气相色谱法测定甘油乙醇洗手液中甘油和乙醇含量＊

2013-09-14陈小勇蒙小丽彭其胜吴淑梅

中国药业 2013年14期

陈小勇，蒙小丽，彭其胜，吴淑梅

(1.重庆市涪陵中心医院，重庆 408000; 2.重庆市涪陵区妇幼保健院，重庆 408000)

甘油乙醇洗手液为正在研制的手消毒制剂，用于临床医护人员手部，明显节约时间，尤其在劳动强度大、病情危重、病情变化快的重症监护室，将为患者赢得抢救、治疗、护理时间[1]。为了有效控制制剂质量，保障临床消毒安全，笔者建立了同时测定甘油乙醇洗手液中甘油和乙醇含量的气相色谱(GC)法。现报道如下。

1 仪器与试药

岛津2010型气相色谱仪;AOC－20i型自动进样器;氢火焰离子化检测器。甘油乙醇洗手液(医院自制，规格为每袋100 mL，甘油和乙醇体积分数分别为3%和75%，批号分别为20110517，20110607，20110628);其余试剂为分析纯或色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:HP －Innowax毛细管柱(30 m ×0.53 mm，1.0 μm;柱温:起始温度为100℃，维持3 min，以100℃ /min的速率升温至240℃，维持7 min;分流比:20∶1;进样口温度:250℃;检测器温度:300 ℃;进样体积:1.0 μL;柱流速:6 mL/min;氢气:30 mL/min;空气:300 mL/min;尾吹:20 mL/min。

2.2 溶液制备

精密称取正丙醇60 g，置100 mL容量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得内标溶液。取乙醇60 g和甘油3.8 g，精密称定，置同一100 mL容量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液。精密量取样品10.0 mL，置25 mL容量瓶中，精密量取内标溶液10.0 mL，加水稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。精密量取对照品贮备液10.0 mL，置25 mL容量瓶中，精密量取内标溶液10.0 mL，加水稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

2.3 方法学考察

系统适用性试验:取2.2项下方法制备的乙醇对照品溶液、甘油对照品溶液、内标(正丙醇)溶液各1.0 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，见图1。可见，甘油、内标与乙醇的分离度良好。

图1 系统适用性试验色谱图

线性关系考察:精密量取2.2项下对照品贮备液5，8，10，12，15 mL，分别置25 mL容量瓶中，分别加内标溶液10 mL，加水稀释至刻度，摇匀，即得系列对照品溶液。照拟订色谱条件进样，记录色谱峰面积，以各组分质量浓度为横坐标、各组分峰面积与内标峰面积之比(As/Ai)为纵坐标进行线性回归，得回归方程，乙醇为Y=24.068X－0.064 2(r=0.999 6，n=5)，甘油为Y=0.485 8X+0.000 2(r=0.9992，n=5)。结果表明，乙醇和甘油质量浓度的线性范围分别为0.12～0.36g/L和0.0076～0.0228g/L。

精密度试验:分别精密量取供试品溶液和对照品溶液1 μL，注入气相色谱仪，记录色谱峰面积，按内标法计算样品含量。结果乙醇和甘油平均含量分别为3.03%和75.24%，RSD分别为0.32%和0.21%(n=6)，表明方法精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，分别于室温放置0，1，2，4，8 h时精密量取1.0 μL进样，结果乙醇和甘油平均含量分别为3.03%和 75.23%，RSD分别为 0.28%和 0.14%(n=5)，表明供试品溶液在8 h内稳定。

检出限与定量限确定:用逐步稀释法进行测定，以信噪比约为3时计算检出限，以信噪比约为10时计算定量限。结果乙醇、甘油的检出限分别是 2.64 μg/mL 和 11.79 μg/mL，定量限分别是 8.71 μg/mL 和 38.91 μg/mL。

加样回收试验:精密量取已知含量的样品溶液5 mL共9份，分别置25 mL容量瓶中，每3份中分别加入对照品贮备溶液4.0，5.0，6.0 mL，用水稀释到刻度，摇匀。精确进样 1.0 μL，每份进样2次，测出其峰面积，计算平均回收率。结果见表1。

2.4 样品含量测定

依法对3批样品中乙醇和甘油含量进行测定。结果见表2。

表1 加样回收试验结果(n=9)

3 讨论

气相色谱法具有高柱效、高灵敏度、用量少、分析速度快等优点，尤其适合挥发性成分的测定[2]。鉴于乙醇与水、甘油能任意混溶，且乙醇具有挥发性，曾尝试采用指示剂法测定甘油[3]和乙醇含量[4]，但由于乙醇和甘油的相互干扰，即使用空白试验校正，滴定结果仍然误差较大。

文中建立了气相色谱直接进样法测定甘油乙醇洗手液中乙醇和甘油的含量。由于乙醇和甘油的沸点相差很大，因此采用程序升温，可以同时检测乙醇和甘油;且采用正丙醇作为内标，进行内标法测定，结果更准确。经验证，该方法的峰形、理论板数、分离度、检出限、定量限、重复性、线性关系等均能满足分析要求，测定结果与配制处方结果一致。