155例血培养金黄色葡萄球菌耐药分析

郝秀红，赵强元，郭建巍，李艳君，钱扬会，刘力娟

海军总医院 检验科，北京 100048

金黄色葡菌球菌(staphylococcus aureus)是临床最常见的致病菌，主要引起皮肤及软组织化脓性感染，当宿主免疫功能低下时，该菌可侵入机体引起呼吸道等感染，严重者可致败血症。文献报道[1-3]耐甲氧西林金黄色葡菌球菌(methicillinresistant staphylococcus aureus，MRSA)的分离率呈逐年增高趋势，尤其是该菌引起的感染位居革兰阳性菌检出率榜首[4-7]，因此了解我院血培养中金葡菌感染分布和耐药状况，加强对MRSA的检测，对于控制和预防院内感染的流行及指导临床治疗具有重要意义。

材料和方法

1 材料 菌株来源：155株金黄色葡萄球菌分离自2003-2011年从本院临床送检的血培养标本。细菌分离鉴定按照《全国临床检验操作规程》进行。质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC25923。仪器与试剂：血培养瓶为北京伯泰技术开发中心产品；BacT ALERT 3D血培养仪、VITEK微生物分析仪及GPI卡和药敏培养基为法国生物梅里埃产品；BIOMIC药敏测试仪为威士达公司产品。药敏纸片部分购于中国天坛生物制品鉴定所，部分为英国OXOID产品。抗生素：利奈唑胺((LNZ)、万古霉素(VAN)、苯唑西林(OXA)、阿齐霉素(AZM)、呋喃妥因(NIT)、复方新诺明(SXT)、四环素(TCY)、头孢唑啉(CZO)、环丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LVX)、克林霉素(CLX)、红霉素(ERY)、青霉素(PEN)。数据分析：病原菌耐药性分析采用WHONET5.4软件进行分析。

2 方法 无菌条件下采集静脉血，成人8~10 ml、儿童3~5 ml、婴幼儿1~2 ml，注入相应可中和抗生素的血培养瓶，置BacT/ALERT 3D血培养仪中进行连续振荡培养和监测，仪器报警有阳性瓶时，立即转种于中国兰和血平板(如厌氧瓶报警同时转种厌氧血平板)，置35℃培养24~48 h，有菌生长则继续鉴定，接种同时作涂片染色；如5 d仪器未报阳性，则按阴性报告。

结 果

1 MRSA检出情况 从2003-2011年我院血培养检出革兰阳性球菌604株，金葡菌155株，其中MRSA 110株，MRSA在金葡菌中平均发生率为70.9%，每年检出情况见表1。

2 金葡菌耐药情况 2007年以前金葡菌所做药敏抗生素种类有7种，2007年增至9种，2008年以后增加到12种。几年来一直沿用的万古霉素对金葡菌敏感性较好，没有发现耐药株；对呋喃妥因敏感性次之，平均耐药率为2.0%，对青霉素平均耐药率最高为93.9%，对其他几种抗生素耐药情况见表2。

3 金葡菌多药耐药情况 金葡菌对抗生素的多药耐药以七重耐药平均检出率最高，其中MRSA多药耐药率明显高于甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin sensitive staphylococcus aureus，MSSA)，检出情况见表3。

表1 血培养中金葡菌检出情况Tab.1 Staphylococcus aureus detected in blood culture

表2 2003-2011年血培养中金葡菌耐药情况Tab.2 Drug resistance of Staphylococcus aureus in blood culture from 2003 to 2011

表3 血培养中155株金葡菌对常用抗生素多重耐药情况Tab.3 Multiple drug resistance of 155 Staphylococcus aureus srains to commonly used antibiotics from 2003 to 2011(n, %)

讨 论

金葡菌在血培养中分离率较高，多年来该菌一直位居我院前3位[8]，仅次于大肠埃希氏菌和表皮葡萄球菌。统计显示连续9年金葡菌和MRSA在我院血培养检测中的检出数量除个别年份(2005年和2007年)外，呈逐年增长趋势，尤其是2008年以后增长较为明显，但每年MRSA在金葡菌中的发生率有所不同，9年来我院血培养中MRSA平均发生率为70.9%，2005-2008年MRSA发生率相对较低。金黄色葡萄球菌体外药敏试验显示，多年来万古霉素、利奈唑胺对其敏感性较好，没有发现耐药株，是治疗MRSA重症病人的首选药物，呋喃妥因对金葡菌的敏感性次之，2008-2011年耐药率均在10%以下，平均耐药率为2.0%；复方新诺明对金葡菌的耐药率(除2009年外)9年来均在40%以下，平均耐药率为25.7%；青霉素耐药率连年高达80%以上，平均耐药率为93.9%，几乎无抗菌活性；金葡菌对常用抗生素的耐药性从低到高依次为利奈唑胺、万古霉素、呋喃妥因、复方新诺明、四环素、左氧氟沙星、克林霉素、环丙沙星、头孢西丁、头孢唑啉、阿齐霉素、红霉素、青霉素。表3显示金葡菌对抗生素常呈现多药耐药，以七重耐药率最高，占21.6%。MRSA和MSSA相比，二者对多药耐药有明显的差别，MRSA对各类受试抗菌药物的多药耐药率较MSSA显著升高，前者以八重耐药最高(34.6%)，后者以一、二重耐药最高(41.5%)。

MRSA的多药耐药已成为临床治疗金葡菌感染的一大难题，虽然目前我院万古霉素对金葡菌抗菌活性较好，无耐药性，但近年来国外陆续出现的万古霉素中介和耐药的金葡菌随时让我们提高警惕，特别是国内己出现异质性耐万古霉素葡萄球菌感染的报道[9]，应引起临床足够的重视。

1 Panlilio AL， Culver DH， Gaynes RP， et al. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in U.S. hospitals， 1975-1991［J］. Infect Control Hosp Epidemiol， 1992， 13（10）： 582-586.

2 NNIS System. National Nosocomial Infections Surveillance （NNIS）System Report， data summary from January 1992 through June 2003，issued August 2003［J］. Am J Infect Control， 2003， 31（8）：481-498.

3 李家泰，齐慧敏，李耘. 2002-2003年中国医院和社区获得性感染革兰阳性细菌耐药监测研究［J］.中华检验医学杂志，2005，28（3）：254-265.

4 楼玲莉，杨莹，吴都．综合重症监护病房病原菌分布及耐药情况分析［J］.现代实用医学，2011，23（6）：667-669．

5 郝秀红，陆季蘅，马骢，等. 2007年我院细菌耐药性监测［J］.军医进修学院学报，2009，30（4）：495-497.

6 简翠，孙自镛，张蓓，等．2008年武汉同济医院细菌耐药性监测［J］.中国感染与化疗杂志，2009，9（6）：421-426．

7 王贺，张小江，刘文静，等．2009年北京协和医院细菌耐药性监测［J］.中国感染与化疗杂志，2011，11（3）：161-167．

8 郝秀红，马骢，陆季蘅，等．血培养分离菌5年变迁与耐药性分析［J］.军医进修学院学报，2009，30（2）：158-160．

9 谢忆虹，彭梅，糜祖煌，等．一株携带VanB基因的异质性耐万古霉素表皮葡萄球菌的发现［J］.中国医院药学杂志，2006，26（5）：582-585．