鸡甲胺磷中毒性迟发性神经病电生理测定及药物干预研究

胡轶虹 谭兴文 张征骄 江新梅

鸡甲胺磷中毒性迟发性神经病电生理测定及药物干预研究

胡轶虹 谭兴文 张征骄 江新梅

目的 ①建立鸡甲胺磷中毒迟发性神经病模型。②通过周围神经电生理检测确定周围神经损伤情况并评价三磷酸胞苷二钠(CTP)对周围神经的保护作用。方法 莱亨母鸡随机分为2组，甲胺磷经消化道染毒，从染毒后第2天开始A、B组分别每天给盐水和CTP1周，染毒后1、2、3、4、8周取鸡坐骨神经进行电生理检测。结果 甲胺磷致迟发性神经病早期以轴索损害为主，继之出现脱髓鞘改变，但各组间比较差异无统计学意义。结论 ①利用甲胺磷染毒莱亨鸡可成功构建迟发性神经病模型。②电生理检测阳性率高，且早于临床体征的出现，是诊断迟发性神经病的客观指标之一。③本病有自愈倾向，远期预后较好。

甲胺磷；迟发性神经病；三磷酸胞苷二钠；周围神经电生理

近年来，随着有机磷农药中毒抢救成功率的提高，迟发性神经病的发病率也呈上升趋势，发生率5%左右[1]，因此对其发病进行正确的评估及积极地预防治疗是我们的重要任务。本实验应用甲胺磷染毒leghorn鸡，并在患鸡出现肌无力等临床表现前进行神经电生理检测，评估CTP对OPIDN(迟发性神经病)的预防及保护作用。

1 资料与方法

1.1 构建动物模型及实验分组 选取营养状态良好的莱亨母鸡(购自长春市生物制品所免疫室)50只，鸡龄8～14个月，体质量2 kg左右，单只饲养，用植物油溶解甲胺磷(购自湖北沙隆达股份有限公司)，浓度为5 mg/ml，鸡断食24 h后，依照2 ml/kg灌入甲胺磷，分别于染毒前20 min、染毒后3、6、10 h肌肉注射阿托品(购自河北省郑州兽药厂)保持度过急性期。A组为盐水组，染毒后连续一周肌注生理盐水(1 ml/kg)。B组为CTP(购自北京三九万东药业有限责任公司)组(浓度3 mg/ml)，染毒后连续一周肌注1 ml/kg。

1.2 标本的留取及电生理检测 染毒后1、2、3、4、8周随机留取标本。鸡固定在特制木板上，室温25℃，腹腔注射水合氯醛麻醉，下肢去皮，从髂关节至膝关节，沿坐骨神经走行剥离肌肉，游离坐骨神经，取坐骨神经长约3 cm浸于台式液中，除去周围脂肪组织，其后应用生物信号记录仪(澳大利亚艾德公司生产，吉林大学生理实验室提供)行电生理检查。潜伏期为刺激伪迹前沿到动作电位起始处时间间隔；波幅为上相波顶点与下相波的最低点之间的距离；运动神经传导速度为两记录电极间距离除以两动作电位潜伏期差。

2 结果

2.1 临床表现 甲胺磷染毒后5～10 min，鸡出现萎靡、流涎、瞳孔缩小、喜卧的临床表现，在第2～6天陆续出现死亡，共死亡6只，两组间比较无差异，实验组平均死亡率为12%。经过1周后，鸡开始出现全身无力，喜卧，后出现行走不稳，重者出现站立困难，没有完全瘫痪者，至第4周肌力几乎恢复正常，两组总体发病率(15.9%)，组间比较差异无统计学意义。

2.2 波幅检测结果 第1周，波幅呈明显降低，其后2，3周波幅逐渐恢复，至第4周波幅已近恢复正常。两实验组比较差异无显著性。详见表1。

2.3 运动神经传导速度检测结果 第2周开始出现运动神经传导速度减慢，第3、4周持续出现运动神经传导速度减慢，至第8周运动神经传导速度已基本恢复正常。各个实验组比较差异无统计学意义。详见表2。

表1 各实验组波幅变化

注：组内比较1、2、3与4、8周间差异有统计学意义(P<0.05)，组间比较差异无统计学意义(P>0.05)

表2 各实验组运动神经传导速度变化

注：组内比较1、8周与2、3、4周间差异有统计学意义(P<0.05)，组间比较差异无统计学意义(P>0.05)

3 讨论

甲胺磷是一种高毒、低残留、广谱应用的有机磷杀虫剂[2]。消化道，呼吸道和皮肤接触均可导致急性中毒，但消化道途径中毒后，发生迟发性神经病的可能性最大。不同种属的动物对有机磷的敏感性也不尽相同，人和鸡相对敏感。[3]。我们应用甲胺磷染毒莱亨母鸡，发现在染毒后1～2周先后出现了波幅及运动神经传导速度改变(阳性率90%)，2周出现不同程度的肌无力表现(总发病率15.9%)，成功的构建了迟发性神经病的动物模型。

本研究发现染毒后1周出现波幅明显降低，说明早期神经损伤表现为轴索变性，2周开始出现运动神经传导速度减慢，提示出现脱髓鞘改变，这与神经病理检查结果相吻合。同时发现波幅降低(染毒后1周)明显早于肌无力(染毒后2周)的出现，电生理检查的阳性率(90%)也明显高于临床表现的阳性率(15.9%)，而肌无力症状的恢复(4周)明显早于波幅及神经传导速度的恢复(8周)。因此，我们认为有机磷农药中毒的患者，即使成功渡过急性期，仍需定期随访，及时发现迟发性周围神经损害。神经电生理检查不但能够发现早期周围神经损害，对神经修复的预后判定也是一重要指标。

目前有机磷中毒性迟发性神经病尚无特异的治疗方法。虞炳庆等应用激素治疗25例OPIDN患者，发现其能显著提高迟发性神经病1年内痊愈显效率[4]，但有4例出现柯兴氏征，因此开发和应用新药取替它是我们紧迫的任务。CTP为核苷酸类药物，在机体内参与磷脂类及核酸的合成和代谢。具有营养神经，提高神经细胞抗损伤能力，增强神经细胞活性，促进神经突起生长的作用。王敏等[5]对22例有机磷中毒后迟发性神经病患者进行为期10～14 d的CTP治疗，发现总有效率达77%。本实验中应用CTP进行早期干预治疗，但各时间点电生理检测组间比较差异无统计学意义，说明该药并不能阻止迟发性神经病的发生，至第8周，电生理检测结果已近恢复正常，提示本病有自愈倾向。为了在OPIDN治疗上有所突破，还应进行发病机制方面的相关研究。

[1] 王汉斌，阮金秀.急性有机磷农药中毒致脏器损害与并发症的防治.中华急诊医学杂志，2001，10：285-287.

[2] 范永仙, 陈小龙, 姜晓平,等.甲胺磷农药的生物降解研究进展. 微生物学杂志，2002，22: 45-47.

[3] 郭斌，郭丽华，郭洪志，等.有机磷中毒引起的迟发性神经病的临床与电生理研究.中风与神经疾病杂志，1997，14：186-187.

[4] 虞炳庆，刘保群，芮晓东，等.糖皮质激素治疗有机磷农药中毒后迟发神经病的疗效观察.临床神经病学杂志，1995，11：46-47.

[5] 王敏，李华，王桂华，等.三磷酸胞苷二钠在有机磷中毒后迟发性神经病中的应用.中国现代药物应用，2007,1:19-20.

130021吉林省人民医院神经内科(胡轶虹 谭兴文 张征骄);吉林大学第一医院神经内科(江新梅)

江新梅