Survivin和IL-8在乳腺癌组织中的表达及二者的相关性

王云俊 牛清华

（山西医科大学，山西 太原 030001）

Survivin和IL-8在乳腺癌组织中的表达及二者的相关性

王云俊 牛清华

（山西医科大学，山西 太原 030001）

目的 探讨乳腺癌组织中存活素（survivin）和白介素-8（IL-8）的表达情况及它们之间的相关性。方法 采用免疫组织化学染色法检测52例乳腺癌组织中survivin和IL-8蛋白的表达情况，并分析它们之间的相互关系。结果 52例乳腺癌组织中survivivn的表达阳性率为71.2%（37/52），IL-8的表达阳性率为61.5%（32/52）。在32例IL-8表达阳性的病例中survivin的阳性表达率为87.5%（28/32），而在20例IL-8表达阴性的病例中survivin的阳性表达率为55%（11/20）。经统计学处理分析得出两者具有相关性P＜0.001，相关系数r=0.365。结论 survivin 在乳腺癌组织中的表达与IL-8的表达呈正相关，提示survivin与IL-8在乳腺癌的发生发展中具有协同作用。

乳腺癌；免疫组织化学；survivin；IL-8

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，病死率非常高。其发病率近年在世界范围内均呈上升趋势，采取积极有效的防治措施以控制其发生发展成为当务之急。本文的主要目的是通过检测乳腺癌组织中的survivin和IL-8的表达情况并且分析这些基因蛋白之间的相互关系以及与临床病理之间的关系来探讨survivin和IL-8在乳腺癌发生发展中的作用，为治疗肿瘤的药物作用靶点提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 一般材料

本实验所用的材料均来自山西医科大学第二临床医学院2009年8月-2011年8月有完整病例资料经手术切除的乳腺癌标本共52例，发病年龄38～75岁，均为浸润性非特殊癌，术前均未接受过非甾体类抗炎药（NSAIDs）治疗和放化疗。所有组织经4%甲醛溶液固定，石蜡包埋，4µm连续切片，常规HE染色，光镜下观察，病理明确诊断。

1.2 实验试剂

Survivin兔抗人多克隆抗体、IL-8兔抗人单克隆抗体以及DAB显色试剂盒均购自于北京中杉金桥试剂公司，免疫组化染色试剂盒（SP-1020）购于武汉博士德试剂公司。

1.3 实验方法

采用免疫组织化学染色S-P法检测survivin和IL-8在乳腺癌组织中的表达情况。具体操作步骤按照S-P试剂盒操作说明来进行，用已知阳性标本作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照；观察survivin及IL-8在乳腺癌组织中免疫组化染色情况。

1.4 结果判定

Survivin的阳性着色位于细胞浆或细胞核。参照文献[1]采用半定量积分法进行结果判定：400倍光镜下连续观察5个高倍视野，阳性细胞数＜5%为0分，5%～25%为l分，25%～50%为2分，50%～75%为3分，＞75%为4分。染色强度评分：无染色为0分，淡黄色为1分，黄或深黄色为2分，褐色或棕褐色为3分。两项积分相乘＞4分为阳性。IL-8阳性反应为胞浆呈棕黄色染色，阳性细胞数＜或等于10%为阴性，阳性细胞数＞10%为阳性。

1.5 统计学处理

所有数据资料均采用SPSS19.0软件进行统计学处理，各组间数据及率的比较进行χ2检验。

2 结 果

2.1 Survivin和IL-8在乳腺癌组织中的表达

survivin在乳腺癌组织中阳性着色定位于细胞浆或细胞核。52例乳癌组织中阳性表达37例、阴性表达15例，阳性率为71.2%。IL-8在乳腺癌石蜡切片中阳性着色定位于细胞浆。52例乳癌组织中阳性表达32例，阴性表达20例，阳性率为61.5%。

2.2 Survivin和IL-8在乳腺癌组织中的表达与临床病理的关系

见表1。

表1 Survivin和IL-8在乳腺癌组织中的表达与临床病理的关系

2.3 Survivin与IL-8在乳腺癌组织中表达情况之间的关系

在IL-8表达阳性的乳腺癌患者中survivin阳性表达率为87.5%，而在IL-8表达阴性的乳腺癌患者中survivin阳性表达率为55%，经统计学处理两者具有显著相关性（P＜0.001），相关系数：r=0.365。

3 讨 论

Survivin属于凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族中的一个新成员，除了具有很强的抗凋亡作用之外，它还参与细胞的增殖、分裂以及细胞周期的调控有关[2]。Survivin主要表达于胚胎和发育中的胎儿组织，在成人终末分化组织（除了睾丸、胎盘和胸腺）通常不表达，而在多种恶性肿瘤组织（如乳腺癌、肺癌、胃癌、卵巢癌、膀胱癌、结肠癌等）中异常高表达。主要是通过直接或间接抑制Caspase3和Caspase7的活性而阻断细胞的凋亡过程[3]。被认为是第一个直接将凋亡与细胞恶性度关联在一起的分子，具有多重功能，不仅能够抑制细胞凋亡还能启动细胞增殖，调节细胞周期。在肿瘤的发生、发展过程中survivin的过表达促使S期核转运加速，帮助细胞逃避细胞周期检测点，加快向S期转换，抑制G1期阻滞，通过调控有丝分裂促进转化细胞异常增殖[4]。Survivivn在正常人组织中是一个“关闭”的基因，在肿瘤组织中被激活而参与肿瘤的发生发展。而且，不同组织中的作用机制不同，因此被看作肿瘤相关因子[5]。

IL-8是一种具有多功能、多细胞来源的趋化性细胞因子，在炎症反应中发挥十分重要的作用。近年来发现与肿瘤的发生发展密切相关[6]，可刺激肿瘤细胞增殖诱导肿瘤细胞移动，促进肿瘤的发生和转移[7].关于IL-8基因表达的调节，主要集中于其在转录水平的调控。在IL-8启动子上有两个区域对IL-8的转录调节非常重要，它们分别是远端结合AP-1的位点和近端结合NF-κB及NF-IL-6的位点。在静息状态的情况下，NF-κB 二聚体通过与其抑制物 IκB以非共价结合无活性的三聚体形式存在于细胞浆。当在其受到细胞外信号刺激时，与细胞膜受体特异性结合并改变受体的空间构象，从而激活NIK，NIK再进一步激活IKKs，后者可使无活性的三聚体中的IκBN 端两个保守的Ser 残基磷酸化。IκB的磷酸化的结果导致其N端第21位和22位赖氨酸残基通过泛素连接酶与多个泛素分子共价结合。经过磷酸化和泛素化以后，IκB的构象被改变并被ATP依赖性的26S蛋白酶体识别并降解，从而使受 IκB 抑制的NF-κB释放出来，并成为有活性的二聚体形式进而转位到胞核，与IL-8基因上的κB序列特异性结合后上调IL-8基因的表达[8,9]进而促进细胞的增殖。

通过诱导TNF受体介导的信号转导中NF-κB诱导survivin表达，而survivin大量表达可降解IκB，解除I-κB对NF-κB活性的抑制，使细胞免于凋亡。NF-κB的亚单位转活化的异位表达可诱导促癌基因c-myc启动区的激活，p50主要参与基因启动子增强子κB序列特异性结合[10]，p65转录调控survivin的表达[11]，抑制caspase-3和caspase-7的活性，从而阻断细胞凋亡，共同参与肿瘤细胞的发生发展过程。很多研究发现survivin及IL-8均具有明显的促肿瘤血管生成的作用，而血管的生成在乳腺癌的发生、浸润和远处转移过程起到重要作用。由此可推测：二者在恶性肿瘤的发生发展过程中可能是通过纷繁交错的信号转导途径对细胞周期的调节发挥作用。

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R737.9

B

1671-8194（2013）19-0231-02