测溶液AB、底物溶液、浓洗涤液。NO酶标检测试剂盒。

5.2 主要器材

一次性采血器、微量移液器、一次性微量试管、低速台式离心机、－70℃冷冻冰箱、抗凝采血管、微量有机分析专用超纯水机、恒温生化培养箱、离心机、酶标仪、分光光度计。

6 检测指标与方法

6.1 血液采集

在早晨采集外周静脉血2 mL置于抗凝采血管中，在4℃以3 000 r/min转速离心10 min，分离的血浆存放于－70℃超低温冰箱。治疗前后各采血1次。

6.2 MTL 检测

采用酶联免疫法。首先将试剂恢复到室温，设标准、待测样品、空白孔，除空白孔外，其余各孔分别加待测样品、标准品各100 μL，轻晃，混合均匀，酶标板加盖，37℃反应120 min;弃液，甩干;每孔先后加检测溶液 A、B 各100 μL，37 ℃，60 min，弃液，洗板，甩干;之后每孔加底物溶液90 μL，37℃避光显色30 min;每孔加终止溶液50 μL;15 min内用酶联仪依序测量各孔OD值，代入标准曲线回归方程式，计算样品浓度。

6.3 CGRP 检测

检测步骤同MTL检测方法。

6.4 NO 检测

一氧化氮在血液中以亚硝酸盐和硝酸盐的形式存在，测得这两类物质的浓度便可得知NO的浓度。取试管数支分别标明空白管、标准管、测定管;按试剂说明书分别加入等量蒸馏水、20 μmol/L亚硝酸钠、样品，混匀后放置 10 min，3 500 ～4 000 r/min，离心10 min，取上清液，分别加入显色剂0.4 mL混合均匀，15 min之后进行550 nm比色，0.5 cm光径比色杯，水调零，测每个试管的 OD值，计算 NO浓度。

7 统计学方法

采用SPSS 13.0统计分析软件处理。计量资料数据以均数()±标准差(s)表示，组间比较采用t检验;计数资料组间比较采用χ2检验;等级资料组间比较采用Ridit分析。以P＜0.05为差别有统计学意义。

8 结果

8.1 两组基线期组间对比

结果显示:治疗前治疗组与对照组血浆MTL、CGRP、NO浓度组间对比，差别无统计学意义(P＞0.05)。

8.2 两组治疗4周后血浆 NO、CGRP、MTL水平对比

见表1。

表1 两组治疗4周后血浆NO、CGRP、MTL水平对比 ±s

表1 两组治疗4周后血浆NO、CGRP、MTL水平对比 ±s

注:与对照组对比，＊＊ P ＜0.01。

组 别 例数 血浆NO/(μmol·L-1) CGRP/(μg·L-1) MTL/(ng·L-1)治疗组 32 39.22±4.32＊＊ 33.75±3.86＊＊ 286.51±5.67＊＊31 43.10 ±3.94 56.44 ±3.77 242.61 ±5.74对照组

8.3 治疗组治疗4周后与治疗前血浆NO、CGRP、MTL水平对比

见表2。

表2 治疗组治疗4周后与治疗前血浆NO、CGRP、MTL水平对比 ±s

表2 治疗组治疗4周后与治疗前血浆NO、CGRP、MTL水平对比 ±s

注:与治疗前对比，＊＊ P ＜0.01。

时 间 例数 血浆NO/(μmol·L-1) CGRP/(μg·L-1) MTL/(ng·L-1)治疗后 32 39.22±4.32＊＊ 33.75±3.86＊＊ 286.51±5.67＊＊31 58.37 ±3.23 86.43 ±3.76 188.21 ±6.32治疗前

9 讨论

痞满的病因可归纳为素体脾虚、外邪入侵、饮食不节、情志不畅;病机可总结为中焦气机不利，脾升胃降失常。临床主证为自觉心下痞塞，胸膈胀满，触之无形，按之柔软，压之无痛［6］。有研究［7］表明:健脾中药颗粒剂能明显改善此类患者的钡条排空率、促进胃动力。有学者研究［8］发现:脾虚型痞满患者的胃动力较正常人低，血浆胃动力指标紊乱，血浆胃肠动力因子与痞满的证型表现有相关性，脾虚患者血胃动素浓度显著低于正常人。胃肠道受到神经—体液调节系统的精密调控。胃动素是启动消化间期胃肠移行性复合运动的重要激素，在消化间期Ⅲ相诱发上消化道蠕动，并诱发胃电活动，功效强、作用久。有实验表明:提高胃动力低下大鼠血液及胃窦组织中胃动素含量能够提高大鼠的胃肠动力［9］。相应的中药煎剂能明显提高模型大鼠血浆中胃动素含量，改善胃动力障碍大鼠的胃肠机能状态，增加其胃肠运动功能［10］。胃窦和十二指肠存在着特异的胃动素受体，胃动素通过直接作用于平滑肌细胞上的胃动素受体而起作用，胃的排空与血MTL浓度有高度相关性［11］。血 MTL浓度与胃电图的研究表明:胃电图中的平均振幅和频率与MTL呈线性关系。CGRP广泛分布于胃肠道黏膜下层和肌间神经丛，具有调节胃肠血流及运动功能的作用，能降低细胞膜对Ca2+的通透性，影响细胞内外的钙离子浓度进而影响胃肠平滑肌细胞的舒缩活动［12］;此外，CGRP能促进胃肠生长抑素的释放从而抑制胃肠蠕动［13］。

NO作为神经传递和调节的媒介，具有重要的胃肠运动调节作用，对胃肠道的作用与MTL相反，能使胃停止收缩，进而产生容受性舒张运动，胃的运动状态与幽门、胃窦、胃体处黏膜血流中的NO浓度相关。有报道［14］称:外源性NO能引起类似非肾上腺素能非胆碱能神经刺激下胃肠平滑肌的松弛和超极化作用。戴益琛等［15］报道幽门松弛与闭合状态和胃的局部黏膜中NO水平相关，松弛者比闭合者NO含量明显增加。因此，推断NO水平升高是引起幽门松弛的重要因素。健脾理气方由补益脾胃之气、补中兼行、温而不燥的四君子汤加味而成。本研究显示:健脾理气方与香砂六君子方都能使脾虚气滞型痞满患者血CGRP、NO浓度下降、血MTL浓度升高;组间对比显示:健脾理气方对脾虚气滞型痞满患者的胃肠动力相关因子的改善程度优于香砂六君子组，也表明健脾理气方具有明确的促胃动力作用。

动物实验发现:四君子汤能升高脾虚模型大鼠的血MTL水平，加强其胃肠运动［16］，具有双向调节胃肠运动的功效［17－18］。白术能明显增加胃窦肌间神经丛中P物质的含量，减少血管活性肠肽、NOS的含量，这在白术的促动力效应中起一定作用。上述研究表明:健脾理气方可有效调节血浆中MTL、CGRP、NO等胃肠动力相关因子。笔者推测此应该是健脾理气方治疗脾虚气滞型痞满病的作用机制之一。

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