芪芍安胃胶囊的质量标准研究

穆传武

(连云港市中医院，江苏连云港 222004)

芪芍安胃胶囊是本院新研制中药复方制剂，由黄芪、党参、当归、白芍、茯苓、干姜、毕澄茄、香附、白术、陈皮、甘草等组成，具有健脾益气、温中和胃、养血调经的功效，适用于胃隐痛，喜按喜暖，食后胀闷，痞满少食，便溏，乏力，舌质淡红，苔薄白或有齿痕，脉沉细。为了控制该制剂的质量，参考相关文献［1-4］对黄芪、白芍、枸杞子和甘草进行了薄层色谱鉴别，同时采用高效液相色谱法测定了制剂中芍药苷的含量，建立了可靠、准确、专属性强的质量控制方法。

1 仪器与试药

Waters-2695型液相色谱仪，Waters-2996二极管阵列检测器，Empower色谱工作站;色谱柱:Phenomenex C18 Gemini(250 ×4.6 mm，5 μm);芍药苷(批号0736-200219)、黄芪、当归、党参、甘草、陈皮和香附等对照药材均购自中国药品生物制品检定所，芪芍安胃胶囊3批产品由连云港市中医院生产并提供(批号分别为 120510、120904、130203)。甲醇、乙腈为色谱纯，磷酸为优级纯，其他试剂为分析纯。

2 定性鉴别

2.1 黄芪的薄层色谱鉴别 取本品5 g研细，加乙醇50 ml，加热回流20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加0.3%氢氧化钠溶液15 ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调节pH值至5～6，用乙酸乙酯15 ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，用铺有适量无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干。残渣加乙酸乙酯1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材，同法制成对照药材溶液。按芪芍安胃胶囊处方比例，除黄芪外的各种药材按制剂工艺制成胶囊，并按上述方法制备阴性对照溶液备用。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述三种溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)作为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏后置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点，阴性对照无干扰。

2.2 芍药的薄层色谱鉴别 取芍药苷对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。取本品适量，研细，称取5 g，加乙醇60 ml，超声处理30 min，滤过，滤液浓缩至干，残渣加水20 ml使溶解，用乙醚提取2次，每次20 ml，弃去乙醚液，再用水饱和的正丁醇提取3次，每次20 ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。按芪芍安胃胶囊处方比例，除白芍外的各种药材按制剂工艺制成胶囊，并按上述方法制备阴性对照溶液备用。吸取上述3种溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲醇-甲酸(5∶40∶15∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛浓硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照液无此斑点。

2.3 甘草的薄层色谱鉴别 取本品5 g，研细，加乙醚40 ml，加热回流1小时，滤过，弃去醚液，药渣加甲醇30 ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40 ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20 ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇5 ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材，同法制成对照药材溶液。按芪芍安胃胶囊处方比例，除甘草外的各种药材按制剂工艺制成胶囊，并按上述方法制备阴性对照溶液备用。照薄层色谱法(2010附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各1～2 μl，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照液无此斑点。

3 含量测定

3.1 色谱条件 采用Phenomenex C18 Gemini(250×4.6 mm，5 μm)色谱柱，柱温为室温，以乙腈0-2%磷酸溶液(22∶78)为流动相;流速为1.0 ml/min;检测波长:231 nm流速1 ml/min。

3.2 对照品溶液的制备 精密称取在五氧化二磷干燥器中真空干燥至恒重的芍药苷对照品，加甲醇制成每1 ml含0.542 mg的溶液，摇匀，作为母液。精密量取对照品溶液5 ml，置50 ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成0.0545 mg/ml芍药苷溶液，分别精密吸取此对照品溶液 1、3、5、7、10 ml置10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成 5.42，16.26，27.1，37.94，54.2 μg/ml的系列溶液。

3.3 供试品溶液的制备 取本品细粉约5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙醚30 ml，超声处理10 min，滤过，弃去乙醚液，残渣挥去乙醚，加水饱和的正丁醇25 ml，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用水饱和正丁醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，作为供试品溶液。将除白芍的其他药材按处方所述方法制成阴性供试品，用同样方法制成阴性供试品溶液。在相同色谱条件下进样，色谱图见图1。

3.4 系统适应性考察 分别吸取芍药苷对照液和各供试品溶液10 μl，注入液相色谱仪，理论板数以芍药苷峰计，不低于2000;此时，芍药苷峰与其它组分峰基线分离，分离度＞1.5，保留时间约为10.5 min。

3.5 线性关系的考察 精密吸取5个不同浓度的对照品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，各进2针，以进样量C(μg)对芍药苷平均峰面积A进行回归处理，得回归方程 C=3×106A+1240，r=0.9991，结果表明，指标成分进样量在0.0542～0.542 μg之间线性关系较好。

3.6 精密度试验 精密吸取浓度为37.94 μg/ml的对照品溶液10μl，连续进样5次，结果芍药苷峰面积值的RSD=0.7%，表明进样的精密度良好。

3.7 稳定性试验 精密吸取批号为120510的供试品溶液10 μl，每间隔2 h进一针，连续考察10 h，结果芍药苷峰面积值的RSD=1.8%，表明指标成分在10 h内基本稳定。

3.8 加样回收率试验 取批号为120510的芪芍安胃胶囊约2 g，共6份，精密称定，分别置三角烧瓶中，各精密加入浓度为54.2 μg/ml的对照液5、10、15 ml，用“3.3”项下方法制得供试品溶液。吸取供试品溶液10 μl注入液相色谱仪中，采用随行标准，外标法定量，显示加样回收试验结果满意。见表1。

表1 加样回收试验

3.9 样品测定

取3个批号芪芍安胃胶囊各约3 g，每批2份，精密称定，分别按供试品溶液的制备方法制成供试品溶液。按上述色谱条件，分别吸取10 μl注入液相色谱仪，采用随行标准，外标法定量，结果满意。

回收率等均较好，符合定量要求。根据测定结果，结合平均装量，暂定每粒芪芍安胃胶囊中含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于0.05 mg(取3批平均含量的80%为其下限)。

图1 芪芍安胃胶囊的色谱图

本试验建立的黄芪、白芍、甘草鉴别专属性强，重现性好，操作简便。而香附、当归的鉴别，因阴性有干扰，专属性不强，故未纳入质量标准中。

本试验对芍药苷含量测定方法进行了系统的研究，所建立的方法简便、系统适用性、仪器的精密度、指标成分的稳定性、方法的重复性和加样回收率等均较好，且专属性较强，符合定量要求。

本试验建立的质量标准可用于该制剂的质量控制。

［1］ 沈志滨 ，朱俊访.安神补脑胶囊质量标准的研究［J］.哈尔滨商业大学学报，2006，22(4)：12.

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［S］.北京：化学工业出版社，2010.

［3］ 曾惠芳，黄鸣清.调经止血颗粒的质量标准研究［J］.中药新药与临床药理，2005，16(5)：356.

［4］ 冯有龙，董小平.肾炎宁胶囊质量标准的研究［J］.现代中药研究与实践，2005，19(5)：50.