蒙药珍蝥眩痛八味贴临床前安全性实验研究

刘 娜 郝 钢 韩昊奇

（1.呼和浩特食品药品检验所，内蒙古 呼和浩特 0100202.内蒙古食品药品检验所，内蒙古 呼和浩特010010）

蒙药珍蝥眩痛八味贴是由珍珠粉、斑蝥、冰片、琥珀、皂角、刺樟脑、蓖麻子、栀子8味药组成的贴剂,主治高血压引起的眩晕目眩、头痛等,临床疗效显著。由于处方中含有毒性药材,为此我们对珍蝥眩痛八味贴进行了药物安全性试验研究,试验结果如下。

1 实验方法

1.1 实验动物：昆明种小鼠，生产许可证：SCFK(蒙)2002－0001，购自内蒙古大学实验动物中心。实验环境：屏障动物实验室，动物使用许可证号：YXK(蒙)2004-0001。家兔,豚鼠 来源：北京市海淀区兴隆实验动物养殖厂合格证编号：SCXK(京)2011-0006。饲料来源：北京科澳协力饲料有限公司 证号：SCXK（京）2005-0007。来源：北京市海淀区兴隆实验动物养殖厂。

1.2 实验仪器：电子天平 型号：梅特勒-托利多P L-2002。

1.3 阳性对照药:2，4二硝基氯苯，生产厂家：上海试剂一厂，批号：77-11-01。

2 实验方法

2.1 急性毒性试验：预实验：取12只小鼠，雌雄各半，体重 18～22g,随机分成 4组，分别以 20g/k g、16g/k g、12g/k g、8g/k g的浓度给小鼠灌胃,确定其100%的死亡浓度和0%的死亡浓度。

正式试验：取 50只小鼠，雌雄各半，体重 18～22g随机分成5组。用100%的死亡浓度和0%的死亡浓度以及之间的五组浓度（剂间距为0.7）对小鼠进行灌胃给药，灌胃体积为80m l/k g,不同浓度相同体积，观察14天,并记录小鼠死亡数,毒性反应,食欲、行为等情况。以Bliss法测定半数致死量 (L D50)，Spss13统计软件计算L D50。死亡动物进行尸解观察。见表1。

实验结果表明：珍蝥眩痛八味贴给药后出现较明显的毒副作用，珍蝥眩痛贴小鼠口服给药L D50为9.113g/k g(4.429～18.748，可信限 95%)。

表1 珍蝥眩痛八味贴小鼠口服给药测定LD50

2.2 皮肤刺激性试验

2.2.1 分组：选取家兔8只，随机分为两组，即皮肤完整组和皮肤破损组。实验前24小时对家兔背部进行脱毛处理。进行破损皮肤刺激试验时在用药部位划“井”字并以渗血为度。

2.2.2 给药及观察：将贴片贴于家兔背部一侧除毛区，另一侧用赋形剂做空白对照，给药贴敷时间为8小时，贴敷完毕后清洗药物。在去除药物后1小时观察记录红斑及水肿、涂敷部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况及其发生时间及消退时间，并对红斑及水肿进行评分。第一次给药15天后，同法给药，在去除药物后1、24、48和 72小时肉眼观察并记录涂敷部位有无红斑和水肿等情况，并对红斑及水肿进行评分。

2.2.3 结果评价：计算每一观察时间点各组积分均值，然后计算观察期限内每天每只动物积分均值，按文献方法2进行刺激强度评价。结果表明珍蝥眩痛八味贴对完整皮肤有轻度刺激性；对破损皮肤有中度刺激性。

2.3 过敏试验

2.3.1 分组：豚鼠30只，随机分为三组,受试物组，阴性对照组，阳性对照组。

2.3.2 给药：在第0、7和14天用供试品贴片局部给药以诱导，第28天再次将贴片贴于脱毛区8小时以局部激发。去除贴片后观察72小时内皮肤过敏情况，并按皮肤过敏反应3评分标准进行评分。

2.3.3 观察指标：在致敏后 1小时及激发后24、48和72小时观察皮肤红斑、水肿，同时密切观察动物是否有哮喘、站立不稳或休克等严重的全身性过敏反应出现。按文献方法3进行过敏反应发生率及评价。

2.3.4 实验结果：见表2.

表2 过敏反应发生率及评价结果

实验结果表明,本次全身过敏反应赋形剂对照组过敏反应发生率为0%，阳性对照组过敏反应发生率为100%，试验成立。给药组过敏反应发生率为8%，皮肤致敏性评价为低致敏性。

3 实验结论

3.1 珍蝥眩痛八味贴给药后出现较明显的毒副作用，珍蝥眩痛八味贴小鼠口服给药L D50为9.113g/k g(4.429～18.748，可信限 95%)。

3.2 珍蝥眩痛八味贴对完整皮肤有轻度刺激性；对破损皮肤有中度刺激性。

3.3 珍蝥眩痛八味贴过敏反应发生率为8%，皮肤致敏性评价为低致敏性。

[1]课题研究组,中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则[S].中药、天然药物急性毒性试验技术指导原则,2004.

[2]课题研究组.中药、天然药物刺激性和溶血性研究的技术指导原则[S].中药、天然药物刺激性和溶血性研究的技术指导原则,2004.

[3]课题研究组.中药、天然药物免疫毒性（过敏性、光过敏反应）研究的技术指导原则[S].中药、天然药物免疫毒性（过敏性、光过敏反应）研究的技术指导原则,2004.