HSP60在胃腺癌中的表达及意义

闻淑娟　刘炜　杨顺娥

【摘要】 目的 研究HSP60在胃癌中的表達及临床意义。方法 应用免疫组化S-P法检测60例胃腺癌手术切除标本，其中维吾尔族30例，汉族30例，所有患者术前未行放疗和化疗。另选切端正常粘膜组织15例作对照。以上病例均经病理检查，诊断明确无误。观察HSP60在胃腺癌中的表达及其与临床的关系。结果 1）60例胃腺癌组织中HSP60的表达阳性检出率为：35.0%（21/60），其在胃粘膜正常组织中基本未见表达，HSP60的表达与分化程度呈负相关，在淋巴结有无转移组的表达无统计学差异。结论 提示HSP60与胃腺癌的恶性程度有相关性，可能参与了胃癌的发展与转移，可以作预后参考指数。

【关键词】 胃腺癌；HSP60；转移；HSPs

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.08.065 文章编号：1004-7484（2013）-08-4172-01

胃癌发病率居消化道恶性肿瘤之首，浸润和转移是导致胃癌患者死亡的最主要原因，也是判定预后的重要指标。热休克蛋白（heat shock protein，HSP）：热休克蛋白（heat shock proteins，HSPs）是生物细胞在受到各种细胞损伤因素刺激时产生的一类高度保守的蛋白质，HSP60家族是细胞内含量最多的HSPs，它在多肽的解离、转运和在蛋白复合物的装配和分解过程中起着重要作用[1]。我们应用免疫组化方法检测HSP60在胃腺癌中的表达，旨在探讨其与胃癌的分级、转移、浸润的关系及其意义。

1 方 法

1.1 标本 收集选用2011年新疆肿瘤医院病理科胃癌手术切除标本60例，所有患者术前未行放疗和化疗。另选切端正常黏膜组织15例作对照。高、中、低分化腺癌例数分别为11、28、21例。其中淋巴结有转移19例，未见淋巴结转移41例。所有标本均经病理检查，诊断明确无误。

1.2 切片处理 研究用蜡块以4-5μm厚度连续切片5张，贴片后置55℃烤箱中3小时后取出备用。

1.3 试剂 本研究所用抗体HSP60均为兔抗人单克隆抗体，产品编号分别为RAB-00976，与实验中所用其它试剂一起购自福州迈新生物技术公司。

1.4 实验方法 采取SP法，DAB显色。石蜡标本，4μm连续3张切片，苏木精-伊红染色，核实诊断。阳性对照玻片由福州迈新生物技术公司提供，阴性对照根据本实验的情况采用空白对照，PBS代替一抗进行免疫染色并完成全过程。

1.5 结果判定 光镜下观察HSP60阳性反应物为细胞浆内的棕黄色颗粒。免疫组织化学染色评分标准：将着色强度评分（0分：无；1分：弱；2分：中；3分：强）和阳性细胞率评分（0分：<5%；1分：5%-10%；2分：10%-20%；3分：20%-50%；4分≥50%）之和为该病例评分值。其中0-2分定为阴性病例，>2分定为阳性病例。

1.6 结果统计 用PEMS软件包进行X2检验及校正X2检验。检验水准α=0.05。

2 结 果

HSP60在正常组织中未表达，在60例腺癌组织中阳性表达例数为21例，阳性表达率为35%，明显高于对照组（P<0.05），差异有统计学意义。我们将胃腺癌根据分化程度不同分为高中低分化3组，HSP60在胃高、中、低分化腺癌阳性表达率分别为18.23%、25.0%、57.1%，χ2值是11.66，P<0.05。统计学均有显著性差异。而HSP60的表达与早晚期及民族无关，见表1。

3 讨 论

HSP60作为分子伴侣参与肿瘤细胞周期调控和表型改变，阻止细胞终末分化后凋亡，甚至可以保护肿瘤细胞免受抗癌药物、射线照射等因素诱发的凋亡，HSP60还可通过与原癌基因和抑癌基因及其蛋白产物的相互作用调节肿瘤细胞的增殖。目前已有报道证实许多恶性肿瘤细胞内常常高表达HSP60，而且在体内外许多不利于肿瘤生长的环境中具有肿瘤细胞保护作用[2]，导致肿瘤细胞耐药，化疗失败。

陈志芬[3]等研究结肠癌组织中HSP60表达明显高于正常组织，分化程度越差，表达越高，提示HSP60增高与结肠癌细胞增殖、侵袭和转移有关。在本实验研究中，我们发现，与正常胃组织对照，HSP60在胃癌组织中呈高表达，且不同分化程度胃癌组织中HSP60阳性表达率分别为18.23%、25.0%、57.1%，χ2值是5.66，P<0.05。表明不同分化程度的胃腺癌HSP60表达有差异，低分化腺癌高表达，证实了HSP60与胃腺癌的恶性程度有相关性，可以作为分化程度的一个指标。这与目前有报道证实许多恶性肿瘤细胞内常常高表达HSP60的结果相一致[4]。由此，可推测HSP60作为一种重要的基因参与了恶性肿瘤细胞增殖的转录调控过程。而本研究发现HSP60在胃癌中较正常胃黏膜存在过表达。这初步说明其过表达与胃癌的发生发展有关。因此，胃癌HSP60的过度表达，也许正是通过参与肿瘤细胞增殖的转录调控过程而产生的后果。在本研究中，胃腺癌淋巴结有癌转移及无癌转移的HSP60阳性表达率分别为47.4%、29.3%，χ2值是1.87，P>0.05。统计学无显著性差异。说明HSP60表达与胃腺癌淋巴结转移无密切相关。在本研究中，胃腺癌临床分期为T0-2及T3-4HSP60的表达阳性率分别为18.9%、60.9%，χ2值是10.97，P<0.05。早期与进展期的胃腺癌HSP60的表达有显著性差异，晚期高表达提示是在胃腺癌的进展期发挥作用。结果与杨晓春在膀胱癌中研究结论一致。因此，提示检测HSP60可作为判断胃癌恶性程度的一个指标。其原因还需进一步探索，也可能是由于本实验例数较少所致。

综上所述，HSP60与胃癌的发生发展、病期有关。HSP60可以作为评估胃癌分化程度、预后不良的指标。我们希望今后对其更深入的研究来揭开其中的秘密。

参考文献

[1] 周林静，刘炳亚，朱正纲，等.表达与胃癌浸润·转移的关系[J].上海医学，2000，23（4）：213.

[2] Cappello F，David S，Rappa F，et al.The expression of HSP60and HSP10 in large bowel carcinomas with lymph node metastase[J].BMC Cancer，2005.

[3] 陈志芬，邓长生，夏冰，等.HSP60和CD44V6在胃腺癌中的表达及其意义[J].世界华人消化杂志，2001，9（9）：988-991.

[4] Santarosa M，Favaro D，Quala M.Expression and release of HSP60 in renel-cancer patients[J].Int J Cancer，1995，62：271.