HPLC法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛的含量

安 瑜 张新新 梁晋如 郝群峰 孙文基 王 燕▲ 宁夏自治区固原市药品检验所（固原756000）

理想的消毒剂应具备杀菌谱广、杀菌能力强、作用速度快、稳定性好、毒性低、腐蚀性小、刺激性小 （应该是无毒、无残留、无腐蚀、无刺激）易溶于水、对人和动物安全及价廉易得、对环境污染程度低等特点。瑞克卫瑞消毒液具有杀菌与消毒的功效，其中含有的桂皮醛具有明显的消炎、抗菌等作用［1，2］，是消毒液的主要活性成分之一。利用高效液相色谱方法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛的含量未见报道［3－7］，为了能够有效地控制本品的内在质量，所以建立高效液相色谱方法对其中的桂皮醛含量进行测定，并进行方法学的考察。以为其质量控制提供一种可行的方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waters2695型高效液相色谱仪；Waters2487型UV－VIS检测器；Empower色谱工作站；SE－96自动纯水蒸馏器；KQ－100DE型数控超声波清洗器（昆山市超市仪器有限公司）。

1.2 试药 瑞克卫瑞消毒液由陕西瑞可生物科技有限公司生产；桂皮醛对照品（批号：20101025）（上海双香助剂厂），丁香酚对照品（上海飞样化工厂）；无水乙醇（分析纯，天津市滨海科迪化学试剂有限公司），甲醇（色谱纯，天津市致远化学试剂有限公司），水为双蒸水（自制）。

2 方法和结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Welchrom C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇－水（60∶40）等度洗脱；体积流量：1.0 mL·min－1；柱温：25℃；检测波长：280nm；在该色谱条件下，样品中桂皮醛和其他组分分离效果良好，对照品与样品色谱图见图1。

图1 HPLC图

2.2 桂皮醛对照品溶液的配制 用200μL移液枪精密量取密度为1.05g·mL－1的桂皮醛对照品溶液20μL，置100mL容量瓶中，用无水乙醇溶解并定容至刻度，配成浓度为0.21mg·mL－1的对照品溶液。

2.3 供试品溶液的配制 用1000μL移液枪精密量取500μL瑞克卫瑞消毒液，置10mL容量瓶中，加无水乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得。

2.4 线性关系考察 分别精密吸取桂皮醛对照品溶液1，2，4，5，6，8和10μL进样。依“2.1”项下色谱条件测定，以桂皮醛峰面积为纵坐标，桂皮醛质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程为Y＝10000000 X＋16121，r2＝0.9998，线性范围为0.21～2.1μg。

2.5 精密性实验 精密吸取桂皮醛对照品溶液10μL，按“2.1”项下色谱条件连续进样6次，测定桂皮醛峰面积。结果桂皮醛峰面积的RSD为0.3%（n＝6）。

2.6 稳定性实验 精密吸取桂皮醛对照品溶液10μL，于0，2，4，6，10，16和24h进样，测定桂皮醛峰面积。结果桂皮醛峰面积的RSD为0.1%。结果表明供试品溶液在24h内基本稳定。

2.7 重复性实验 取同一样品溶液（批号：1103036－1），平行取样6份（n＝6），按照“2.3”项下方法配制供试品溶液。按“2.1”项的色谱条件测定桂皮醛峰面积，结果桂皮醛峰面积的RSD为1.2%，表明方法重现性较好。

2.8 加样回收率实验 精密吸取已知浓度同一批号的样品溶液（批号：1103037－1，浓度0.85mg·mL－1）4mL，共6份，分别置25mL容量瓶中，再分别加入桂皮醛对照品溶液17mL，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，并按“2.1”项下的色谱条件，依法测定，计算平均加样回收率。结果见表1。

表1 桂皮醛加样回收率实验结果（n＝6）

2.9 样品测定 取瑞克卫瑞消毒液按“2.3”项方法制备供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪中，按“2.1”项下色谱条件测定峰面积。按外标法计算供试品溶液中桂皮醛的含量。结果见表2。

表2 瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛的含量（n＝3）

3 讨 论

3.1 本实验共测得了三批样品中桂皮醛的含量 结果发现三批样品中桂皮醛含量分别为0.83mg·mL－1、0.85mg·mL－1和0.85mg·mL－1，批与批之间的含量相差不是很大，说明厂家在生产产品时，质量体系控制的比较严格。虽然，三批样品具有一定的局限性，但是可以看出，本文所建立的高效液相色谱方法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛的含量，重现性较好。

3.2 流动相的选择 本实验初的时候，参考不同的文献，分别采用了乙腈－水、甲醇－水不同比例作为流动相，结果发现桂皮醛在甲醇－水（60∶40）和乙腈－水（40∶60）系统中均能达到理想的分离效果。考虑到溶剂的毒性以及成本问题，本实验选择甲醇－水（60∶40）系统作为最终的流动相。而且在此流动相系统下，样品运行时间为20min左右，在确保理想分离度的前提下，时间是相对比较短的。

［1］陆颂规，王 岩，彭红英.不同产地桂枝中桂皮醛的GC含量测定［J］.中药材，2007，30（2）：174－175.

［2］王 宁.高效液相色谱法同时测定解风酒中阿魏酸、原儿茶酚酸和桂皮醛［J］.中成药，2012，34（1）：71－73.

［3］李晓妮，葛 新，李青山.高效液相色谱法测定祖师麻风湿膏中桂皮醛的含量［J］.药物分析杂志，2008，28（9）：1559－1561.

［4］李生有.高效液相色谱法测定胃痛七味散胶囊中桂皮醛的含量［J］.中国医院药学杂志，2005，25（3）：248－249.

［5］谢 敏，张秋萍.HPLC法测定养脾散中桂皮醛的含量［J］.中药材，2008，31（7）：1086－1087.

［6］董 媛，明全忠.HPLC法测定八味肉桂胶囊中桂皮醛的含量［J］.西北药学杂志，2007，22（3）：101－103.

［7］柏 冬，范 斌，牛晓红，等.HPLC－系统内标法测定桂枝汤中芍药苷、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛和甘草酸［J］.中草药，2010，41（3）：387－390.