Runx3 和fascin在胃癌组织中的表达及其临床意义

饶 鹏，李贵春，许丽萍，周和成，刘军成，彭光喜，何 芳，刘 新，刘智华，王志强

（鹰潭市人民医院外一科，江西 鹰潭 335000）

胃癌是世界范围内发病率第二的常见恶性肿瘤，严重威胁到人类的健康，在我国胃癌发病率居恶性肿瘤的首位［1］。 不同临床分期的胃癌患者预后完全不同，TNMⅠ期胃癌手术后5 年生存率为95%，TNMⅡ期5 年生存率为70%，TNMⅢ期5 年生存率为31.9%，而TNMⅥ期5 年生存率仅为6.5%［2］。胃癌的发生与发展是多阶段、多步骤的过程，主要包括原癌基因的激活、 抑癌基因的失活、DNA 损伤修复基因的突变及遗传学的变化等［3］，涉及了细胞增殖、分化、凋亡多个环节。 Runx3 作为一种新发现的候选肿瘤抑制基因，它表达的失活与多种恶性肿瘤的发生发展相关。 在正常胃黏膜组织中Runx3 的阳性表达率＞90%。fascin 蛋白又称为成束蛋白，正常情况下, fascin 蛋白在正常胃黏膜组织中基本不表达，而在一些恶性肿瘤组织中有阳性表达［4］。目前无研究Runx3 和Fascin 蛋白在胃癌细胞中表达的互相关系，由于两蛋白存在于肿瘤细胞增殖及活动的过程中，希望通过本实验来研究Runx3 和fascin 蛋白在胃癌肿瘤细胞中的表达与胃癌患者术后情况的关联，有望为胃癌患者预后评估及化疗效果提供依据。

1 材料与方法

1.1 一般材料

选择2005 年9 月到2008 年6 月鹰潭市人民医院存档病理组织标本（经胃癌根治术并证实为胃癌的石蜡标本）150 例。 男84 例，女66 例，年龄35～83 岁，平均63.98 岁，均为胃癌根治手术切除患者，病理标本由主治医师以上病理医生诊断。 其中腺癌114 例，黏液腺癌6 例，印戒细胞癌30 例；有淋巴结转移的72 例，无淋巴结转移的78 例；均未发现远处转移。 根据2010 年的UICC 的胃癌TNM 分期：TNMⅠ期66 例，TNMⅡ期54 例，TNMⅢ期30 例。术前均未行放化疗，术后TNMⅠ期患者未化疗，TNMⅡ期及TNMⅢ期患者术后行ECF 方案化疗。 所有患者均为第1 次手术， 无其他上消化道相关性疾病。

1.2 实验方法及判断标准

标本经常规病理检查，石蜡包埋，每例标本蜡块各取2 张4 μm 切片，分别做Runx3 及fascin 的免疫组织化学染色。 Runx3 及fascin 表达均位于细胞浆内，Runx3 表达阳性染色为大小不一的黄色或棕黄色颗粒［5］。fascin 蛋白的阳性表达也呈棕黄色颗粒状。 由病理科医师对每一张切片进行全面观察，结果按染色强度及显色细胞比例判定。

Runx3 蛋白阳性根据阳性细胞比评分×染色评分得出总分数。阳性细胞在细胞总数的百分比＜10%为0 分；10%～25%为1 分；26%～50%为2 分；51%～75%为3 分；＞75%为4 分。 按染色判为：无着色为0分；浅黄色或浅褐色为1 分；棕黄色为2 分；棕褐色为3 分。 评分标准：总分＜3 分判为阴性；3～6 分为阳性；＞6 分判为强阳性。 本实验将阳性及强阳性记为阳性。

fascin 蛋白阳性表达根据阳性细胞数比例来分级，阳性细胞数5%～30%为弱阳性，超过30%为强阳性。

1.3 统计学方法

应用SPSS12.0 软件包进行统计学分析。计数资料比较采用卡方检验或校正卡方检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 免疫组织化学检测结果

在TNM 分期Ⅰ期66 例标本中fascin 阳性者15 例，Runx3 阳性者50 例；TNM 分期Ⅱ期的54 例标本中fascin 阳性者21 例，Runx3 阳性者40 例；TNM 分期Ⅲ期的30 例标本中fascin 阳性者24 例，Runx3 阳性者12 例。Fascin 及Runx3 的表达与患者年龄、性别、病理分型及TNM 分期的关系见表1。

2.2 生存率的结果

在TNM 分期Ⅰ期的15 例fascin 阳性标本中5年生存率为80.0%（12/15），而阴性标本的5 年生存率为94.11%（48/51）；Runx3 阳性的50 例标本中5年生存率为96.00%（48/50）， 而阴性标本的5 年生存率为75.0%（12/16）。TNM 分期Ⅱ期的21 例fascin阳性标本中5 年生存率为57.1%（12/21），而阴性的5 年生存率为72.7%（24/33）；Runx3 阳性的40 例中5 年生存率为72.5%（29/40），而阴性的5 年生存率为50.0%（7/14）。 TNM 分期Ⅲ期的24 例fascin 阳性标本中5 年生存率为25.0%（6/24）， 而阴性的5 年生存率50.0%（3/6）；Runx3 阳性的12 例中5 年生存率为50.0%（6/6），而阴性的5 年生存率为16.7%（3/18）。

表1 Fascin 及Runx3 的表达与患者年龄、性别、病理分型及TNM 分期的关系

3 讨论

根据本实验和回访了解的生存率可以发现，Runx3 和fascin 的阳性表达和年龄及性别无明显关系， 而和TNM 分期有明显的关系 （P＜0.05）。 随着TNM 分期的进展两者的异常表达率提高，说明两者确实和胃癌的发生及发展过程有关。 Runx3 可能是与TGF-β 介导的细胞生长和凋亡调控有关的重要抑癌基因， 细胞生长的数量缺乏调控可能是由于Runx3 基因不发挥生理作用，缺乏Runx3 基因的胃黏膜上皮细胞凋亡受到抑制，增殖速度加快，黏膜厚度明显增加，并且细胞对生长抑制因子TGF-β 表现出拮抗效应，表明Runx3 基因是胃黏膜上皮细胞生长和增殖的调控者［7］。 在fascin 高表达的进展期，可能导致肿瘤细胞获得的侵袭能力更强， 并可能更容易进入邻近的血管和淋巴管。有研究［8］报道，在胃癌的发生发展过程中， 肿瘤细胞可以获得一定的移动性及侵袭性，可以通过基底膜从而扩散到周围邻近组织；fascin 蛋白在有淋巴结转移的胃癌标本中表达较无转移的胃癌标本明显增高， 肿瘤的浸润转移过程有三步假说：黏附、降解及移动，肿瘤细胞的移动性增强及肿瘤细胞的黏附性增强均可能是fascin蛋白的原因。 本研究发现，两蛋白的异常表达和TNM 分期存在关联，早期肿瘤患者的Runx3 的阳性表达高，而fascin 的阳性表达较低，随着肿瘤的进展Runx3 表达阴性率越高、而fascin 的表达的阳性率越高。 根据患者5 年生存率的调查发现，同期中的Runx3 及fascin 异常表达的患者生存率较低，说明两者异常表达的患者肿瘤生物活性及侵袭性较强，更容易出现淋巴转移、腹腔种植及血运转移。所以根据以往对早期胃癌的局部切除或D1 根治手术是否能达到最好治疗效果还有待研究，希望能根据不同免疫组织化学的肿瘤有针对性地选择手术方式。 本研究对患者化疗方案的选择未进行讨论，进一步需要研究不同化疗方案对相同TNM 分期及相同Runx3 及fascin 表达的影响。

［1］吴在德,吴肇汉.外科学［M］.6 版.北京：人民卫生出版社，2008：437-442.

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［3］Levanon D,Brenner O,Otto F,et a1.Runx3 knockouts and stomach cancer［J］.EMBO Rep,2003,4（6）：560-564.

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［5］孙玉蓓,胡冰,沈干,等.胃癌组织中抑癌基因RUNX3 和CHFR 启动子异常甲基化的临床意义［J］.中国临床保健杂志,2010,13（3）：236-238.

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［8］李凯,王蓓,封国生.fascin、nm23 和C-erbB-2 蛋白在胃癌总的表达及临床意义［J］.中华普通外科学，2009，3（1）：12-14.