人乳头状瘤病毒L 1壳蛋白对宫颈癌前病变及宫颈癌的诊断价值分析

陆 萍 祖木热来提·艾尼瓦尔 焦 桢 玛依努尔·尼牙孜

新疆维吾尔自治区人民医院妇科，新疆乌鲁木齐 830001

宫颈癌是威胁女性生命健康的第2大恶性肿瘤，发病率仅次于乳腺癌[1]，每年我国宫颈癌的新发病例和病死数分别为13.5万人和5万人[2]。近些年来宫颈癌的发病率呈现逐年上升。HPV病毒感染的患者患子宫颈癌的相对危险性比没有感染HPV病毒的妇女相比增加250倍[3]。宫颈上皮内瘤变（CIN）病变程度反映了宫颈癌发生发展的连续过程，因此探索一种准确的筛查指标与方法对宫颈癌的早期防治有重要意义，L1蛋白是近年来研究HPV感染状态的有效指标[4]，本研究试图通过免疫组化法检测HPV L1蛋白在不同宫颈病变过程的表达情况，旨在探讨HPV L1蛋白对各级CZN和宫颈癌的检出价值及与宫颈癌发展的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2011年1月～2013年1月新疆维吾尔自治区人民医院 （以下简称 “我院”）妇科就诊的高危型HPV阳性的宫颈病变患者171例作为研究对象，患者年龄 22～65 岁，平均（37.9±4.3）岁，维吾尔族 72 例，哈萨克族8例，汉族78例，回族13例。其中慢性宫颈炎 23例，CIN1 21例（CINⅠ48例、CINⅡ34例、CINⅢ39例），宫颈癌患者27例。所有患者均经病理学诊断，且均无宫颈锥切、子宫切除、放化疗史。

1.2 实验方法

运用免疫组织化学的方法在石蜡包埋组织切片上检测HPV病毒DNA中的Ll壳蛋白；HPV L1壳蛋白检测试剂盒采用美国爱迪旺斯医疗科技有限责任公司生产的赛泰-细胞/组织人乳头瘤病毒检测试剂盒[5]，严格按照其说明书进行操作；HPV Ll壳蛋白表达阳性以显微镜下阅片有1个被红染的细胞核即可诊断[6]。

1.3 统计学方法

采用SPSS 16.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearman相关检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 人乳头状瘤病毒Ll壳蛋白在不同宫颈病变组织中的表达情况

171例患者中，HPV L1阳性表达63例，阳性表达率为36.8%；HPV L1蛋白阳性表达率在慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和 SCC五组患者间整体比较，差异有统计学意义（P ＜ 0.05）；炎症组与 CINⅠ组、CINⅢ组、SCC组比较差异有高度统计学意义（P＜0.01）；CINⅠ组与 CINⅡ组、ClNⅢ组、SCC 组比较差异有高度统计学意义（P＜0.01）；其余各组间两两比较，差异均无统计学意义（均 P ＞ 0.05），见表 1；相关性分析显示，HPV L1阳性表达与病理组织分期呈负相关（r=-0.447，P ＜ 0.05），即随着病变程度加重，HPV L1壳蛋白阳性表达率呈下降趋势。

表1 HPV Ll壳蛋白在不同宫颈病变组织中的表达情况[n（%）]

2.2 人乳头状瘤病毒L1壳蛋白在不同宫颈病变中的预测能力的ROC曲线分析

以病理检查结果作为金标准，绘制ROC曲线，可得曲线下面积为 0.799， 标准误为 0.062，95%CI为0.677～0.921，灵敏度为 0.769，特异度为 0.750，诊断价值中等。见图1。

图1 HPV L1壳蛋白在不同宫颈病变中的预测能力的ROC曲线

3 讨论

宫颈癌是女性常见恶性肿瘤，宫颈癌发生、发展一般经过鳞状上皮增生-不典型增生-原位癌-浸润癌的缓慢过程[7]，HPV是宫颈癌发生的主要危险因素，因此加强女性高危型HPV的筛查，有利于早期发现宫颈癌并及时采取积极有效的治疗措施，进而降低宫颈癌的病死率。L1壳蛋白具有较强的免疫原性，可诱导机体产生HPV的中和抗体[8]。HPV感染可以分为病毒的复制和病毒转化两个阶段，HPV首先侵入上皮基底细胞，裸露的病毒DNA在宿主细胞核内呈游离状态。基底细胞分化时病毒DNA开始复制，利用该细胞的胞质合成病毒的L1壳蛋白。病毒的复制期和L1壳蛋白的表达是HPV感染的早期阶段，主要在细胞核表达，此阶段可检测出HPV L1蛋白的表达。

HPV L1壳蛋白检测最初是用来检测HPV感染，筛查宫颈癌。有研究通过对20例低度鳞状上皮内病变 （LSIL）、40例高度鳞状上皮内病变 （HSIL）、3例SCC高危型HPV L1蛋白检测，其阳性表达率分别为30%、12%和0，结果显示随着宫颈病变程度的增高，HPV L1蛋白阳性表达率下降[9]。Negri等[6]通过对66例标本中HPV L1表达检测，发现联合检测HPV Ll蛋白和 p16 因子能预测 CIN 的进展，L1（-）／p16（+）提示子宫鳞状上皮内瘤变具有较高的向恶性进展的危险性。Rauber等[10]通过分析279例高危型HPV感染患者HPV L1衣壳蛋白表达，结果发现HPV L1蛋白阳性在预测宫颈鳞状细胞病变的进展中有着重大的意义，尤其是年龄低于30岁的女性。宋晓霞[11]通过对559例HPV阳性患者运用免疫组化的方法检测HPV L1壳蛋白，结果显示L1壳蛋白阳性表达率随着宫颈组织病理学级别的升高，HPV L1壳蛋白阳性表达率呈现下降趋势（χ2=147.527，P<0.001） 。 Griesser等[12]通过采用免疫组化方法对84例高危型HPV标本中的HPV L1衣壳蛋白进行检测，结果发现HPV L1衣壳蛋白有预测早期非典型病变预后的意义。本研究结果显示，在171例患者中，HPV L1阳性表达63例，阳性表达率为36.8%；其中在慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC组患者的HPV L1蛋白阳性表达率分别为 73.9%、66.7%、35.3%、5.1%和 0.0%；HPV L1蛋白阳性表达率在五组患者间整体比较，差异有统计学意义 （P<0.05）；随着病变程度加重，HPV Ll壳蛋白阳性表达率呈下降趋势，这与郭晓东等[13]的研究结果一致。

HPV L1壳蛋白检测作为新近发现的一种可以预测宫颈HPV感染预后的生物分子标志物，可以作为子宫颈病变诊断及进一步评估进展风险的有效指标，值得临床推广应用。

[1]赵金娟.高危型HPV检测联合肉眼醋酸试验在宫颈癌前病变筛查中的应用[J].中国医药导报，2012，9（1）：88-89.

[2]杨娟.高危型HPV负载量与宫颈癌前病变发展的相关性[J].实用癌症杂志，2012，27（6）：117-119.

[3]张宏珍.宫颈细胞学检查为意义不明确的非典型鳞状细胞患者的分流处理探讨[J].重庆医学，2012，41（6）：14-16.

[4]Griesser H，Sander H，Hilfrich R，et al.Correlation of immunochemical detection of HPV L1 capsid protein in pap smears with regression of high-risk HPV positive mild/moderate dysplasia [J].Anal Quant Cytol Histol，2009，26 （5）：241-245.

[5]肖巍.子宫颈液基细胞学检查异常的涂片中人乳头瘤病毒Ll蛋白的表达及其意义[J].中华妇产科杂志，2008，44（12）：43-48

[6]Negri Q,Bellisano G,Zannoni GF，et al.p16 in k4a and HPV L Iimmunohistochemistry is helpful for estimating the behavior of low-grade dysplastic lesions of the cervixuteri[J].Am J Surg pathol，2010，32（11）：17l5-l720.

[7]贾咏.HPV LI检测在宫颈人乳头状瘤病毒感染预后判定中的作用[J].宁夏医学杂志，2010，32（8）：688-690.

[8]黄斌.HPV L1壳蛋白与hTERC基因检测及联合分析对宫颈癌筛查的意义[J].华中科技大学学报：医学版，2010，39（4）：554-557.

[9]蒋雪梅，肖长义.HPV L1病毒样颗粒疫苗诱导机体免疫反应的研究现状[J].医学综述，2008，14（15）：2244-2248.

[10]Rauber D，Mehlhorn G，Fasching PA，et al.Prognostic significance of the detection of human papilloma virus L1 protein in smears of mild to moderate cervical intraepithelial lesions[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol，2008，140（2）：258-262.

[11]宋晓霞.HPV L1壳蛋白与hTERC基因检测在子宫颈病变诊断中的应用[D].郑州：郑州大学，2012.

[12]Griesser H，Sander H，Hilfrich R，et al.Correlation of immunochemical detection of HPV L1 capsid protein in pap smears with regression of high risk HPV positive mild/moderate dysplasia [J].Anal Quant Cytol Histol，2009，26（9）：241-245.

[13]郭晓东，牛柯，赵景民，等.HPV主要衣壳蛋白在宫颈液基细胞学检查异常涂片中的表达及临床意义[J].河北医学，2011，17（11）：1421-1423.