岗梅感冒灵颗粒薄层色谱鉴别方法的研究

黄际薇 麦海燕 江先合

·论著·

岗梅感冒灵颗粒薄层色谱鉴别方法的研究

黄际薇 麦海燕 江先合

目的 建立岗梅感冒灵颗粒的薄层色谱鉴别方法。方法 采用薄层色谱法对岗梅感冒灵颗粒中岗梅、野菊花、板蓝根进行了鉴别。结果 图谱斑点清晰、分离度好，阴性对照无干扰。结论 该方法简便、快速、重现性好，为制订岗梅感冒灵颗粒质量标准提供了参考。

岗梅感冒灵颗粒；薄层色谱法；岗梅；野菊花；板蓝根

岗梅感冒灵颗粒是由岗梅、野菊花、板蓝根等六味药材经水提醇沉而制成的复方中药制剂，具有清热解毒、疏风降火的功效，临床上主要用于感冒及上呼吸道感染。岗梅根含三萜皂苷、内酯(或香豆精)、少量生物碱[1-4]。野菊花含有野菊花内酯、矢车菊苷、野菊花三醇、野菊花酮、苏格兰蒿素A、艾尼罗依莱肩定素、野菊花醇等，尚含刺槐素、木犀草素、木犀草素-7-葡萄糖苷、刺槐素-7-O-β-D-吡喃半乳糖苷、刺槐素-7-鼠李糖-葡萄糖苷、蒙花苷等[5]。板蓝根含靛苷、β-谷甾醇、靛红、板蓝根结晶乙、板蓝根结晶丙、板蓝根结晶丁、氨基酸有精氨酸、脯氨酸、谷氨酸、酪氨酸、γ-氨基丁酸、缬氨酸和亮氨酸、芥子苷[6,7]。游离氨基酸的总量为生药量的8.749%，水解氨基酸的总量为13.292%，精氨酸的含量高达5.5%以上，从整体上看，氨基酸可能是板蓝根中的一个主要有效成分[5]。本研究采用薄层色谱鉴别方法对岗梅感冒灵颗粒中岗梅、野菊花、板蓝根进行定性鉴别，为制订岗梅感冒灵颗粒质量标准提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器 电子分析天平(瑞士Precisa)；CQ-10超声波清洗器(功率：150W，广州经济技术开发区明珠电器有限公司)；三用紫外仪(ZF-2型，上海市安亭电子仪器厂)；电热恒温水浴锅(H·S·G·IB2，宁波自动化仪表厂)；理化干燥箱(LG050B，上海市实验仪器总厂)；2 μl、3 μl、5 μl定量毛细管(广州市药品检验所提供)；硅胶G板(青岛谱科分离材料有限公司)；聚酰胺薄膜(国药集团化学试剂有限公司)；95%乙醇、正丁醇、冰醋酸、茚三酮、甲醇、乙酸乙酯、丁酮、三氯甲烷、甲酸、三氯化铝、无水乙醇、甲苯为分析纯，水为纯净水。

1.2 材料 岗梅对照药材(批号：121152-201103)、野菊花对照药材(批号：120995-201105)、板蓝根对照药材(批号：121177-201105)，蒙花苷对照品(批号：111528-201107)、精氨酸对照品(批号：872-200204)，均购自中国药品生物制品检定所；岗梅药材(广西，批号：20121120)、岗梅药材(广东，批号：20121103)野菊花药材(批号：20121125)、板蓝根药材(批号：20121105)，为巿售药品，均购自广州市药材公司，是用于制备岗梅感冒灵颗粒的原料，岗梅感冒灵颗粒样品由本院制剂室提供。

2 方法与结果

2.1 岗梅的薄层色谱鉴别[8]

2.1.1 岗梅感冒灵颗粒供试品溶液的制备 称取岗梅感冒灵颗粒7.5 g，加水30 ml水浴加热回流提取2 h，过滤，滤液加乙酸乙酯萃取2次，25 ml/次，合并乙酸乙酯液，置水浴上浓缩至1 ml，作为岗梅感冒灵颗粒供试品溶液。

2.1.2 岗梅对照药材溶液的制备 称取岗梅对照药材5 g，加水30 ml水浴加热回流提取2 h，过滤，滤液加乙酸乙酯萃取2次，每次25 ml，合并乙酸乙酯液，置水浴上浓缩至1 ml，作为岗梅对照药材溶液。

2.1.3 缺岗梅阴性对照溶液的制备 按处方工艺制备缺岗梅的阴性制剂，按2.1.1项下供试品溶液制备方法制得缺岗梅阴性对照溶液。

2.1.4 薄层鉴别 用5 μl定量毛细管分别吸取岗梅感冒灵颗粒供试品溶液、岗梅对照药材溶液、岗梅阴性对照溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(10 ∶ 3 ∶ 1)为展开剂，展开，取出，晾干，浓氨溶液熏蒸后置紫外光灯(365nm)下检视。结果，色谱图中，供试品在与岗梅对照药材相应位置上显示出相同蓝色的斑点，缺岗梅的阴性对照溶液无干扰，岗梅药材(广西)为制剂原药材。色谱图见图1所示。

图1 岗梅薄层色谱鉴别图谱

1.岗梅感冒灵颗粒；2.岗梅对照药材；3.岗梅药材(广西)；4.岗梅药材(广东)；5.岗梅阴性对照

2.2 野菊花的薄层色谱鉴别[9]

2.2.1 岗梅感冒灵颗粒供试品溶液的制备 取岗梅感冒灵颗粒研钵研细，称取粉末1.2 g，加甲醇20 ml，超声处理30 min，放冷，滤纸过滤，取滤液作为供试品溶液。

2.2.2 野菊花对照药材溶液的制备 称取野菊花对照药材0.3 g，加甲醇20 ml，超声处理30 min，放冷，滤纸过滤，取滤液作为野菊花对照材溶液。

2.2.3 蒙花苷对照品溶液的制备 称取蒙花苷对照品，加甲醇制成每1 ml含0.2 mg的溶液，作为蒙花苷对照品溶液。

2.2.4 缺野菊花阴性对照溶液的制备 按处方工艺制备缺野菊花的阴性制剂，按2.1.1项下供试品溶液制备方法制得缺野菊花阴性对照溶液。

2.2.5 薄层鉴别 用3 μl定量毛细管吸取岗梅感冒灵颗粒供试品溶液、野菊花对照药材溶液、蒙花苷对照品溶液、缺野菊花阴性对照溶液各3 μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水(15 ∶ 15 ∶ 6 ∶ 4 ∶ 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝溶液，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果，色谱图中，供试品与野菊花对照药材和蒙花苷对照品相应的位置上，显示出相同黄色的荧光斑点，缺野菊花的阴性对照无干扰。色谱图见图2所示。

图2 野菊花薄层鉴别图谱1.蒙花苷对照品；2.野菊花对照药材；3.野菊花药材；4.野菊花阴性对照；5-7岗梅感冒灵颗粒

2.3 板蓝根的薄层色谱鉴别[9]

2.3.1 岗梅感冒灵颗粒供试品溶液的制备 取岗梅感冒灵颗粒研钵研细，称取粉末3 g，加稀乙醇20 ml，超声处理20 min，滤纸过滤，滤液蒸干，残渣加稀乙醇2 ml使溶解，即得供试品溶液。

2.3.2 板蓝根对照药材溶液的制备 称取板蓝根对照药材1 g，加稀乙醇20 ml，超声处理20 min，滤纸过滤，滤液蒸干，残渣加稀乙醇2 ml使溶解，即得板蓝根对照药材溶液。

2.3.3 精氨酸对照品溶液的制备 称取精氨酸对照品，加稀乙醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液，即得精氨酸对照品溶液。

2.3.4 缺板蓝根阴性样品溶液的制备 按处方工艺制备缺板蓝根供试品，按2.3.1项下供试品溶液制备方法制得缺板蓝根阴性样品溶液。

2.3.5 薄层鉴别 用2 μl定量毛细管吸取岗梅感冒灵颗粒供试品溶液、板蓝根对照药材溶液、精氨酸对照品溶液、缺板蓝根阴性样品溶液各2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(19 ∶ 5 ∶ 5)为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以2%茚三酮试液，105℃加热至斑点显色清晰。结果，色谱图中，供试品在与板蓝根对照药材和精氨酸对照品相应的位置上，显示出相同紫色的斑点，缺板蓝根的阴性对照无干扰。色谱图见图3所示。

图3 板蓝根薄层色谱鉴别图谱

1.精氨酸对照品；2.板蓝根对照药材；3.板蓝根药材；4.板蓝根阴性对照；5-8岗梅感冒灵颗粒

3 讨论

3.1 本实验尝试对岗梅感冒灵颗粒中野菊花、板蓝根和岗梅三味药进行薄层色谱法定性鉴别研究，结果显示图谱中主斑点清晰、阴性对照无干扰，方法简单易行，重现性高，能够达到鉴别目的，可用于岗梅感冒灵颗粒的质量控制。

3.2 在野菊花TLC鉴别实验中，曾尝试采用硅胶G薄层板，分别以氯仿-甲醇(5 ∶ 2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视，结果蒙花苷对照品斑点无法显现。

3.3 中药复方中，每种生药都含有多种化学成分，临床共煎过程中，可能产生挥发、分解、助溶、吸附、水解、取代、中和、沉淀等一系列十分复杂的化学物理变化，这些变化直接影响到制剂的疗效和毒副作用[10]。本实验仅对岗梅感冒灵颗粒中的岗梅、野菊花和板蓝根进行薄层色谱法定性鉴别，各斑点具体代表什么成分有待进一步深入研究。

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Study on the thin layer chromatography of gangmei ganmaoling granules

HUANGJi-wei，MAIHaiyan，JIANGXian-he.

TheThirdAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity，Guangzhou510630，China

Objective To establish a method for the thin layer chromatography(TLC) of Gangmei Ganmaoling granules. Methods The thin layer chromatography(TLC) was used to identify Radix Et Caulis Ilicis Asprellae,Flos Chrysanthemi Indici,Radix Isatidis in Gangmei Ganmaoling granules. Results The TLC figures of Radix Et Caulis Ilicis Asprellae,Flos Chrysanthemi Indici,Radix Isatidis were distinct with good resolution and no disturbance negative group. Conclusion The method is simple,rapid,reproducible, and provides reference for the formulation of gangmeiganmailing quality standard.

Gangmei Ganmaoling granule；Thin layer chromatography(TLC)；Radix Et Caulis Ilicis Asprellae；Flos Chrysanthemi Indici；Radix Isatidis

广州巿计划项目科技攻关专项(项目编号：2012J4300071)

510630广州，中山大学附属第三医院