YB-1、EGFR表达与子宫内膜异位症发生和发展的相关性

孙丽 杨毓琴 高毅 庞琪 李云霞 王秋香

子宫内膜异位症（EM）是一种激素依赖性的疾病，在育龄妇女中较常见，发病率10%～15%。近年来临床有年轻化和发病率上升的趋势，主要引起进行性痛经，性交痛和不孕，不孕率高达30%～40%[1]，严重影响家庭的和谐以及生活的质量。人们对内异症的机制更近一步的深入，近年来最受关注的理论是“在位内膜决定论”，子宫内膜干细胞、古子宫的研究是其进一步的发展和补充[2]。在形态上子宫内膜异位症是良性的病变，但却有广泛种植，侵润，远处转移和较易复发的特点，因此子宫内膜异位症的发病也可能与很多基因的控制有关，一些癌基因的检测可能作为内异症早期诊断以及治疗的指标[3-4]。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 EM组 资料选取2006年3月—2012年4月甘肃省人民医院病理科石蜡包埋组织，所有标本均为甘肃省人民医院妇科患者因进行性痛经等原因影响正常生活，行子宫切除手术治疗并经病理学（见异位腺体上皮和间质细胞）确诊为EM的60例患者的组织（标本均经10%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，HE染色，并由固定病理医师诊断）。术前1年内未使用过激素治疗，年龄30～50 岁。取其各自子宫在位及异位内膜组织，其中38 例增生期，22 例分泌期。

1.1.2 对照组 为40 例同期在本院住院平素月经规律，近1年内未使用过激素治疗，因盆腔良性病变（非EM）、非恶性肿瘤等原因行子宫切除术的患者，年龄30～50 岁，取其子宫内膜，其中22 例增生期，18 例分泌期。

1.2 实验方法 用免疫组织化学法检测各子宫内膜异位组织和在位内膜中EGFR蛋白的表达。取子宫在位内膜以及异位内膜组织后用10%甲醛液固定，乙醇脱水，石蜡包埋，制成厚0.4 μm连续切片、贴片、烤片，按罗氏全自动免疫组化染色机染色，脱水透明，中性树胶封固。EGFR为兔抗人单克隆抗体（即用型），由中杉金桥技术公司提供。用已知阳性切片作阳性对照，以PBS 缓冲液代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判定 采用双盲法观察结果，在高倍显微镜下（10×40）观察细胞着色情况，以镜下细胞质或细胞核中出现棕黄色或棕色颗粒为阳性细胞，按细胞着色程度，浅黄色为弱阳性（+），棕黄色为中度阳性（++），棕褐色为强阳性（+++），无染色反应着为（-），阳性为有表达。

1.4 统计学方法 所有数据采用SPSS 15.0 统计学软件进行处理，率的比较采用χ2检验和Yates校正χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患者子宫内膜组织中YB-1 的表达 YB-1 在三组子宫内膜组织中的分布特点一致，均主要分布在子宫内膜腺上皮细胞的细胞核及细胞浆中，正常子宫内膜与子宫内膜异位症中YB-1 的表达强度相比，差异有统计学意义（P＜0.01）。在位子宫内膜与异位子宫内膜中YB-1 的表达强度相比，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 三组患者子宫内膜中YB-1 的表达

正常子宫内膜与子宫内膜异位症中YB-1 的表达强度相比，差异有统计学意义（P＜0.01），在位子宫内膜与异位子宫内膜中YB-1 的表达强度相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 三组患者子宫内膜组织中EGFR的表达 EGFR在三组子宫内膜组织中的分布特点一致，均主要分布在子宫内膜腺上皮细胞的细胞膜及细胞浆中。正常子宫内膜与子宫内膜异位症中在位子宫内膜中EGFR的表达强度相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；正常子宫内膜与子宫内膜异位症中异位子宫内膜中EGFR的表达强度相比，差异有统计学意义（P＜0.01）；在位子宫内膜与异位子宫内膜中YB-1 的表达强度相比，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 三组患者子宫内膜中EGFR的表达

2.3 三组患者子宫内膜组织中YB-1、EGFR的分布 YB-1 在三组子宫内膜组织中的分布特点一致，均主要分布在子宫内膜上皮细胞的细胞核及细胞浆。但在正常子宫内膜，子宫内膜异位症的在位子宫内膜，子宫内膜异位症的异位子宫内膜中的着色程度依次增强，EGFR在三组子宫内膜组织中的分布特点一致，均主要分布在子宫内膜上皮细胞的细胞膜及细胞浆。但在正常子宫内膜，子宫内膜异位症的在位子宫内膜，子宫内膜异位症的异位子宫内膜中的着色程度依次增强（如图1～6）。

图1 EGFR在正常子宫内膜腺上皮细胞膜和细胞质胞浆中为弱表达。

图2 EGFR在子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜的腺上皮细胞膜和胞浆中度阳性表达。

图3 EGFR在子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜的腺上皮细胞膜和胞浆强阳性表达。

图4 YB-1 在正常子宫内膜腺上皮细胞核和胞浆中表达为阴性。

图5 YB-1 在子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜的腺上皮细胞核和胞浆中度阳性表达。

图6 YB-1 在子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜的腺上皮细胞质中强表达。

3 讨论

子宫内膜异位症是最常见的妇科疾病之一，发病率10%～15%，发病机制尚不明确。近年来最受关注的学说为“在位内膜决定论”，即子宫内膜异位症患者的在位内膜可能为子宫内膜症发生的遗传性基础，某些基因的表达可能对内膜细胞的粘附、侵袭和生长起到至关重要的作用。

YB-1 是一个定位于1 p 34 染色体片段，分子质量为35 ku的基因，通过与基因启动子区的Y-box元件结合,调控基因的转录和翻译过程，参与多种肿瘤的发生、发展、转移和恶化等过程。在本次研究中YB-1 在正常子宫内膜，子宫内膜异位症的在位子宫内膜以及异位子宫内膜中的表达呈递增趋势，与Silveira等[5]多数学者的观点一致，即：YB-1 在子宫内膜异位症患者的在位内膜，异位内膜组织和细胞，以及子宫内膜异位症患者腹壁的巨噬细胞内均有高表达，特别是在子宫内膜异位症患者的子宫内膜上皮细胞内表达更高。

表皮生长因子受体（EGFR）是一种基因定位于7 号染色体7 p 13-g 22，分子量为170 KD的糖蛋白，大多数存在于细胞膜和胞浆内，有酪氨酸激酶的活性，具有促进各种上皮组织细胞增殖和分化的效应。在本次研究中示：EGFR在三组子宫内膜组织中的分布特点一致，均主要分布在子宫内膜腺上皮细胞的细胞膜及细胞浆内。但在正常子宫内膜，子宫内膜异位症的在位子宫内膜，子宫内膜异位症的异位子宫内膜中的着色程度依次增强。与Luo X等[6]研究相一致，即EGFR广泛存在于人类的生殖器官如子宫、卵巢、胎盘等部位的细胞膜和胞浆内EGFR，且参与细胞的生长、增殖、分化、粘附等现象。EGFR有望成为为一个潜在的早期诊断和治疗子宫内膜异位症的靶点。

本次研究表明，YB-1与EGFR在子宫内膜中的表达呈协同作用，与Stratford AL等[7]对乳腺癌的研究相一致，即YB-1 可正调控表皮细胞生成因子受体(EGFR)的表达，促进乳腺癌细胞的恶性增殖从而抑制YB-1 活性能够有效地抑制肿瘤生长。因此YB-1 与EGFR联合检测有助于对子宫内膜异位症的早期诊断和治疗提供可靠的依据，达到更好的治疗效果。