正心泰胶囊中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的高效液相测定含量

任利斌

（贵州同济堂制药有限公司，贵州 贵阳 550000）

正心泰胶囊中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的高效液相测定含量

任利斌

（贵州同济堂制药有限公司，贵州 贵阳 550000）

目的 建立测定正心泰胶囊中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量的高效液相色谱法。方法 反相液相色谱法，色谱柱为Waters XBridge-C185μm 250mm×4.6mm，流动相：乙腈-0.2%磷酸（30∶70），波长260nm，流速1mL/min。结果 线性范围：0.12442～1.2442μg，回归方程：Y=907200.29X-6781.48，相关系数0.9999，平均回收率 96.74%，RSD=1.8%（n=6）。结论 此方法专属性强、精密度高、重现性好，可作为正心泰胶囊的质量控制。

正心泰胶囊；毛蕊异黄酮葡萄糖苷；HPLC

正心泰胶囊由黄芪、葛根、丹参、槲寄生、山楂和川芎六味中药组成，是中国药典收载品种。本制剂具补气活血，通脉益肾。用于冠心病、心绞痛表现为气虚血瘀兼肾虚症候者。证见胸痛、胸闷、心悸、乏力、眩晕、腰膝酸软等。根据有关文献[1]也对葛根中所含葛根素进行了含量测定，但对处方中君药的黄芪无含量测定，黄芪具有益气固表，利尿托毒，敛疮生肌的功效，为了更好的控制产品的质量，选择黄芪中所含毛蕊异黄酮葡萄糖苷的作为含量指标，本实验通过对其中毛蕊异黄酮葡萄糖苷为指标，采用高效液相色谱法测定其含量，方法简单，操作方便，结果可靠，可以作为控制正心泰胶囊的质量提供指导。

1 仪器与试药

LC-20A高效液相色谱仪及配套设备（岛津）。毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品（批号：111920-201106），由中国药品生物制品检定所提供，乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。正心泰胶囊样品，阴性对照样品由贵州百祥制药有限责任公司提供。

2 方法与结果[2]

2.1 色谱条件

色谱柱：Waters XBridge- C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-0.2%磷酸（30：70），柱温：30℃；检测波长为260nm；流速：1mL/min。

2.2 对照品及供试品溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备：精密称取毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品6.221mg于100mL的容量瓶中，加甲醇至刻度，即得每1mL含毛蕊异黄酮葡萄糖苷0.06221mg的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备：取本品内容物研细，取约1.5g，精密称定，精密加入甲醇50mL，称定重量，置超声提取60min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密吸取续滤液20mL，蒸干，残渣加水5mL使溶解，加入处理好的D-101大孔树脂（柱长12cm，内径1.5cm），先用30mL水洗脱，弃去，再用70%乙醇80mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，置10mL的量瓶中，加甲醇至刻度，即得。

2.2.3 阴性样品溶液的制备：取分别不含黄芪的阴性样品，照制备供试品溶液的方法制备。

2.3 系统适用性试验

在上述色谱条件下，分别取对照品溶液、供试品溶液、和阴性样品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。正心泰胶囊中各成分分离完全（分离度＞1.5），阴性样品无干扰。见色谱图1。

2.4 线性试验

图1 正心泰胶囊中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的HPLC图（A：毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品；B：供试品；C：缺黄芪的阴性样品）

精密吸取对照品溶液（0.06221mg/L）2、6、10、14、20μL注入液相色谱仪，测定其峰面积，并以峰面积值为纵坐标（Y），进样量（X）的为横坐标，得到回归方程A=907346.15X-6781.48，r=0.9999；由表可知毛蕊异黄酮葡萄糖苷在0.1244～0.1244μg有良好的线性关系。

2.5 精密度试验

精密吸取同一供试品溶液10μL，重复进样6次，测得毛蕊异黄酮葡萄糖苷峰面积积分值为656437.4，RSD=0.63%。

2.6 重复性试验

取为同一批号（20120121）样品6份，照“2.2.2”项下方法操作，进样，测出峰面积并计算含量，毛蕊异黄酮葡萄糖苷的平均含量为：1.2092mg/g。RSD为：1.57%。

2.7 稳定性试验

取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、12、18、24h依法测定，记录峰面积积分值。RSD为0.85%，结果表明样品溶液在24h内稳定。

2.8 回收率试验

精密称取已知含量的同一批正心泰胶囊6份，每份0.75g，精密称定，置锥形瓶中，分别精密加入一定量的毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品溶液，挥干溶剂，照“2.2.2”项下方法操作，按上述色谱条件测定含量，计算回收率，毛蕊异黄酮葡萄糖苷加样回收试验结果96.74%，RSD为1.8%。

2.9 样品测定及结果分析

对3批样品按上述含量测定方法进行含量测定，测定结果见表1。

表1 样品测定结果（n=3）

3 讨 论

3.1 本品为《中国药典》2010年版一部品种，方中黄芪为君药，没有对其进行含量测定控制，不能很好的反应制剂的质量，通过对处方中黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的控制，使制剂的质量得到更大的提高。

3.2 试验中通过使用大孔树脂D-101，去除了对测定的成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷的干扰，使所得的样品色谱图中毛蕊异黄酮葡萄糖苷峰形较好，与其他峰分离度＞1.5，同时阴性对照样品无干扰。

[1] 国家药典委员会.中国药典[S].北京:中国医药科技出版社,2010: 283-619.

[2] 石子仪,鲍忠,姜勇,等.不同来源黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的定量分析[J].中国中药杂志.2007,32(9):779-783.

Determination of Calycosin 7-O-β-D-Glucopyranoside in Zhengxintai Capsules by HPLC

REN Li-bin
(Guizhou Tongjitang Pharmaceutical Co., Ltd., Guiyang 550000, China)

Objective To establish a method for determining the content of Calycosin 7-O-β-D-Glucopyranoside in Fufang Banmao Capsule. Methods The product was analyzed by HPLC,using Waters XBridge-C18column(250mm×4.6mm, 5μm),with acetonitrile-0.2% phosphate (30∶70) as the mobile phase,the flow rate was 1.0mL/min and the detection wavelength of 260nm.Results Linearity in the sample size range of 0.12442～1.2442μg for Calycosin 7-O-β-DGlucopyranoside. The average recoveries for Calycosin 7-O-β-D-Glucopyranoside was 96.74%(RSD of 1.8%).Conclusion The method is convenient and accurate. It can be applied to the quantitative determination of the preparation.

Zhengxintai Capsules; Calycosin 7-O-β-D-Glucopyranoside; HPLC

R282

B

1671-8194（2013）28-0036-02