交叉配血不合原因分析及输血

贾彩虹，刘培贤，李小丽

(1.山西医科大学第二医院，山西 太原 030001;2.阳曲县人民医院，山西 太原 030100)

对拟输血或备血患者进行盐水介质加抗人球蛋白介质交叉配血，在交叉配血时经常会出现凝集，导致配血困难，对出现凝集的结果做出及时、正确的分析和处理，有利于临床输血安全。现对山西医科大学第二医院输血科2012 年8 月至2012 年11 月交叉配血中出现凝集的67 例标本分析如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器 戴安娜专用离心机

1.1.2 试剂 微柱凝胶卡(戴安娜公司);抗体筛查细胞(上海血液生物医药有限责任公司);抗A、抗B血型定型试剂为单克隆试剂(北京金豪制药股份有限公司);人红细胞反定型试剂(上海血液生物医药有限责任公司);所有试剂均检定合格且在有效期内使用。1.1.3 病例来源 资料均为山西医科大学第二医院输血科2012 年8 月至2012 年11 月拟输血或备血患者中交叉配血出现凝集的病例。

1.2 方法

抗人球蛋白介质采用微柱凝胶法(MGT)。MGT交叉配血试验和抗体筛查试验严格按照试剂说明书操作。

1.2.1 交叉配血凝集标本的处理 主侧凝集的标本首先复查血型，做不规则抗体筛查;次侧凝集的标本做红细胞直接抗球蛋白试验。将所配献血员血清进行抗体筛查和鉴定等。

1.2.2 复查血型采用试管法 正反定型，至少包括6支试管(抗A、抗B、Ac、Bc、Oc、自身对照)，对有凝集者镜下观察凝集状态，呈缗钱状凝集的为蛋白凝集，为非抗原抗体特异性凝集。

1.2.3 直接抗球蛋白试验和血型鉴定 按照《免疫血液学》［1］中制定的方法进行。

1.2.4 乙醚放散试验 取经洗涤3 次的受检者压积红细胞1 份加生理盐水1 份、乙醚2 份，剧烈振荡1 ～2 min，然后以3 400 转/min 1 000 g离心2 min。离心后分成3 层，上层是乙醚，中层是红细胞基质，下层是具有抗体的释放液，呈深红色。用吸管吸出底层释放液，置37 ℃水浴10 min(或56 ℃1 min)，除尽乙醚，再3 400 转/min 1 000 g 离心1 min，取上清液即为释放液。用相应细胞和抗人球方法检测放散液中的抗体。

2 结果

2.1 主侧凝集

交叉配血主侧凝集的标本11 例，其中检出不规则抗体7 例(抗M 2 例，抗E 1 例，抗Ec 1 例，未确定特异性2 例，红细胞亚型产生不规则抗体导致凝集1例)，自身免疫性疾病导致的自身抗体1 例，蛋白凝集3 例。

2.2 次侧凝集

交叉配血次侧凝集的标本57 例，其中直接抗球蛋白试验阳性56 例(其中1 例为自身免疫性溶血性贫血导致主侧凝集，直接抗人球蛋白试验也呈阳性)，献血员检出不规则抗体1 例。直接抗球蛋白试验阳性致交叉配血次侧凝集的56 例标本，其中血液科35 例，肾内科4 例，肿瘤生物科4 例，骨科2 例，普外科2 例，风湿科2 例，消化科1 例，呼吸科2 例，泌尿外科1 例，心内科1 例，血管乳腺科2 例。

67 例在输血时经过配合性输注所需红细胞制品均未出现输血不良反应。

3 讨论

引起交叉配血主侧凝集的主要原因是患者血清中存在不规则抗体。不规则抗体是人们在临床实践中发现除抗A 和抗B 之外，其他红细胞血型抗体的存在与否没有规则可循，因此称为不规则抗体。而ABO 系统中的亚型、变异型中的抗A1或某种抗B 等抗体，也称为不规则抗体。在临床输血时如确定了抗体的特异性，选择相对应抗原特异性相同的供者做交叉配血试验;如无特异性则选择ABO 和Rh 抗原同型的供者做交叉配血试验;蛋白凝集常见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、霍奇金病等，如为蛋白凝集，配血时则在患者血清中加等量的生理盐水即可去除干扰;对ABO 血型系统存在不规则抗体或进行骨髓移植后输血，要避开相应抗体进行输血或输注O 型洗涤红细胞。

引起交叉配血次侧凝集的主要原因是直接抗球蛋白试验阳性。直接抗球蛋白试验(DAT)是一种鉴定红细胞是否在体内被免疫球蛋白及补体致敏的简便方法。造成DAT 试验阳性的原因有很多，包括自身抗体与固有的红细胞抗原反应、溶血性输血反应、胎儿和新生儿溶血、药物诱发的抗体、供者血浆和免疫球蛋白被动获得的抗体、非特定吸附的蛋白、细菌感染及自身或同种抗体导致的补体活化等。对于直接抗球蛋白试验(DAT)≥1 +的患者标本应该做乙醚放散试验确定红细胞表面致敏抗体或补体的种类，包括自身抗体、同种抗体、类抗体或药物抗体等。研究统计显示，次侧凝集主要发生在血液病和肿瘤、免疫性疾病、肾脏疾病、肝胆疾病等，这可能与原发病引起机体免疫功能改变，进而激发机体产生自身抗体有关。

在临床输血时，如为自身抗体引起的自身免疫性溶血性贫血，不建议输血，在Hb ＜40 g/L时，可输少量的洗涤红细胞;如确定了同种抗体或类抗体的特异性，选择相对应抗原特异性相同的供者做交叉配血试验;如无特异性则选择ABO 和CcDEe 抗原以及MN 抗原匹配的红细胞输注，以省略复杂的自身吸收等操作，节省时间，使患者得到及时有效的治疗［2］;献血员一般都会经过问询筛选，但在出现次侧凝集找不到原因的情况下也要考虑献血者的抗体情况。本组病例就出现了1 例因献血员抗C 引起的凝集。

另外因IgG 或补体水平上升而导致的DAT 试验阳性的情况，与贫血无关，通常会发生在患有镰状细胞疾病、地中海贫血、肾脏疾病、多发性骨髓瘤、自身免疫紊乱以及其他伴有血清球蛋白或血尿素氮水平升高疾病患者的红细胞上等。

因此，对于交叉配血不合的标本，要从患者和献血员两方面考虑。对于DAT 阳性的解释还应考虑到患者的病史，临床数据以及其他实验室检验结果。遇到直抗阳性的标本，不能简单的认为是自身抗体导致，要结合患者既往病史、输血史、妊娠史认真分析，尤其是近期有输血史的患者，可能存在输血反应，避免输入不相合的血液，从而保证输血安全。

［1］ 刘达庄. 主编. 免疫血液学［M］. 上海:上海科技技术出版社，2002.

［2］ 向 东，刘 曦，王健莲，等. 红细胞温自身抗体的血清学特点分析及配血对策［J］.中国输血杂志，2008，21(12):924-926.