2006-2011年我院铜绿假单胞菌分布及耐药性分析

丁毅伟，郝秀红，赵强元，李艳君，钱扬会，李晓燕

海军总医院 检验科，北京 100048

铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa，PAE)主要分布于自然界、人体皮肤、肠道及呼吸道等部位，是医院获得性感染的主要病原菌之一，尤其长期住院病人易感染该菌[1]。近年来随着广谱抗生素、化疗药物、免疫抑制剂的大量使用，使得该菌耐药性明显上升[2-4]；多重耐药和泛耐药现象日益突出，给医院感染控制和临床治疗带来极大的困难。因此了解铜绿假单胞菌的临床分布及耐药变迁，有利于临床的感染控制和治疗，现对我院近6年铜绿假单胞菌临床分布和耐药性作回顾性分析。

材料和方法

1 菌株来源 2006年1月-2011年12月住院及门诊患者送检的痰液、血液、尿液等标本中分离的铜绿假单胞菌1 504株(患者首次分离株)。

2 仪器与试剂 法国梅里埃生产的BacT/Alert 3D血培养仪、VITEK2 COMPACT微生物分析仪及其配套GN鉴定卡，AST-GN09药敏卡；药敏纸片部分购于中国天坛生物制品鉴定所，部分为英国OXOID产品；质控菌株铜绿假单胞菌ATCC 27853购自卫生部临检中心；各种分离培养基购自天津市金章科技发展有限公司。

3 抗生素 哌拉西林(PIP)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、头孢哌酮(CFP)、头孢呋辛酯(CXA)、头孢他啶(CAZ)、头孢吡肟(FEP)、氨曲南(ATM)、亚胺培南(IPM)、美洛培南(MEM)、阿米卡星(AMK)、妥布霉素(TOB)、环丙沙星(CIP)、氧氟沙星(OFX)、多粘菌素B(PB)、头孢哌酮/舒巴坦(SCF)。

4 方法 严格按《全国临床检验操作规程(第3版)》进行标本采集与细菌分离培养；按VITEK2 COMPACT操作说明进行菌株鉴定；2010年之前药敏试验采用K-B法，2010年之后药敏实验应用VITEK2 COMPACT分析仪进行，采用MIC法判定药物敏感程度。

5 数据分析 用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的WHONET5.6软件和Excel进行数据分析。

结 果

1 铜绿假单胞菌临床分离率 2006-2011年分离铜绿假单胞菌(PAE)1 504株(患者首次分离株)，其中2010年分离率最高，占总检出量的18.9%。各年度菌株分离率及变化趋势见表1。

表1 2006-2011年铜绿假单胞菌分离率Tab. 1 Isolation rates of pseudomonas aeruginosa from 2006 to 2011

2 标本分布 2006-2011年铜绿假单胞菌均以痰液的分离率最高，且明显高于其他标本来源，占标本来源总量80%左右，其次是尿液。各年度各类标本中铜绿假单胞菌的分离率见表2。

3 科室分布 2006-2011年铜绿假单胞菌分离率以高压氧科最多(占26%)，其次是呼吸内科和ICU，分别占12.0%和11.4%。此菌在前十位科室中的分布情况见表3。

4 2006-2011年铜绿假单胞菌对15种抗菌药物的药敏情况 多粘菌素B(PB)和头孢哌酮/舒巴坦(SCF)有较好的药物敏感活性，而头孢呋辛酯(CXA)则表现出较强的抗药性，见表4。

讨 论

近6年的统计表明，我院2010年铜绿假单胞菌分离率最高，占18.9%。分离的铜绿假单胞菌从2006年的209株上升至2010年的285株，分离率也从2006年的13.9%上升至2010年的18.9%，菌株数量及分离率均呈逐年上升趋势。连续6年中每年均以痰检出铜绿假单胞菌位居第一，共1 226株，平均占81.5%，这与邹自英等[5]报道一致，说明此菌容易引起呼吸道感染。铜绿假单胞菌易引起人体多部位感染，可能与其分布广范，在自然界例如水、土壤、空气，正常人皮肤表面以及医院的内环境都存在有关[6]。科室以高压氧科最多占26%，其次是呼吸内科和ICU占12%和11.4%，合计49.4%。高压氧科感染率高于其他科室的主要原因，可能是送检率相对其他科室高。有报道分析上述科室患者大多病情较重、免疫力很低，接受气管切开、留置胃管、机械通气、导尿管等各种侵入性操作导致感染率高，再者免疫抑制剂和超广谱抗菌药物的使用也可导致[7]。

表3 2006-2011年铜绿假单胞菌的科室分布情况Tab. 3 Distribution of pseudomonas aeruginosa in different departments from 2006 to 2011

表4 2006-2011年铜绿假单胞菌对15种抗菌药物的耐药率Tab. 4 Resistance rates of pseudomonas aeruginosa to 15 kinds of antibioticsts from 2006 to 2011(%)

表2 各年度铜绿假单胞菌标本来源分布Tab. 2 Distribution of pseudomonas aeruginosa specimens in 2006-2011(n, %)

6年间分离的铜绿假单胞菌对15种抗菌药物的耐药率结果显示，多粘菌素B和头孢哌酮/舒巴坦有较好的药物敏感活性，与相关文献报道一致[8]。多粘菌素B每年耐药率在10%以下，平均耐药率为3.1%；头孢哌酮/舒巴坦每年耐药率在15%以下，平均耐药率为13.0%，这两种抗菌药是治疗多重耐药的铜绿假单胞菌的优选药物，医院在2008年以后增加了多粘菌素B和头孢哌酮/舒巴坦这两种抗菌药物。其他常用抗生素平均耐药率从低到高依次为FEP 25.9%、CAZ 27.1%、ATM 31.4%、AMK 33.6%、TZP 34.7%、MEM 37.7%、CIP 38.4%、TOB 41.1%、IPM 41.4%、PIP 43.9%、CFP 47.3%、OFX 49.9%、CXA 80.5%，以上13种抗菌药物中头孢呋辛酯耐药性较严重，平均耐药率都在80%以上，提示临床注意，亚胺培南和美洛培南这几年对铜绿假单胞菌耐药性维持在相对稳定的水平，且美洛培南的敏感性高于亚胺培南，究其原因可能与我院铜绿假单胞菌部分菌株OprD缺失相关[9]。

铜绿假单胞菌的耐药机制较为复杂，易引起多重耐药机制[10-12]。此菌可产生很多种广谱β内酰胺酶或氨基糖苷钝化酶，也可通过细胞膜通道蛋白的变异从而导致膜通透性降低，还可通过改变感染的作用靶位、主动外排及生物膜的形成等多种作用机制对抗生素产生耐药。头孢哌酮/舒巴坦因头孢哌酮的抗菌活性较强，舒巴坦可抑制β-内酰胺酶，同时可作用青霉素结合蛋白，所以有较好的药物敏感活性[13]。近年来医院按照卫生部《抗菌药物临床应用指导原则》严格规范临床抗生素用药，将耐药性较高的抗生素分期分批使用，微生物室每季度对临床分离的细菌进行耐药性总结，并发布给各科室，以指导临床合理用药。临床应重视对铜绿假单胞菌的耐药性监测，依据药敏结果合理选用抗菌药物，不滥用抗菌药物，以减少耐药菌株的产生，对遏制铜绿假单胞菌在院内扩散具有重要意义。

1 Söderström M， Vikatmaa P， Lepäntalo M， et al. The consequences of an outbreak of multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa among patients treated for critical leg ischemia［J］. J Vasc Surg， 2009， 50（4）：806-812.

2 肖永红，王进，朱燕，等．Mohnarin 2008年度全国细菌耐药监测［J］.中华医院感染学杂志，2010，20（16）：2377-2383．

3 Zilberberg MD， Chen J， Mody SH， et al. Imipenem resistance of Pseudomonas in pneumonia： a systematic literature review［J］.BMC Pulm Med， 2010， 10：45.

4 陈媛媛，孙志，张学英，等．388株铜绿假单胞菌的耐药性分析［J］.中国实验诊断学，2012，16（2）：336-337．

5 邹自英，朱冰，汤雪晴，等．医院铜绿假单胞菌感染分布与耐药性分析［J］.西南国防医药，2010，20（11）：1216-1218．

6 杨坤，刘俊杰，陈新英．铜绿假单胞菌感染分布及对10种抗生素的耐药性分析［J］.江西医学检验，1999，17（1）：42-43.

7 何建方，沈翠芬，张晓祥，等. 2002-2010年医院临床分离铜绿假单胞菌的分布特征及耐药谱变迁［J］. 中华医院感染学杂志，2012，22（4）：834-837.

8 Barbier F， Wolff M. Multi-drug resistant Pseudomonas aeruginosa：towards a therapeutic dead end?［J］. Med Sci （Paris）， 2010， 26（11）：960-968.

9 何建方，沈翠芬，王伟洪，等. 多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因的检测与分析［J］. 中国卫生检验杂志，2010，20（2）：392-394.

10 宋玉兰，赵丽，申子路，等．铜绿假单胞菌耐药机制研究现状［J］.中华医院感染学杂志，2010，20（6）：898-900．

11 王军，张建菊，刘华，等．铜绿假单胞菌致慢性阻塞性肺疾病患者肺部感染的危险因素及耐药性调查［J］.中华医院感染学杂志，2011，21（3）：457-458．

12 胡琴，陆学东，陈群．铜绿假单胞菌耐药机制研究进展［J］.中华医院感染学杂志，2009，19（3）：358-360．

13 Rafailidis PI， Ioannidou EN， Falagas ME. Ampicillin/sulbactam：current status in severe bacterial infections［J］. Drugs， 2007， 67（13）： 1829-1849.