室内质控和室间质评在微生物检验中的应用分析

苏新娣

室内质控和室间质评是进行临床微生物检验质量控制的两个大关键环节，室间质评需要在室内质控的基础进行，其水平的高低不仅反映实验室标本鉴定能力高低的一种重要指标，更是提高检验人员工作能力、提高室内质控工作的重要保证[1]。为进一步提高实验室标本鉴定检测质量，同时为其他相关单位提供有益借鉴，本研究总结并分析了本实验室的微生物实验室室间质评结果。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 室间质评标本来源于X省临床检验中心，时间跨度为 2007～2011 年，共 125 株质控菌株，其中 5 株转种失败。本实验室的仪器和试剂主要包括API微生物临定系统、全自动微生物分析仪、药敏试纸、微量生化管以及成品干粉培养基，仪器和试剂均完全符合相关规定，满足实验操作要求。

1.2 方法 所有菌株的鉴定依照临床标本的鉴定要求。依照不同标本转种不同培养基，依照国家标准培养温度，将鉴定标本分别放置于（36±1）℃环境当中[2]，标本放置 24 h，对菌落形态进行认真观察并记录，如果某些细菌生长不良，则可以根据实际情况适当延长培养时间。革兰染色之后对菌体形态进行认真观察，通过菌落形态以及染色性来对其进行初步鉴定，利用API微生物临定系统或者是全自动微生物分析仪对分纯之后的细菌进行全面鉴定；需要进行手工鉴定的个别菌株参照（《全国临床检验操作规程（第 3 版）》，中华人民共和国卫生部医政司编著）当中的相关规定执行[3]。抗生素敏感试验的参照标准为美国临床和实验室标准协会（CLSI）标准[4]，采用全自动微生物分析仪、ATB试条或者是药敏试纸扩散法进行检测。

2 结果

2007～2011 年共接受 125 株质控菌株（5 株转种失败）；其中 120 株菌株当中鉴定失误 12 株（12/120，10.0%），鉴定正确 108 株（90.0%，108/120），其中革兰阴性球菌鉴定符合率 100%（11/11），革兰阴性杆菌符合率 92.2%（59/64），革兰阳性杆菌符合率 76.0%（38/50）；108 株菌株进行抗菌素敏感试验，总符合率为 94.4%（102/108），革兰阳性球菌的药敏符合率 94.1%（48/51），革兰阴性杆菌的药敏符合率为 94.7%（54/57）；其中 6 株鉴定失误，失误率为 5.6%（6/108），青霉素为失误率最高的抗菌素，失误率为 50.0%（3/6）。细菌鉴定失误原因分析见表 1。

表1 细菌鉴定失误结果及其原因分析（n=12）

3 讨论

微生物实验室室间质评鉴定失误原因如下。首先，鉴定手段不完善。诊断血清不全，导致病牛沙门菌等鉴定错误。流感嗜血杆菌的鉴定用手工法是比较容易的，由于当时无X因子和V因子，加上过于依赖仪器，最后得出错误结论[5]。其次，认知不足。如有些芽孢杆菌需培养 72 h以上才可见芽孢，若取培养 24 h的菌落做革兰染色必然产生鉴定的方向性错误；革兰染色是细菌鉴定中最基本最简单的试验之一，也是最重要的鉴定步骤，如将C群链球菌错检为溶血隐秘杆菌就属此。最后，室内质控不到位。靛基质试验、氧化酶试验、血浆凝固酶试验是细菌鉴定最基本也是最重要的几个试验，应每周用标准菌株进行监测，防此试剂失控，本室早期对此重视不足，致使出现新型隐球菌错误鉴定为白色隐球菌等错误鉴定。在药敏试验方面，青霉素属于不稳定的药物，本室对其监测不严，加之无低温冰箱导致保存不当，故错误率较高；其次药敏纸片质控不严导致其余药敏试验失误的原因，所以，日常工作中严格规范的操作，做好药敏纸片室内质量控制，不合格的纸片及时报废处理[6]，并做好记录，购买时要做好计划，不宜购买过多，另购买药敏纸片时不要选择在炎热的夏天购买，否则会造成一些药敏纸片失效，并且建议选择一些药敏纸片种类齐全的有资质的厂家，便于监控。

要解决以上问题，首先，微生物室的专业技术人员要不断进行知识更新，人员要相对稳定，稳定便于经验的积累，只有及时地了解和掌握新的理论知识与先进的检测技术，才能够不断提高检测水平。其次，微生物室要不断完善检测手段。要加强与临床的联系，了解其需求，开设更多的新检测项目，以提供更准确、更快捷、更完善的报告服务于临床。最后，室内质量控制制度和SOP文件建立后必须严格执行，在执行的过程中要不断的对其进行修订和完善。

总之，实验室菌株鉴定、药敏试验均会出现一定的失误，导致实验室细菌鉴失误的原因较多，为了提高微生物实验室的常规工作水平、细菌学诊断水平、质量控制水平以及工作人员专业能力水平，非常有必要开展微生物室间质量评价工作。

[1]牛华，王天朝，谢颖夫，等.室内质控实时在线监控方案的设计和实施[J].临床检验杂志，2011，29（7）：490-491.

[2]万腊根，张世锟，胡意，等.两种方法设置室内质控限值时室内质控的结果分析[J].国际检验医学杂志，2011，32（6）：692-693，695.

[3]卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M].南京：东南大学出版社，2006：30.

[4]Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) Performance goals for the internal quality control of multichannel hematology analyzers;Approved Standard H26-A.940 1996

[5]虎淑妍.微生物实验室 5 年室间质评结果总结分析[J].国际检验医学杂志，2012，33（15）：1869-1870.

[6]阎金香，徐超，周晓沪，等.临床生化检验室间质控三年结果的评价[J].新疆医科大学学报，2009，32（6）：739-740，743.