塞克硝唑的抗菌活性实验

潘福东

【摘 要】目的 测定实验药物塞克硝唑对口腔厌氧病原菌的体外抗菌作用。方法 本试验采用美国国立临床实验室标准化研究所（CLSI/NCCLS）推荐的厌氧菌药物敏感试验-琼脂稀释法，检测塞克硝唑对6株模式株和参考株及35株口腔临床分离株的体外抗菌活性，并与同类药物甲硝唑进行比较。结果 塞克硝唑和甲硝唑对6株模式株和参考株的MIC值分别是0.062～0.5μg/ml、0.125～0.5μg/ml；对35株临床分离株的MIC值分别是0.031～0.5μg/ml、0.031～1.0μg/ml。结论 塞克硝唑与甲硝唑相比体外抗厌氧菌活性相似或略强。

【主题词】塞克硝唑 抑菌实验

【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5158（2013）03-0369-01

口腔临床常见的感染性疾病如牙周炎、冠周炎均为厌氧菌感染为主的疾病，厌氧菌检出率在95%左右。5-硝基咪唑类药物[如甲硝唑（MTZ）等]被认为是抗无芽孢厌氧菌感染效果较好的药物。塞克硝唑（secnidazole，SNZ）是近年来国外临床广泛使用的安全、有效的抗脆弱拟杆菌、幽门螺杆菌、阴道滴虫及肠道阿米巴的5-硝基咪唑类药物。与其它5-硝基咪唑类药物相比，具有有效血药浓度维持时间长（17～29h）、不良反应少等优点。目前国内塞克硝唑仅应用于妇科感染性疾病的治疗，还未见用于口腔感染性疾病的治疗，为进一步了解塞克硝唑对口腔厌氧菌株的敏感性，本文对塞克硝唑进行体外抑菌实验，为本品在口腔临床抗厌氧菌感染中的应用提供有意义的实验数据。

一、材料与方法1、材料

（1）实验药和对照药

实验药 塞克硝唑原药粉，白色粉剂，批号20041216，由浙江南洋药业股份有限公司提供。

对照药 甲硝唑原药粉，白色粉剂、批号HEC-ME-040634，由浙江南洋药业股份有限公司提供。

（2）实验菌株 选择口腔临床常见的厌氧病原菌菌株作为本实验的实验菌株，其中模式株和参考菌株6株，临床分离株35株，均从口腔临床牙周炎患者的病灶位点分离。质控株脆弱拟杆菌ATCC25285；实验菌株（模式株和参考菌株）6株：牙龈卟啉单胞菌（Porphynomonas gingivalis）ATCC33277，牙龈卟啉单胞菌381，牙髓卟啉单胞菌（Porphyromonas endodentalis）ATCC34506，中间普雷沃菌（Prevotella intermedia）ATCC25611，产黑素普雷沃菌（Prevotella melaninogenica）ATCC

13040，具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum）ATCC10953。

（3）培养基 Brain-heart infusion-S（BHI-S），Bio-Merieux产品，批号

51009。

（4）厌氧孵育箱 DYII型，浙江义乌。

2、方法

采用美国临床实验室标准化研究所（CLSI/NCCLS）推荐的厌氧菌药物敏感试验（Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobes） 琼脂稀释法（Agar Dilution Method）测定实验药物和对照药物的抗菌活性，用最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC）表示。

（1）药物实验液和含药琼脂平皿的配制

药物实验贮存液的配制 实验药和对照药均用无菌蒸馏水配制成药物浓度为5120μg/ml的贮存液（-4℃保存一周）。

含药琼脂平皿的配制 采用对倍稀释法，用BHI液体培养基分别将实验药和对照药的贮存液（5120 μg/ml）配制成系列浓度的实验药液：2560、1280、640、320、160、80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.62和 0.31μg/ml。分别取上述不同浓度的药物实验液2ml加18ml浓度为48～50℃的BHI-S琼脂混合均匀后倾注平皿，配制系列对倍递减浓度的含药琼脂平皿（256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.062和0.031μg/ml）。

（2）实验细菌液的准备 在BHI-S琼脂表面接种实验菌株，置厌氧培养箱内（80% N2+10% CO2+10% H2）培养48h，取48h纯培养物接种BHI-S肉汤后放置厌氧培养箱内（80% N2+10% CO2+10% H2）培养48h，校正实验菌液的浓度为0.5McFarland（108CFU/ml）备用。

（3）MIC测定 在系列含药平皿表面用微量加样器分别点种细菌浊度为108CFU/ml（0.5 McFarland标准）的实验菌液，点种量为7μl。将点种细菌的实验平皿放置在厌氧箱内（80% N2+10% CO2+10% H2）培养48h。实验菌对照：将实验菌液点种在不含药液的BHI-S琼脂表面。厌氧培养（80% N2+10% CO2+10% H2）48h后观察MIC结果。

二、结果

由表1可见塞克硝唑和甲硝唑对质控菌株脆弱拟杆菌ATCC25285的MIC的测定值与CLSI/NCCLS公布的参考值接近。对6株模式株和参考株的MIC值分别为0.062～0.5μg/ml、0.125～0.5μg/ml，对35株临床分离株的MIC分别为0.031～0.5μg/ml、0.031～1.0μg/ml。结果提示，与甲硝唑相比较，塞克硝唑对这几种厌氧菌的体外抗菌活性相似或略强。表1塞克硝唑（SNZ）和甲硝唑（MTZ）对实验细菌的。

三、讨论

塞克硝唑与甲硝唑同属5-硝基咪唑类药物，其抗菌谱与硝基咪唑类其它抗菌药物没有明显差异。与甲硝唑相比，塞克硝唑的药动学特性如生物利用度、存在活性代谢物和终末消除半衰期（塞克硝唑t1/2β为17～29h，甲硝唑为7～8h）主要表现量的差异，出现差异的原因是由于氮环上结合于硝基邻近的取代基决定的。国外塞克硝唑主要用于治疗阿米巴、贾第鞭毛虫、滴虫和细菌性阴道炎，绝大多数都是使用单剂方案，单剂治疗是塞克硝唑的最大特点，有报道塞克硝唑在牙龈组织内药物浓度与血药浓度大体平行，说明该药对牙龈组织有较好的穿透作用，同时该药在牙龈组织的半衰期长达28.8h。该药口服吸收好，口服和静脉给药差异无显著性口腔临床常见的牙周炎和冠周炎均以厌氧菌感染为主，本实验通过塞克硝唑和甲硝唑对6株模式株和参考株及35株临床分离株的测定表明，塞克硝唑的体外抗厌养菌活性相似或略强于甲硝唑。鉴于塞克硝唑的血液维持浓度较长，胃肠道不良反应小，耐受性良好，单剂口服方便等特点，塞克硝唑在治疗口腔厌氧菌感染方面有较大的应用前景。

参考文献：

[1]于佳辉 李淼 肖丽英 丁一 肖晓蓉 朱珠 龚其美，塞克硝唑对口腔厌氧病原菌体外抗菌活性的测定，论文网，2009，07