高效液相色谱法测定红霉素肠溶胶囊的含量

2013-09-18陈李燊江淑萍

中国现代药物应用 2013年2期

陈李燊江淑萍

红霉素及其制剂是目前临床中常用的抗生素，红霉素是第一个药用的十四元环大环内酯类多组分抗生素［1］。红霉素肠溶胶囊作为治疗对青霉素过敏感染患者的替代用药，其测定方法为抗生素微生物检定法，此法操作繁琐、费时［2］。本文采用HPLC测定红霉素肠溶胶囊的含量，简单方便、快速准确。现报告如下。

1 仪器与试药

L2400高效液相色谱仪(日本日立公司)；BS110S电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)；红霉素对照品(中国药品生物制品检定所，批号：20120315)；红霉素肠溶胶囊(齐鲁制药有限公司，批号分别为：20120405，20120409，20120501，0.25 g)；甲醇、乙腈为色谱纯；水为纯净水；其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱：Agilent Poroshell 120(4.6×250 μm，5 μm)；流动相：0.067 mol/L、pH 为 6.5(三乙胺调)的磷酸二氢铵溶液－乙腈(56：44)，检测波长：210 nm，流速：0.8 mL/min，柱温：室温。进样量：20 μl。

2.2 对照品溶液的制备精密称定红霉素对照品1.9 mg于10 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，备用。取1 ml加甲醇定量至2 ml容量瓶中，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备取本品5粒，研细，混匀，精密称定细粉适量(约相当于胶囊1粒)，置10 mL量瓶中，加2 mL甲醇溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.4 阴性样品溶液制备按照处方比例，制成除红霉素外的其他组分的阴性样品，按2.3方法制成阴性对照品。

2.5 方法学考察

2.5.1 标准曲线制备分别取浓度为0.19 mg/ml，0.095 mg/ml，0.063 mg/ml，0.0475 mg/ml，0.038 mg/ml的对照品溶液20 μl，按上述色谱条件测定，峰面积为纵坐标(Y)，浓度为横坐标(X)，绘制标准曲线。得方程为：Y=5088212X-681234，r=0.9997，结果表明山奈素在 0.76 ～3.8 μg内线性关系良好。

2.5.2 精密度试验精密吸取对照品溶液20 μl，同一色谱条件连续进样6次。结果：红霉素的峰面积RSD=1.01%，表明仪器精密度良好。

2.5.3 重复性实验取同一批号的样品溶液6份，照2.3方法制备，依次进样。结果：山奈素的含量RSD=0.92%，表明方法重复性良好。

2.5.4 稳定性试验取同一供试品溶液分别在2、4、6、12、24 h内进样，结果RSD=0.97%，表明该方法稳定性良好。

2.5.5 回收率实验取已知含量的红霉素胶囊6份(每份相当于胶囊4粒)，分别加入精密称定的山奈素对照品0.5610 mg。按2.3方法制备，进样，计算，结果见表1。